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山东省部分地区禽源致病性大肠杆菌的血清流行病学调查与耐药性检测 被引量:12
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作者 刁有江 范学政 《中国兽药杂志》 2014年第2期14-19,共6页
为调查山东省禽源致病性大肠杆菌流行的血清型及耐药性,从山东部分地区的45家养禽场分离到致病性大肠杆菌96株,应用微量平板凝集试验进行了血清型鉴定,共鉴定出18种血清型,其中优势血清型6种,分别为O78、O2、O15、O18、O143、O88,占定... 为调查山东省禽源致病性大肠杆菌流行的血清型及耐药性,从山东部分地区的45家养禽场分离到致病性大肠杆菌96株,应用微量平板凝集试验进行了血清型鉴定,共鉴定出18种血清型,其中优势血清型6种,分别为O78、O2、O15、O18、O143、O88,占定型致病性菌株的64%。抗菌药物敏感性试验发现,96株大肠杆菌对20种药物有不同程度的耐药性。75%以上的菌株对氨苄青霉素、阿莫西林、土霉素等5种抗菌药耐药,50%以上的菌株对卡那霉素、多西环素、环丙沙星等7种抗菌药表现为耐药;所有分离株存在多重耐药现象,75%的受检菌对9种或9种以上的被测药物耐药。结果表明,O78、O2、O15、O18、O143、O886种血清型是山东省部分地区近年来禽源致病性大肠杆菌的优势血清型,且禽源致病性大肠杆菌的耐药现象严重,有必要加强耐药性检测,以指导兽医临床合理使用抗菌药物。 展开更多
关键词 致病性大肠杆菌 流行病学调查 耐药性 山东省
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猪链球菌2型动物致病性试验研究 被引量:22
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作者 王继春 何孔旺 +4 位作者 何家惠 倪艳秀 侯继波 吕立新 刘冬霞 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2001年第8期27-29,共3页
选取猪链球菌 2型SS2 1、SS2 H、SS2 0 0 6 4 44、SS2 7和SS2 N (国外引进 )株 ,对BALB/c小鼠、猪、兔及普通小白鼠致病性进行试验。结果 :SS2 1、SS2 H、SS2 0 0 6 4 44、SS2 7株对BALB/c小鼠半数致死量 (LD50 )分别为 2 .1&#... 选取猪链球菌 2型SS2 1、SS2 H、SS2 0 0 6 4 44、SS2 7和SS2 N (国外引进 )株 ,对BALB/c小鼠、猪、兔及普通小白鼠致病性进行试验。结果 :SS2 1、SS2 H、SS2 0 0 6 4 44、SS2 7株对BALB/c小鼠半数致死量 (LD50 )分别为 2 .1× 10 6、3 .1× 10 7、5 .3× 10 7和 9.4× 10 7,SS2 N株以 2 .8× 10 8活菌对BALB/c小鼠不能致病 ;SS2 1株对猪LD50 为 4.2× 10 7,对猪半数感染量 (ID50 )为 1.3 3× 10 6 ,用 8.0× 10 8活菌对兔及普通小白鼠感染均不能致病。提示猪链球菌 2型人工感染可引起BALB/c小鼠和猪发病 ;其毒力因子溶菌酶释放蛋白 (MRP)和细胞外因子 (EF)的表现型与对BALB/c小鼠的致病性无相关关系 ;BALB/c小鼠可用于猪链球菌 (2型 ) 展开更多
关键词 猪链球菌2型 毒力因子 动物致病性 试验研究
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大熊猫源杯梗孢属真菌(Cyphellophora pluriseptata)的分离鉴定与致病性研究 被引量:1
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作者 马晓平 姜尧章 +8 位作者 张和民 古玉 曹三杰 王承东 左之才 李德生 凌珊珊 夏介英 王平峰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1066-1070,共5页
