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植物抗逆性与水杨酸介导的信号传导途径的关系 被引量：131
1
作者 林忠平 胡鸢雷 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第2期185-188,共4页
基因表达既受发育过程的调控又受外界环境的影响。无论是内因还是外因诱发一组基因表达时都涉及信号传导(signal transduction)问题。局部器官和组织所发生的生理变化的信息要传递到远处的组织,引起基因表达时间和空间上的协调。信号传... 基因表达既受发育过程的调控又受外界环境的影响。无论是内因还是外因诱发一组基因表达时都涉及信号传导(signal transduction)问题。局部器官和组织所发生的生理变化的信息要传递到远处的组织,引起基因表达时间和空间上的协调。信号传导途径的研究是当今分子生物学的研究热点之一。 作为信号传递的分子主要是小分子物质,属于次生代谢产物。也发现某些小肽具有信号分子的功能。信号分子可以在胞间扩散,亦可通过输导组织传送到远处的器官。 展开更多
关键词 植物抗逆性 水杨酸 信号传导 植物生态学
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干旱诱导性启动子驱动的海藻糖-6-磷酸合酶基因载体的构建及转基因烟草的耐旱性 被引量：78
2
作者 赵恢武 陈杨坚 +2 位作者 胡鸢雷 高音 林忠平 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第6期616-619,共4页
通过PCR程序克隆拟南芥 (Arabidopsisthaliana (L .)Heynh .)的干旱诱导性启动子Prd2 9A及来自酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaeHansen)的海藻糖_6_磷酸合酶基因 (TPS) ,并将它们组成可在植物中表达的载体RT。通过根癌土壤杆菌 (Agroba... 通过PCR程序克隆拟南芥 (Arabidopsisthaliana (L .)Heynh .)的干旱诱导性启动子Prd2 9A及来自酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaeHansen)的海藻糖_6_磷酸合酶基因 (TPS) ,并将它们组成可在植物中表达的载体RT。通过根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)LBA44 0 4介导 ,获得转基因烟草 (NicotianatabacumL .)。Southern分析表明TPS基因已经整合到烟草基因组中。Northern分析表明TPS基因的表达受干旱胁迫的诱导。转基因烟草的形态发生多种改变 ,包括变矮 ,茎变细 ,叶子呈柳叶状 ,腋芽明显 ,同时耐旱性得到增强。 展开更多
关键词 干旱诱导性启动子 烟草耐旱性 TPS 转基因
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冷诱导基因的转录因子CBF1转化油菜和烟草及抗寒性鉴定 被引量：60
3
作者 甄伟 陈溪 +2 位作者 孙思洋 胡鸢雷 林忠平 《自然科学进展（国家重点实验室通讯）》 2000年第12期1104-1108,共5页
为研究冷诱导基因的转录因子CBFI(C-repeat binding factor)基因对植物抗寒的作用,利用PCR技术从拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)中扩增并克隆了该转录因子,并将其与CaMV 35S启动子融合构建成植物表达载体pBPCBF1。以农杆菌介导的叶盘法... 为研究冷诱导基因的转录因子CBFI(C-repeat binding factor)基因对植物抗寒的作用,利用PCR技术从拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)中扩增并克隆了该转录因子,并将其与CaMV 35S启动子融合构建成植物表达载体pBPCBF1。以农杆菌介导的叶盘法,分别转化了油菜和烟草。经PCR程序的DNA分析和Southern杂交对具有卡那霉素抗性的再生植株进行了鉴定,表明CBFl基因已整合进烟草和油菜基因组中。以电解质渗漏法分别检测了转化的油菜和烟草的抗寒性,结果显示转基因油菜的抗寒性较未转基因油菜有明显提高,转基因烟草抗寒性也有一定的提高。因此利用对转录因子的调控来提高植物的抗寒性可能有很好的应用前景。 展开更多
