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一种提高RAPD技术扩增效率的有效方法 被引量：18
1
作者 傅俊江 李麓芸 +4 位作者 徐湘 王智 唐果 尹长民 卢光琇 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期251-252,共2页
RAPD技术是由Williams等于1990年首先创立的一种DNA分子标记技术。但是由于低的退火温度和短的引物序列等原因 ,常常使得RAPD技术的分辨率和可重复性低。本文介绍一种通过延长从退火到延伸的ramp时间 ,提高RAPD产物的分辨率和产量 ,由... RAPD技术是由Williams等于1990年首先创立的一种DNA分子标记技术。但是由于低的退火温度和短的引物序列等原因 ,常常使得RAPD技术的分辨率和可重复性低。本文介绍一种通过延长从退火到延伸的ramp时间 ,提高RAPD产物的分辨率和产量 ,由此提高RAPD技术的扩增效率的有效方法。 展开更多
关键词 RAPD 蜘蛛 RAMP 效率 指纹
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双向电泳技术原理及其应用 被引量：16
2
作者 刘上峰 傅俊江 李麓芸 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 2002年第2期197-199,共3页
双向电泳技术是蛋白质组研究的核心技术之一 ,本文对其基本原理、分辨率、可重复性、相关数据库、减法分析等作了介绍 。
关键词 双向电泳 蛋白质组 数据库 减法分析
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14个染色体区带特异性探针池的构建 被引量：19
3
作者 夏家辉 杨毅 +2 位作者 戴和平 潘乾 李麓芸 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1994年第4期253-256,共4页
本文运用人类染色体显微切割和ＰＣＲ技术，成功地构建了１４个染色体区带特异性探针池，并通过染色体原位杂交证明它们均分别来源于相应的被切割的染色体区带。
关键词 探针池 染色体区带 显微切割
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46,XY女性性反转患者SRY基因的一个新突变类型 被引量：19
4
作者 周畅 李麓芸 +3 位作者 傅俊江 莫亚勤 钟昌高 卢光琇 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2003年第5期369-372,共4页
目的　研究 46,XY女性性反转患者发病的分子机理。方法　应用聚合酶链反应 (polymerasechain reaction,PCR)扩增 1例性反转患者和其父亲的 SRY基因片段 ;PCR产物连接到 p UCm-T载体上 ,在 ABI 3 77-3自动测序仪上完成测序以查明突变 ;应... 目的　研究 46,XY女性性反转患者发病的分子机理。方法　应用聚合酶链反应 (polymerasechain reaction,PCR)扩增 1例性反转患者和其父亲的 SRY基因片段 ;PCR产物连接到 p UCm-T载体上 ,在 ABI 3 77-3自动测序仪上完成测序以查明突变 ;应用 PCR-限制性酶切对 DNA测序的结果进行检测。结果　发现该患者的 SRY基因存在点突变 (T3 87A) ,导致 SRY蛋白发生氨基酸翻译终止 (酪氨酸 12 9终止密码 ) ,患者父亲的序列正常。由于患者 SRY序列中增加一个 Mae 酶切位点 ,PCR-限制性内切酶酶切电泳检测 ,结果显示患者出现 3条带 (13 1bp、2 3 1bp和 2 47bp) ,而正常人出现 2条带 (13 1bp和 478bp) ,进一步验证了序列分析的结果。经查证数据库 ,该突变是一个未见报道的新型 SRY基因突变。结论　这一新型突变的发现 ,有助于进一步阐明 46。 展开更多
关键词 女性 SRY基因 聚合酶链反应 PCR 无义突变 性反转综合征
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C_2H_2型锌指蛋白的研究进展 被引量：13
5
作者 周畅 李麓芸 《生命科学研究》 CAS CSCD 2004年第3期215-220,共6页
锌指基因家族是人体中最大的基因家族,它参与细胞分化、胚胎发育,并与许多疾病的发生相关.根据半胱氨酸(C)和组氨酸(H)的数目和位置可将锌指蛋白分为C2H2、C2HC、C2C2、C2HCC2C2、C2C2C2C2等亚类.C2H2型锌指是最普遍的类型,它们作为重... 锌指基因家族是人体中最大的基因家族,它参与细胞分化、胚胎发育,并与许多疾病的发生相关.根据半胱氨酸(C)和组氨酸(H)的数目和位置可将锌指蛋白分为C2H2、C2HC、C2C2、C2HCC2C2、C2C2C2C2等亚类.C2H2型锌指是最普遍的类型,它们作为重要的转录调控因子参与许多的生理过程.C2H2型锌指蛋白包含的锌指数目从1个到30多个不等.依据锌指的数量以及在蛋白中的分布情况,大多数C2H2型锌指蛋白属于下列3类之一:1)含3个C2H2锌指的蛋白(tC2H2);2)含多个锌指的C2H2型锌指结构蛋白(maC2H2);3)锌指成对间隔排列的C2H2型锌指蛋白(spC2H2).一些C2H2型锌指蛋白能识别并结合特异性RNA或DNA片段,另一些则只能与RNA结合.通常锌指蛋白含锌指数目越多,它选择结合的能力就越强. 展开更多
关键词 转录因子 C2H2锌指蛋白 DNA结合蛋白结构域
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367例不育男性的染色体分析 被引量：17
6
作者 谭跃球 朱文兵 +1 位作者 李麓芸 卢光琇 《生殖医学杂志》 CAS 2000年第5期272-275,共4页
为了研究染色体因素对男性不育症的影响 ,为辅助生殖技术提供指导 ,我们应用染色体 G显带、C显带技术 ,分析了 3 67例男性不育症患者的染色体。结果发现 79例染色体异常 ,异常率为 2 1 .5 %。染色体异常是男性不育症的重要原因 。