为探究大熊猫真菌性皮肤病的病因,取发生肉芽肿大熊猫患部的皮屑、被毛进行真菌学检查和病原分离。采用沙氏培养法对采集的皮屑和毛发样品进行分离纯化,对分离株进行形态学、分子生物学鉴定和小鼠致病性试验及药敏试验。结果显示,从样... 为探究大熊猫真菌性皮肤病的病因,取发生肉芽肿大熊猫患部的皮屑、被毛进行真菌学检查和病原分离。采用沙氏培养法对采集的皮屑和毛发样品进行分离纯化,对分离株进行形态学、分子生物学鉴定和小鼠致病性试验及药敏试验。结果显示,从样品中分离到一株真菌(JYZ030101)。对分离株JYZ030101的ITS区进行PCR扩增获得长度为617 bp片段,经Blast比对结果显示该序列与杯梗孢属真菌Cyphellophora pluriseptata的相似性为99%。结合形态学和分子生物学方法将分离菌鉴定为C.pluriseptata。动物致病性试验显示该菌对小鼠有选择性致病作用。药敏试验显示该菌对特比萘芬、两性霉素B、伊曲康唑和氟胞嘧啶耐药,对氟康唑、伏立康唑敏感。本研究为诊断和治疗C.pluriseptata引起的大熊猫真菌性皮肤病提供重要参考。 展开更多
关键词 杯梗孢属 形态学 ITS序列 致病性 药敏试验
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维氏气单胞菌生物膜体外模型的建立及影响因素的研究 被引量:3
4
作者 夏京津 张海月 +7 位作者 许瑞 张冬星 龙继兵 徐洋 沈锦玉 康元环 单晓枫 钱爱东 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第10期10-14,共5页
为探索不同理化因素对致病性维氏气单胞菌(Aeramonasveronii,AV)‘TH0426成膜的影响,采用改良微孔板法建立致病性AV生物膜体外模型并对其进行了研究。结果表明,AVTH0426能够在聚乙烯酶标板表面形成生物膜,PH值4~6,10℃和NaCl浓度4 g/... 为探索不同理化因素对致病性维氏气单胞菌(Aeramonasveronii,AV)‘TH0426成膜的影响,采用改良微孔板法建立致病性AV生物膜体外模型并对其进行了研究。结果表明,AVTH0426能够在聚乙烯酶标板表面形成生物膜,PH值4~6,10℃和NaCl浓度4 g/L培养18 h是形成生物膜的最适条件,黄颡鱼(Pseudobagrusfulvidraco)的肝脏提取液对AV TH0426形成生物膜有促进作用。这为进一步探讨维氏气单胞菌生物膜形成机制和致病机理提供了参考。 展开更多
关键词 维氏气单胞菌 形成特性 生物膜 影响因素
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规模化猪场猪链球菌病与副猪嗜血杆菌病混合感染的诊断与防治 被引量:4
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作者 何永龙 黄静琳 +2 位作者 刘琪 周如月 贾爱卿 《黑龙江畜牧兽医(下半月)》 CAS 北大核心 2016年第1期99-101,216,共4页
2014年11月份,广东省四会市某规模化养猪场保育舍仔猪出现大规模发病死亡现象,发病率达50%以上,死亡率超过30%,耐过仔猪生长缓慢,病情反复,给猪场造成严重损失。通过现场调查、剖检病死猪,结合实验室诊断技术确诊为猪链球菌病与副猪嗜... 2014年11月份,广东省四会市某规模化养猪场保育舍仔猪出现大规模发病死亡现象,发病率达50%以上,死亡率超过30%,耐过仔猪生长缓慢,病情反复,给猪场造成严重损失。通过现场调查、剖检病死猪,结合实验室诊断技术确诊为猪链球菌病与副猪嗜血杆菌病混合感染,通过制订相应的防治措施,有效控制住了病情。1发病情况2014年11月上旬,广东省四会市某规模化养猪场保育期仔猪陆续出现咳嗽、呼吸困难、精神沉郁、 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌病 猪链球菌病 混合感染 规模化养猪场 规模化猪场 保育期 实验室诊断 呼吸困难 革兰染色镜检 死亡现象
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快速检测鸡白痢沙门氏菌4种免疫传感器的对比研究 被引量:2
6
作者 马骏爽 王丹 +2 位作者 窦文超 陈妍 赵广英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期719-724,共6页