关键词 CBF1基因 遗传转化 抗寒性 转基因烟草 转基因油菜 冷诱导基因
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果实专一性启动子驱动ipt基因在番茄中的表达及其对番茄果实发育的影响 被引量：36
4
作者 毛自朝 于秋菊 +4 位作者 甄伟 郭俊毅 胡鸢雷 高音 林忠平 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期444-448,T001,共6页
用PCR方法获得了番茄果实专一性启动子（2A12）和农杆菌（C58）Ti质粒上的ipt矿基因.分别构建由2A12驱动下的gus和ipt基因的植物表达载体,并使两种嵌合基因经农杆菌介导转入番茄品种“中蔬4号”的基因组中.GUS组织化学活性分析表明,2A1... 用PCR方法获得了番茄果实专一性启动子（2A12）和农杆菌（C58）Ti质粒上的ipt矿基因.分别构建由2A12驱动下的gus和ipt基因的植物表达载体,并使两种嵌合基因经农杆菌介导转入番茄品种“中蔬4号”的基因组中.GUS组织化学活性分析表明,2A12启动子具有严格的果实表达专一性.2A12驱动ipt基因在番茄中表达,使得果实中细胞分裂素的含量增加,最终导致果实中种子发育的停滞和胎座组织的增厚,并形成无籽番茄果实,同时转基因番茄果实成熟进程受阻且果实采后的储藏保鲜时间延长了1～2周.进一步分析发现,转基因番茄坐果率和产量均有不同程度的增加,虽然可溶性糖含量略有降低,但果实中干物质和粗蛋白含量有所增高. 展开更多
关键词 番茄 果实发育 2A12 果实性启动子 IPT基因 细胞分裂素 基因表达 植物表达载体
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耐旱植物厚叶旋蒴苣苔BDN1脱水素基因的克隆及表达特性分析 被引量：28
5
作者 赵恢武 刘晗 +4 位作者 于海源 胡鸢雷 高音 林忠平 李振宇 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第15期1648-1654,共7页
根据已知植物脱水素基因的保守区域设计引物，采用ＲＴ－ＰＣＲ方法从耐旱植物厚叶旋蒴苣苔的总 ｃＤＮＡ中扩增出一个 ５００ ｂｐ的与植物脱水素基因同源的序列．结合 ５’ＲＡＣＥ获得了植物脱水素基因家族一个新成员ＢＤＮ１的全长... 根据已知植物脱水素基因的保守区域设计引物，采用ＲＴ－ＰＣＲ方法从耐旱植物厚叶旋蒴苣苔的总 ｃＤＮＡ中扩增出一个 ５００ ｂｐ的与植物脱水素基因同源的序列．结合 ５’ＲＡＣＥ获得了植物脱水素基因家族一个新成员ＢＤＮ１的全长ｃＤＮＡ（１１４８ ｂｐ）．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析表明，ＢＤＮ１基因在厚叶旋蒴苣苔基因组中以单拷贝形式存在．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果表明，该基因的表达受干旱、寒冷及ＡＢＡ的诱导．推测该基因与厚叶旋蒴苣苔的耐旱特性有关． 展开更多
关键词 耐旱植物 厚叶旋蒴苣苔 脱水素基因 表达 克隆
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植物水孔蛋白研究进展 被引量：34
6
作者 于秋菊 吴锜 +1 位作者 林忠平 李景富 《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期855-866,共12页