为改善电化学免疫传感器因电极修饰均一性和牢固性难以掌控等导致重现性和准确性较差的问题,本研究以鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum)为检测对象,选用丝网印刷电极(SPCE)为支持电极;通过电沉积方法修饰不同材料,包括氧化石墨烯(GO)、纳米金(... 为改善电化学免疫传感器因电极修饰均一性和牢固性难以掌控等导致重现性和准确性较差的问题,本研究以鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum)为检测对象,选用丝网印刷电极(SPCE)为支持电极;通过电沉积方法修饰不同材料,包括氧化石墨烯(GO)、纳米金(AuNPs)、离子液体(ILs),按不同组合修饰电极;进而结合酶标抗体制成快速检测致病菌的4种免疫电极;采用循环伏安法(CV)检测电化学响应信号;分别进行电极均一性、牢固性、灵敏度、特异性和稳定性的对比试验,综合检测结果进行择优筛选。结果表明,AuNPs和ILs对免疫传感器的各项性能特别是重现性和准确性的改善作用明显,与其它组比较差异显著,本研究可成为开发快速检测其它致病菌免疫传染器的研究模型。 展开更多
关键词 电化学免疫传感器 鸡白痢沙门氏菌 氧化石墨烯 纳米金 离子液体
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奶牛乳房炎致病菌的分离鉴定 被引量:1
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作者 路建彪 刘文强 裴兰英 《山东科学》 CAS 2006年第6期70-71,75,共3页
对山东聊城地区多家奶牛养殖场和养殖户采集的63份乳房炎奶样进行细菌分离鉴定。采用鉴别培养基及生化鉴定方法对奶样中的病原菌进行分离鉴定并做了药敏实验。分离菌鉴定为链球菌,葡萄球菌,大肠杆菌,棒状杆菌,绿脓杆菌等。药敏试验表明... 对山东聊城地区多家奶牛养殖场和养殖户采集的63份乳房炎奶样进行细菌分离鉴定。采用鉴别培养基及生化鉴定方法对奶样中的病原菌进行分离鉴定并做了药敏实验。分离菌鉴定为链球菌,葡萄球菌,大肠杆菌,棒状杆菌,绿脓杆菌等。药敏试验表明:氧氟沙星、强力霉素、氯霉素、庆大霉素为较为敏感的治疗药物。 展开更多
关键词 奶牛 致病菌 乳房炎 鉴定
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甘肃省健康猪群猪链球菌分离株的耐药性检测 被引量:2
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作者 邢娟 李学瑞 +1 位作者 柳纪省 胡永浩 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第2期128-131,共4页
为了解甘肃地区表观健康猪群携带猪群猪链球菌的情况,从甘肃省武威、兰州、庆阳等地采集到152份健康猪扁桃体分离猪链球菌,结果共分离到67株,分离率约44%,67株猪链球菌的耐药性检测表明,全部猪链球菌分离株具有多重耐药性,其中1株对22... 为了解甘肃地区表观健康猪群携带猪群猪链球菌的情况,从甘肃省武威、兰州、庆阳等地采集到152份健康猪扁桃体分离猪链球菌,结果共分离到67株,分离率约44%,67株猪链球菌的耐药性检测表明,全部猪链球菌分离株具有多重耐药性,其中1株对22种抗生素中的16种产生耐药性。用我国致病性链球菌2型特有的89 k毒力岛序列特异性引物对67株猪链球菌进行PCR鉴定,其中1株能够扩增出该特异性片段,表明在该地区健康猪群中存在致病性2型猪链球菌。 展开更多
关键词 猪链球菌 药敏试验 毒力岛
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产气荚膜梭菌多毒素融合蛋白的表达与纯化及基因工程亚单位多价疫苗的制备 被引量:6
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作者 孙雨 翟新验 +7 位作者 董浩 赵柏林 王晓英 曲萍 胡冬梅 杨天意 石慧 宋晓晖 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2249-2255,共7页
产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的α、β2和ε毒素是病原的主要外毒素,也是制备预防该病基因工程亚单位多价疫苗的主要研究对象。本研究通过优化密码子、去除蛋白信号肽、选择亲水性与抗原性较好的序列、同时优化表达条件等方... 产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的α、β2和ε毒素是病原的主要外毒素,也是制备预防该病基因工程亚单位多价疫苗的主要研究对象。本研究通过优化密码子、去除蛋白信号肽、选择亲水性与抗原性较好的序列、同时优化表达条件等方法的探索,在大肠杆菌表达系统中获得了高效表达的可溶性α-β2-ε融合蛋白;用该蛋白免疫小鼠后可产生较高水平的血清抗体,针对A、B、C和D型产气荚膜梭菌的免疫保护率分别为100%,100%,90%,100%;小鼠三免后7~14d的抗体效价达到峰值。本研究构建了多毒素融合蛋白表达载体Pet30a-α-β2-ε,并成功表达与纯化出了高效可溶性的目的蛋白,且表达出的融合蛋白具有良好的免疫原性,可以进一步用于羊三联四防基因工程亚单位疫苗的研制,具有较强的研究价值和应用前景。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 融合蛋白 可溶性表达与纯化 基因工程亚单位疫苗
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鸭多杀性巴氏杆菌抗体检测胶体金试纸条的研制及应用 被引量:3
10
作者 程龙飞 陈红梅 +6 位作者 傅光华 江南松 傅秋玲 万春和 黄瑜 刘荣昌 施少华 《动物医学进展》 北大核心 2023年第6期65-69,共5页
为建立快速检测鸭血清多杀性巴氏杆菌抗体的方法,将兔抗鸭IgG标记胶体金,喷涂金标垫,用浓度为0.2 mg/mL的荚膜和0.2 mg/mL羊抗兔IgG抗体分别作为检测线和质控线,制备了检测鸭多杀性巴氏杆菌抗体的胶体金试纸条(D-CGTS)。特异性试验显示... 为建立快速检测鸭血清多杀性巴氏杆菌抗体的方法,将兔抗鸭IgG标记胶体金,喷涂金标垫,用浓度为0.2 mg/mL的荚膜和0.2 mg/mL羊抗兔IgG抗体分别作为检测线和质控线,制备了检测鸭多杀性巴氏杆菌抗体的胶体金试纸条(D-CGTS)。特异性试验显示,仅鸭抗多杀性巴氏杆菌血清检测为阳性,阴性血清、鸭抗大肠埃希氏菌、鸭抗鸭疫里默氏菌、鸭抗沙门氏菌和鸭抗金黄色葡萄球菌血清的检测结果均为阴性,表明D-CGTS的特异性良好。敏感性试验结果显示,对效价1∶16(琼脂扩散试验)的鸭抗多杀性巴氏杆菌血清1∶320倍稀释后采用制备的试纸条检测结果仍为阳性,表明D-CGTS的敏感性较高。重复性试验结果显示,同批次的不同试纸条和不同批次的试纸条,检测阴性血清和鸭抗多杀性巴氏杆菌血清的结果相同,表明D-CGTS的重复性好。对92份鸭血清采用D-CGTS和ELISA进行检测,结果显示,阳性符合率为94.03%,阴性符合率为100%,总符合率为95.65%。结果表明,制备的D-CGTS操作简单,具有较强的特异性、较高的敏感性和较好的重复性,适合在兽医临床推广应用。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 胶体金试纸条 荚膜
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云南省山羊皮下脓肿的病原菌种类调查分析
11
作者 李富祥 夏九鲜 +4 位作者 喻永福 朱沛 杨仕标 赵文华 高华峰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2267-2273,共7页
采用细菌分离鉴定和PCR 2种检测方法对来源于昆明市西山区、石林县、宜良县和弥勒县山羊养殖场的128份山羊皮下脓肿样品进行检测,并比较2种方法的检测结果。PCR检测结果显示,在128份皮下脓肿样品中,化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogen... 采用细菌分离鉴定和PCR 2种检测方法对来源于昆明市西山区、石林县、宜良县和弥勒县山羊养殖场的128份山羊皮下脓肿样品进行检测,并比较2种方法的检测结果。PCR检测结果显示,在128份皮下脓肿样品中,化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)、伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的检出率分别为17.19%(22/128),20.31%(26/128)和67.19%(86/128)。细菌分离鉴定结果显示,A.pyogenes、C.pseudotuberculosis、S.aureus和绵羊链球菌(Streptococcus ovis)的分离率分别为9.38%(12/128),20.31%(26/128),65.63%(84/128)和1.56%(2/128)。在128份皮下脓肿样品中,细菌分离鉴定和PCR 2种方法只检出1种病原菌的样品比例分别为95.31%(122/128)和92.19%(118/128),2种检测方法的总符合率为90.63%(116/128)。结果表明,S.aureus是云南省山羊皮下脓肿最主要的病原菌,S.ovis可能是山羊皮下脓肿的潜在新病原菌。 展开更多
关键词 皮下脓肿 山羊 病原菌种类 分离 PCR