植物水孔蛋白在植物体内形成水选择性运输通道 ,在植物种子萌发、细胞伸长、气孔运动、受精等过程中调节水分的快速跨膜运输。有些水孔蛋白还在植物逆境应答中起着重要作用 ,因此研究水孔蛋白与植物抗旱性的关系引起了广泛关注。对水孔... 植物水孔蛋白在植物体内形成水选择性运输通道 ,在植物种子萌发、细胞伸长、气孔运动、受精等过程中调节水分的快速跨膜运输。有些水孔蛋白还在植物逆境应答中起着重要作用 ,因此研究水孔蛋白与植物抗旱性的关系引起了广泛关注。对水孔蛋白的发现、结构、分类、分布。 展开更多
关键词 植物水孔蛋白 水分运输 基因表达 结构 分类 分布 调控 抗旱性
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^(60)Co辐射高羊茅性状变异研究 被引量：46
7
作者 张彦芹 贾炜珑 +4 位作者 杨丽莉 郭先龙 吴锜 胡鸢雷 林忠平 《草业学报》 CSCD 2005年第4期65-71,共7页
本研究以高羊茅爱瑞3号为材料,用60Co-r射线照射干种子和分化苗,研究其适宜诱变剂量及性状变异。结果表明,出苗率和植株存活率随照射剂量增加而降低,干种子适宜诱变剂量为100~150Gy,分化苗适宜诱变剂量为20~25Gy;辐射当代材料在植株形... 本研究以高羊茅爱瑞3号为材料,用60Co-r射线照射干种子和分化苗,研究其适宜诱变剂量及性状变异。结果表明,出苗率和植株存活率随照射剂量增加而降低,干种子适宜诱变剂量为100~150Gy,分化苗适宜诱变剂量为20~25Gy;辐射当代材料在植株形态性状和耐旱(寒)性状上均发生了明显变异,其变异频率分别为1.52%~8.33%、1.52%~1.85%;60Co-r射线辐射可以获得叶片变小、变细且具有耐旱(寒)特性的高羊茅突变体;RAPD(随机PCR扩增)分析显示了这些突变体在DNA水平上发生的变异。 展开更多
关键词 高羊茅 辐射诱变 突变体 性状变异
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转基因马铃薯中病原诱导GO基因的表达及其对晚疫病的抗性 被引量：27
8
作者 甄伟 陈溪 +3 位作者 梁浩博 胡鸢雷 高音 林忠平 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第10期1071-1075,共5页
利用 ＰＣＲ技术从黑曲霉（Ａｓｐｅｎｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ）中扩增并克隆了葡萄糖氧化酶（ｇｌｕｃｏｓｅ ｏｘｉｄａｓｅ，简称ＧＯ）基因，并将马铃薯病原诱导型启动子（Ｐｒｎｌ－１基因启动子）与其融合构建了植物表达载体ｐ... 利用 ＰＣＲ技术从黑曲霉（Ａｓｐｅｎｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ）中扩增并克隆了葡萄糖氧化酶（ｇｌｕｃｏｓｅ ｏｘｉｄａｓｅ，简称ＧＯ）基因，并将马铃薯病原诱导型启动子（Ｐｒｎｌ－１基因启动子）与其融合构建了植物表达载体ｐＣＡＭＧＯ．经农杆菌介导转化获得了转基因植株，Ｓｏｕｔｎｅｒｎ杂交显示葡萄糖氧化酶基因已经整合进马铃薯基因组．该基因的表达及所引起的Ｈ_２Ｏ_２的生成由淀粉－ＫＩ的显色反应得到证实．用马铃薯晚疫病 Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｄｓｔａｎｓ复合生理小种侵染，结果表明：转基因马铃薯中病原诱导型启动子可受马铃薯晚疫病病原的诱导；获得的转基因植株对晚疫病的抗性水平各不相同，多数表现发病时间推迟和病征明显减弱，其中４株表现明显抗性，１株形成过敏性病斑表现高度抗性．表明病原诱导型启动于驱动ＧＯ基因的表达在抗植物真菌病基因工程中具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 转基因马铃薯 病原诱导型启动子 晚疫病 抗性
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住宅环境设备的现状与发展 被引量：16
9
作者 范存养 林忠平 《暖通空调》 北大核心 2002年第4期34-42,共9页