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减毒沙门氏菌在疫苗和疫苗载体方面的研究进展 被引量:7
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作者 李正 程相朝 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期40-44,共5页
沙门氏菌不仅可以用作疫苗,也是理想的疫苗载体,已受到医学与兽医学的广泛重视。沙门氏菌可以经黏膜途径免疫(口服或鼻内),操作方便,对接种对象刺激小;此外,沙门氏菌为胞内侵袭细菌,能有效递呈抗原,激发抗沙门氏菌和诱导外源蛋白的特异... 沙门氏菌不仅可以用作疫苗,也是理想的疫苗载体,已受到医学与兽医学的广泛重视。沙门氏菌可以经黏膜途径免疫(口服或鼻内),操作方便,对接种对象刺激小;此外,沙门氏菌为胞内侵袭细菌,能有效递呈抗原,激发抗沙门氏菌和诱导外源蛋白的特异性体液免疫反应与细胞免疫反应,并能同时诱导黏膜免疫与全身免疫。文章对沙门氏菌的入侵机制、免疫机理及其在疫苗中的应用状况进行了综述,为新型疫苗的研究提供参考。 展开更多
关键词 沙门氏菌 疫苗 载体
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金黄色葡萄球菌5型荚膜多糖偶联抗原的制备及免疫原性分析 被引量:4
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作者 杨学云 吴建勇 +2 位作者 李建军 王登峰 王治才 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期299-303,共5页
为建立金黄色葡萄球菌5型荚膜多糖(CP5)纯化与偶联技术方法,获得具有免疫原性的CP5偶联抗原,采用高压破碎菌体的方法释放荚膜多糖,酶处理去除核酸和蛋白质,通过离子交换层析进一步纯化,得到纯化的CP5,并对其纯度和反应原性进行检测;采... 为建立金黄色葡萄球菌5型荚膜多糖(CP5)纯化与偶联技术方法,获得具有免疫原性的CP5偶联抗原,采用高压破碎菌体的方法释放荚膜多糖,酶处理去除核酸和蛋白质,通过离子交换层析进一步纯化,得到纯化的CP5,并对其纯度和反应原性进行检测;采用己二酸二酰肼(ADH)间桥法制备CP5-牛血清白蛋白(CP5-BSA)偶联抗原,加佐剂免疫小鼠,进行抗体水平测定。结果表明,纯化的CP5纯度为675.1g/kg,经用免疫琼脂双扩散试验检测,纯化多糖仅与同型菌株抗血清发生沉淀反应,偶联抗原CP5-BSA可以刺激小鼠产生CP5免疫应答。此研究结果为奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌亚单位疫苗的研制提供了试验依据。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 5型荚膜多糖 偶联抗原 免疫原性
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以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的重组NDV-HN口服疫苗的构建与鉴定 被引量:5
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作者 田芳华 程相朝 +3 位作者 张春杰 李银聚 李静 刘一尘 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期59-63,共5页
试验旨在构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-HN)。以pMD18-T-HN为模板,通过PCR扩增出NDV HN基因片段,定向插入原核表达载体pYA3493中,将重组表达质粒pYA3493-HN转入χ6097,再转入减毒... 试验旨在构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-HN)。以pMD18-T-HN为模板,通过PCR扩增出NDV HN基因片段,定向插入原核表达载体pYA3493中,将重组表达质粒pYA3493-HN转入χ6097,再转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd,通过双酶切和PCR对质粒进行鉴定。结果表明,携带NDV HN基因片段的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-HN)构建成功。本研究结果为开发鸡新城疫的口服基因工程活载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 新城疫 HN基因 原核表达载体pYA3493 减毒鼠伤寒沙门氏菌
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进口蜂蜜中幼虫芽孢杆菌的分离鉴定及调查 被引量:3
15
作者 李如松 王建峰 +5 位作者 倪健波 黄素文 郑剑 赵秀玲 陈先锋 黄绍棠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1071-1073,共3页
为调查分析进口蜂蜜中携带幼虫芽孢杆菌的情况和菌株特性,本研究对2017年度来自10个国家和地区的71份蜂蜜样品进行幼虫芽孢杆菌分离并纯化培养,将分离的菌株进行生化、16S r RNA基因鉴定和序列分析。结果显示:分离的31株均为幼虫芽孢杆... 为调查分析进口蜂蜜中携带幼虫芽孢杆菌的情况和菌株特性,本研究对2017年度来自10个国家和地区的71份蜂蜜样品进行幼虫芽孢杆菌分离并纯化培养,将分离的菌株进行生化、16S r RNA基因鉴定和序列分析。结果显示:分离的31株均为幼虫芽孢杆菌,阳性率为43.6%(31/71);16S r RNA基因序列分析结果显示其与幼虫芽孢杆菌(ATCC9545)等同源性在97%以上。31株分离株16S r RNA基因保守性强,同源性达99.8%以上,遗传变异性较弱。本研究在国内首次为进口蜂蜜传播美洲幼虫腐臭病风险分析提供基础数据,为制定进口蜂蜜风险控制措施提供依据。 展开更多
关键词 进口蜂蜜 幼虫芽孢杆菌 分离鉴定
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泰乐菌素和阿维拉霉素对大肠杆菌粘附性能的影响 被引量:3
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作者 王丽纹 《饲料研究》 CAS 2002年第4期28-29,共2页
关键词 致病微生物 抗生素 作用机制 泰乐菌素 阿维拉霉素 大肠杆菌 粘附性能
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超级细菌NDM-1质粒的水平转移研究
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作者 刘果 孙洋 +6 位作者 纪雪 佟盼盼 祝令伟 刘军 周伟 郭学军 冯书章 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第10期15-21,共7页
为探究超级细菌NDM-1质粒水平传播的特性,以携带NDM-1质粒的猫源洛菲不动杆菌和人源醋酸钙不动杆菌为供体菌,以工程菌株大肠杆菌DH5α和大肠杆菌、沙门氏菌弱毒菌株为受体菌,通过接合试验验证了NDM-1基因通过质粒跨种传播的可能性。结... 为探究超级细菌NDM-1质粒水平传播的特性,以携带NDM-1质粒的猫源洛菲不动杆菌和人源醋酸钙不动杆菌为供体菌,以工程菌株大肠杆菌DH5α和大肠杆菌、沙门氏菌弱毒菌株为受体菌,通过接合试验验证了NDM-1基因通过质粒跨种传播的可能性。结果显示,猫源NDM-1质粒可以转入E.coli DH5α中,并可以DH5α为中介,转入猪霍乱沙门氏菌C500中;而人源NDM-1质粒仅转入E.coli DH5α中,未能转入其他菌株。NDM-1质粒在沙门氏菌C500中比在E.coli DH5α中较为稳定遗传。质粒的导入并不影响宿主菌的生长特性。本研究初步揭示了NDM-1的传播方式,表明NDM-1质粒能够跨越菌种界限,并可以大肠杆菌为中介,转移至其它菌株中。 展开更多
关键词 新德里β内酰胺酶-1 接合转移 水平传播
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌细胞膜20肽重组蛋白的表达和鉴定
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作者 崔凡 李良怿 周敬敬 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第12期1693-1695,1701,共4页