探讨了住宅的环境需求和设计保证 ,叙述了我国住宅设备现状 ,详细列举并比较了各种户式中央空调方式的特点及其适用性 ,介绍了日本在家用空调方面采用的新技术 ;讨论了集中式住宅空调的可行性、住宅空调与热水供应的一体化、住宅的全面... 探讨了住宅的环境需求和设计保证 ,叙述了我国住宅设备现状 ,详细列举并比较了各种户式中央空调方式的特点及其适用性 ,介绍了日本在家用空调方面采用的新技术 ;讨论了集中式住宅空调的可行性、住宅空调与热水供应的一体化、住宅的全面换气设备 ,介绍了日本的环境共生型住宅及其设备。 展开更多
关键词 住宅 环境 能源 空调设备 热湿环境
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番茄转果聚糖合酶基因获得抗寒植株 被引量：23
10
作者 王关林 李铁松 +3 位作者 方宏筠 胡鸢雷 赵恢武 林忠平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1193-1197,共5页
从枯草芽孢杆菌毖Bacillus subtilis中分离克隆果聚糖合酶(levansucrase)基因sacB,构建置于CaMV35s启动子调控下的表达载体,通过农杆菌介导,将sacB基因导入番茄栽培品种碧娇。Southern杂交证明,目的基因已经整合到番茄基因组中。RT-PCR... 从枯草芽孢杆菌毖Bacillus subtilis中分离克隆果聚糖合酶(levansucrase)基因sacB,构建置于CaMV35s启动子调控下的表达载体,通过农杆菌介导,将sacB基因导入番茄栽培品种碧娇。Southern杂交证明,目的基因已经整合到番茄基因组中。RT-PCR分析表明,sacB基因在转基因植株中获得转录。在含50mg·ml-1卡那霉素生根培养基中转化植株生根良好。抗冻试验、叶片电导率测定、多糖含量测定的试验结果均表明,果聚糖合酶基因赋予转基因番茄良好的抗寒性状。 展开更多
关键词 番茄 转果聚糖合酶基因 抗寒植株 农杆菌转化
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转基因草坪草的研究概况与展望 被引量：24
11
作者 吴錡 胡鸢雷 +2 位作者 倪挺 贾炜珑 林忠平 《草业科学》 CAS CSCD 2004年第1期29-34,共6页
通过转基因技术在草坪草改良中应用的介绍 ,得出 :采用现代基因工程来改良草坪草有巨大的商业潜力 ,草坪植物的组织培养和再生系统的建立为DNA的直接转移和农杆菌介导的转化提供了条件 ;遗传修饰的草坪草改善了其抗旱、抗高 (低 )温、... 通过转基因技术在草坪草改良中应用的介绍 ,得出 :采用现代基因工程来改良草坪草有巨大的商业潜力 ,草坪植物的组织培养和再生系统的建立为DNA的直接转移和农杆菌介导的转化提供了条件 ;遗传修饰的草坪草改善了其抗旱、抗高 (低 )温、抗病、抗除草剂和耐践踏的特性 ;携带异戊烯基转移酶基因的草坪草表现出分蘖力加强 ,严冬绿期延长 ;在期望利益的同时 ,应注意评估转基因草坪的生物安全性问题。 展开更多
关键词 草坪草 转基因技术 组织培养 再生系统 生物安全 抗逆性 分蘖力
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野生大豆(G.soja)种子贮藏蛋白组份 11S/7S 的研究 被引量：24
12
作者 徐豹 邹淑华 +2 位作者 庄炳昌 林忠平 赵玉锦 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期235-241,共7页