目的利用基因重组技术构建原核质粒表达耐甲氧西林金黄色葡萄球菌细胞膜20肽重组蛋白(SA0587),为进一步研究其生物学作用和构建小鼠Ig A肾病动物模型提供重要条件。方法以SA0587的序列为参照,设计出SA0587基因,构建p ET28a-SA0587-GFP... 目的利用基因重组技术构建原核质粒表达耐甲氧西林金黄色葡萄球菌细胞膜20肽重组蛋白(SA0587),为进一步研究其生物学作用和构建小鼠Ig A肾病动物模型提供重要条件。方法以SA0587的序列为参照,设计出SA0587基因,构建p ET28a-SA0587-GFP重组质粒,以NcoⅠ/XhoⅠ为酶切位点进行双酶切鉴定,同时将符合预期的单克隆进行基因测序,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达菌中;挑取单菌落培养活化后,用诱导剂异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白SA0587;通过SDS-PAGE电泳及Western blot实验鉴定目的蛋白。结果成功构建了重组质粒并进行双酶切鉴定和基因测序,重组质粒大量诱导表达目的蛋白后镍胶纯化,通过SDSPAGE电泳及Western blot实验鉴定目的蛋白为SA0587。结论实验表达和鉴定了SA0587,为后期Ig A肾病小鼠模型的建立提供必要条件。 展开更多
关键词 重组蛋白 质粒 IG A肾病模型 动物实验
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型PCR方法的建立及初步应用 被引量:1
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作者 李海利 徐引弟 +6 位作者 朱文豪 张青娴 游一 郎利敏 王克领 张立宪 侯自花 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期38-40,共3页
为了建立猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型分子鉴定方法,本研究根据胸膜肺炎放线杆菌从编码荚膜多糖的碱基序列设计1对引物,扩增特异性的720 bp核酸片段。结果表明,以APP为模板,均能扩增出与预期一致的1条720 bp核酸片段,所得PCR产物经... 为了建立猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型分子鉴定方法,本研究根据胸膜肺炎放线杆菌从编码荚膜多糖的碱基序列设计1对引物,扩增特异性的720 bp核酸片段。结果表明,以APP为模板,均能扩增出与预期一致的1条720 bp核酸片段,所得PCR产物经测序,与Gen Bank已发表的胸膜肺炎放线杆菌血清型6型的同源性达99%以上。本研究建立了PCR检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型分子鉴定方法,该方法的建立为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌病的诊断和防治及鉴定提供了基础。 展开更多
关键词 猪传染性胸膜肺炎 放线杆菌 血清6型
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大肠埃希菌K88ac菌毛蛋白亚基因的原核表达及其免疫原性研究 被引量:1
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作者 李国军 侯喜林 朴范泽 《动物医学进展》 CSCD 2007年第8期1-4,共4页
从E.coliC83902中扩增出不含信号肽序列的K88ac菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到表达载体pQE-30中,构建了原核表达载体pQE30-K88ac,并转入E.coliXL1-Blue中,经IPTG诱导后,重组蛋白以包涵体形式获得高效表达。Western blot结果显示,表达... 从E.coliC83902中扩增出不含信号肽序列的K88ac菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到表达载体pQE-30中,构建了原核表达载体pQE30-K88ac,并转入E.coliXL1-Blue中,经IPTG诱导后,重组蛋白以包涵体形式获得高效表达。Western blot结果显示,表达的蛋白能够被K88ac单抗识别,用纯化的蛋白免疫小鼠,能够抵抗1 MLD大肠埃希菌强毒株C83902的攻击,这表明构建的工程菌株XL1-Blue(pQE30-K88ac)可以作为预防幼畜大肠埃希菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠埃希菌 K88ac菌毛蛋白 表达 免疫原性
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