利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了中国不同地区(24—51°N,97—135°E,0—2650M)野生大豆213份种子贮藏蛋白组份11S 与7S 的比值,比值范围为0.36—4.40,平均值为1.06。首次发现了11S/7S 值与材料原产地纬度呈极显著正相关(r=0... 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了中国不同地区(24—51°N,97—135°E,0—2650M)野生大豆213份种子贮藏蛋白组份11S 与7S 的比值,比值范围为0.36—4.40,平均值为1.06。首次发现了11S/7S 值与材料原产地纬度呈极显著正相关(r=0.5689^(**))。并结合野生大豆生态区提出蛋白组份形成与生态诸因素之间的可能联系。从凝胶电泳扫描图的分析,提出低纬度材料11S 蛋白酸性亚基比值较高,而7S 蛋白的变异以36—40°N 材料最为丰富。得到一份11S/7S=4.40的宝贵材料,为品质育种提供了优良基因型。 展开更多
关键词 野生大豆 贮藏 蛋白组分 凝胶电脉
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根癌农杆菌介导的甘薯遗传转化及转基因植株的再生 被引量：28
13
作者 高峰 龚一富 +1 位作者 林忠平 王小佳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期751-756,共6页
以甘薯优良品种“新大紫”的茎尖培养再生植株为试材 ,经根癌农杆菌介导将甘薯块根贮藏蛋白启动子 (Sporamin promoter)调控下的 10 k D玉米醇溶蛋白基因导入到“新大紫”中 ,并获得了转化植株。甘薯品种“新大紫”再生植株的茎切段 ,... 以甘薯优良品种“新大紫”的茎尖培养再生植株为试材 ,经根癌农杆菌介导将甘薯块根贮藏蛋白启动子 (Sporamin promoter)调控下的 10 k D玉米醇溶蛋白基因导入到“新大紫”中 ,并获得了转化植株。甘薯品种“新大紫”再生植株的茎切段 ,与携带有表达载体质粒 p SP10 Z的根癌农杆菌菌株 LBA4 4 0 4共培养后 ,在含 75 mg/ L 卡那霉素 (Kan)的筛选培养基上可产生抗性芽 ,最高频率达 6.2 %。其中 ,32 .1%的抗性芽可在含 10 0 mg/ L Kan的培养基上生根 ,从而形成转化植株。PCR和 PCR-Southern检测证实 ,10 k D玉米醇溶蛋白基因已导入并整合到甘薯品种“新大紫”的基因组中。 展开更多
关键词 玉米醇溶蛋白基因 根癌农杆菌 转化 甘薯 转基因植株 再生
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外源野生大豆DNA导入栽培大豆引起的变异 被引量：22
14
作者 雷勃钧 尹光初 +6 位作者 王树林 卢翠华 钱华 周思君 张开旺 隋德志 林忠平 《中国油料》 CSCD 北大核心 1989年第3期11-14,共4页
本文利用花粉管通道在大豆自花受粉后,将野生大豆DNA导入栽培大豆,从而引起了后代性状的广泛变异。结果进一步证明了外源DNA片段直接导入受体植物卵细胞、合子或早期胚细胞,部分片段可被受体细胞DNA整合乃至表达理论的可行性和实用价值。
关键词 大豆 外源DNA 导入 变异 基因转移
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植物耐旱基因工程研究进展 被引量：11
15
作者 唐先兵 赵恢武 林忠平 《首都师范大学学报（自然科学版）》 2002年第3期47-51,共5页
随着生物技术的发展 ,特别是基因工程技术的迅速发展 ,植物耐旱已从传统的植物生理研究转向分子方向 .目前植物耐旱研究的分子生物学方法主要是基因工程技术 ,包括植物耐旱相关基因的克隆 ,植物水胁迫代谢调节相关基因的分离、鉴定 ,以... 随着生物技术的发展 ,特别是基因工程技术的迅速发展 ,植物耐旱已从传统的植物生理研究转向分子方向 .目前植物耐旱研究的分子生物学方法主要是基因工程技术 ,包括植物耐旱相关基因的克隆 ,植物水胁迫代谢调节相关基因的分离、鉴定 ,以及通过植物遗传转化改变植物遗传性状———获得稳定的耐旱植株 ,进一步推广生产 .利用植物基因工程技术获得稳定耐旱植株 ,对于干旱地区的农业、生态环境、畜牧业以及城市绿地的改造来说可能又将引起一场新的绿色革命 . 展开更多
关键词 植物耐旱基因工程 研究进展 水胁迫 分子生物学 耐旱机制 转录因子
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紫云英ISSR引物的筛选及PCR反应体系的优化 被引量：29
16
作者 孙清信 陈坚 +4 位作者 张辉 祁建民 林忠平 胡鸢雷 林新坚 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期870-878,共9页
以紫云英为研究材料,用哥伦比亚大学(UBC)公布的100条ISSR引物和11种株系紫云英品种的DNA为模板进行PCR扩增,筛选出33条扩增条带较好的ISSR引物,对其中的ISSR引物进行梯度PCR,筛选出最佳的退火温度。再采用正交试验和单因素试验相结合... 以紫云英为研究材料,用哥伦比亚大学(UBC)公布的100条ISSR引物和11种株系紫云英品种的DNA为模板进行PCR扩增,筛选出33条扩增条带较好的ISSR引物,对其中的ISSR引物进行梯度PCR,筛选出最佳的退火温度。再采用正交试验和单因素试验相结合的方法对紫云英ISSR-PCR反应体系的5种因素(模板、Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化浓度。确立了适合紫云英的ISSR分析的反应体系。在25μl反应体系中,其反应浓度为:DNA模版50.00ng,Mg2+2.00mol/L,Taq聚合酶1.0 U,dNTP 0.25mmol/L,引物0.20μmol/L,2.5μl 10×buffer。本试验为以后利用ISSR技术进行紫云英遗传多样性分析和物种保护奠定了技术基础。 展开更多
关键词 紫云英 退火温度 ISSR引物 正交试验 体系优化
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小麦转TPS基因植株的获得及其初步功能鉴定 被引量：23
17
作者 杜丽璞 徐惠君 +1 位作者 叶兴国 林忠平 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期369-373,共5页
为了探索利用基因工程改良小麦抗旱性和耐盐性的途径,通过基因枪法将具有抗旱和耐盐碱功能的海藻糖合酶(TPS)基因导入普通小麦品种CB9945,获得了转TPS基因的小麦植株,对T0代植株进行了PCR检测,对T2代植株进行了叶片涂抹除草剂检测并进... 为了探索利用基因工程改良小麦抗旱性和耐盐性的途径,通过基因枪法将具有抗旱和耐盐碱功能的海藻糖合酶(TPS)基因导入普通小麦品种CB9945,获得了转TPS基因的小麦植株,对T0代植株进行了PCR检测,对T2代植株进行了叶片涂抹除草剂检测并进一步进行了验证,鉴定出15个转基因株系。采用模拟抗旱、耐盐环境,对15个转基因株系进行了初步功能鉴定,发现转TPS基因小麦植株的抗旱、耐盐能力得到了一定程度的提高。 展开更多
关键词 小麦 抗旱性 耐盐性 海藻糖合酶 转基因
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一株产生脂肽的枯草芽孢杆菌的分离鉴定及脂肽对原油的作用 被引量：22
18
作者 王大威 刘永建 +2 位作者 林忠平 杨振宇 郝春雷 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期304-311,共8页
从大庆油田地层水中分离到一组能高效产生生物表面活性剂的菌株,采用sfp基因PCR鉴定的方法从中分离到一株芽孢杆菌ZW-3,该菌株能够产生大量表面活性物质,采用细菌生理生化鉴定结合16SrDNA序列的系统发育学分析确定该菌株为枯草芽孢杆菌(... 从大庆油田地层水中分离到一组能高效产生生物表面活性剂的菌株,采用sfp基因PCR鉴定的方法从中分离到一株芽孢杆菌ZW-3,该菌株能够产生大量表面活性物质,采用细菌生理生化鉴定结合16SrDNA序列的系统发育学分析确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),通过薄层层析色谱(TLC)、高效液相色谱(HPLC)分析其代谢产物,初步鉴定为脂肽(Lipopeptide);该脂肽生物表面活性剂理化性质显示它能使培养基的表面张力从68.92mN/m降低25.19mN/m、原油/水的界面张力从23.53mN/m降低到4.57mN/m,与1.8%的NaOH溶液复配可以将油水界面张力降低到1.2×10-3mN/m,其临界胶束浓度为33.3mg/L(3.24×10-5mol/L),并具有较好的乳化活性和发泡性能,说明该菌株代谢的脂肽生物表面活性剂在提高石油采收率中具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 多相分类 脂肽 生物表面活性剂 理化性质 原油
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水稻10kD醇溶蛋白基因克隆、序列分析及对植物百脉根的转化 被引量：14
19
作者 王广立 潜忠兴 +2 位作者 刘宝先 麻密 林忠平 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1994年第5期351-357,共7页
应用ＰＣＲ 技术，从水稻基因组中扩增１０ ｋＤ 水稻醇溶蛋白基因的编码区，得到一特异的０．５ ｋｂ 的片段。对该片段进行酶切分析和全序列测定，结果表明： 该片段与Ｍａｓｕｍ ｕｒａ Ｔ．等的报道相比， 其核苷酸序列及推测的氨... 应用ＰＣＲ 技术，从水稻基因组中扩增１０ ｋＤ 水稻醇溶蛋白基因的编码区，得到一特异的０．５ ｋｂ 的片段。对该片段进行酶切分析和全序列测定，结果表明： 该片段与Ｍａｓｕｍ ｕｒａ Ｔ．等的报道相比， 其核苷酸序列及推测的氨基酸序列的同源率分别为９５％ 和９３％ 。就其分子数计算，甲硫氨酸及半胱氨酸含量分别占１８．２％ 和９％ ， 含硫氨基酸总数为２７．２％ ， 比同类的１０ ｋＤ玉米醇溶蛋白的含硫氨基酸总数还要高。将该基因置于ｒｂｃ Ｓ启动子调控下，动员入农杆菌中，转化豆科植物百脉根（ＬｏｔｕｓｃｏｒｎｉｃｕｌａｔｕｓＬ．）， 在含有卡那霉素的抗性培养基上筛选抗性植株。利用ＰＣＲ 方法检测１０ ｋＤ 展开更多
关键词 水稻 醇溶蛋白基因 百脉根 转化
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农杆菌对毛白杨的转化及完整转化植株的获得 被引量：19
20
作者 卜学贤 林忠平 陈维伦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1991年第3期206-213,共8页
本文报道农杆菌转化毛白杨(Populus,tomentosa)的高效遗传转化系统的成立。所用农杆菌菌株为:1.发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)R1000,含有 Ri 质粒 pRiA4b。2.发根农杆菌 R1000(pTVK 85),是菌株 R1000中除含有 pRiA4b 外,并兼容... 本文报道农杆菌转化毛白杨(Populus,tomentosa)的高效遗传转化系统的成立。所用农杆菌菌株为:1.发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)R1000,含有 Ri 质粒 pRiA4b。2.发根农杆菌 R1000(pTVK 85),是菌株 R1000中除含有 pRiA4b 外,并兼容一个带有超致病区(supervirulent region)的质粒 pTVK 85。3.根癌农杆菌(A.tumefaciens)C58C1(pBZ693),其质粒 pBZ 693是改建过的 Ti 质粒,载有 T-DNA 的基因1和基因2。根癌农杆菌诱导的根在形态上明显区别于发根农杆菌诱导的根。R1000(pTVK 85)诱导生根的外植体可占供试外植体总数的59%。转化的根有的可自发地形成不定芽或愈伤组织。通过培养基中激素的调整,可使转化的限系统100%再生出不定芽,并可由这些不定芽得到完整植株。转化植株的各克隆之间表型差异很大。取三个克隆的植株进行 Southern 杂交,其中两个为杂交阳性,表明确已被转化;另一个为杂交阴性。 展开更多
关键词 毛白杨 农杆菌 转化 植株再生
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