关键词 男性不育症 染色体异常 影响因素
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染色体涂染技术及其在染色体病诊断中的应用 被引量：7
7
作者 傅俊江 李麓芸 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期318-319,共2页
染色体涂染（ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｐａｉｎｔｉｎｇ）技术是用染色体特异性或染色体区带特异性ＤＮＡ文库作为探针池，与中期分裂相染色体（或间期核）进行荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉ... 染色体涂染（ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｐａｉｎｔｉｎｇ）技术是用染色体特异性或染色体区带特异性ＤＮＡ文库作为探针池，与中期分裂相染色体（或间期核）进行荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）和染色体原位抑制（... 展开更多
关键词 染色体病 诊断 染色体涂染
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睾丸生精细胞凋亡相关基因TSARG1与Mtsarg1的分子克隆及Mtsarg1基因的表达谱分析 被引量：9
8
作者 傅俊江 卢光琇 +3 位作者 李麓芸 刘刚 邢晓为 刘上峰 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期25-29,共5页
从已获得的在隐睾和正常睾丸对照中表达量有明显差异的EST片段 (GenBank登录号 :BE64 45 3 8)出发 ,利用生物信息学和实验技术 ,克隆了小鼠睾丸生精细胞凋亡相关新基因Mtsarg1及相应的人类新基因TSARG1,Gen Bank登录号分别为AF3 99971和... 从已获得的在隐睾和正常睾丸对照中表达量有明显差异的EST片段 (GenBank登录号 :BE64 45 3 8)出发 ,利用生物信息学和实验技术 ,克隆了小鼠睾丸生精细胞凋亡相关新基因Mtsarg1及相应的人类新基因TSARG1,Gen Bank登录号分别为AF3 99971和AY0 3 2 92 5。小鼠Mtsarg1与人类TSARG1基因在氨基酸水平有 5 5 %的一致性和 61%相似性 ,与其他已知蛋白质无明显同源性。小鼠 10种组织的RT -PCR分析结果表明 ,Mtsarg1基因在睾丸中高表达 ,在附睾中呈微弱表达 ,在其他组织不表达 。 展开更多
关键词 睾丸生精细胞 凋亡相关基因 TSARG1 Mtsarg1 Mtsarg1基因 分子克隆 表达谱分析
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应用荧光原位杂交产前诊断未培养羊水细胞非整倍体 被引量：13
9
作者 肖红梅 谭跃球 +1 位作者 李麓芸 卢光琇 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期608-610,共3页
目的探讨荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)诊断未培养羊水细胞非整倍体的临床应用价值。方法对55例孕16～32周未培养羊水细胞进行FISH快速产前诊断,应用多色FISH对另4条染色体(X、Y、13号和18号)进行检测。以经母腹... 目的探讨荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)诊断未培养羊水细胞非整倍体的临床应用价值。方法对55例孕16～32周未培养羊水细胞进行FISH快速产前诊断,应用多色FISH对另4条染色体(X、Y、13号和18号)进行检测。以经母腹穿刺取胎血常规核型分析作为FISH检测结果对照。结果被检55例羊水未培养细胞均获得诊断结果,发现两例异常胎儿。1例为标准型21三体;另1例为21三体嵌合体。FISH检测与常规核型分析结果一致。结论FISH检测未培养羊水细胞非整倍体具有快速、简便、所用样本量少的优势,结果准确可靠,可达到产前诊断要求,有较大临床应用价值。 展开更多
关键词 羊水细胞 产前诊断 荧光原位杂交 非整倍体 临床应用价值 21三体 腹穿 核型分析 染色体 培养细胞
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精子发生相关基因的分子遗传学研究进展 被引量：12
10
作者 傅俊江 李麓芸 卢光琇 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期367-371,共5页
特发性无精、严重少精症的分子遗传学研究越来越广泛深入。近年来,控制精子发生的相关基因,主要包括位于Y染色体AZFa区的USP9Y和DBY、AZFb区的RBM基因、AZFc区的DAZ基因,和位于常染色体的DAZLA基因等在分子遗传学研究方面均取得了可喜... 特发性无精、严重少精症的分子遗传学研究越来越广泛深入。近年来,控制精子发生的相关基因,主要包括位于Y染色体AZFa区的USP9Y和DBY、AZFb区的RBM基因、AZFc区的DAZ基因,和位于常染色体的DAZLA基因等在分子遗传学研究方面均取得了可喜的进展。对这方面的研究进展及其展望进行了综述。 展开更多
关键词 男性不育 精子发生 基因 遗传学
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特发性无精症和严重少精症患者Y染色体微缺失的分子检测 被引量：11
11
作者 傅俊江 李麓芸 +6 位作者 钟昌高 李秀蓉 朱文兵 胡亮 谭跃球 范立青 卢光琇 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期29-32,T002,共5页
目的 :研究特发性无精症和严重少精症患者与 Y染色体微缺失的关系 ,建立无精症和严重少精症患者 Y染色体微缺失的分子检测方法。方法 :应用 PCR技术对 1 0 0例无精症和严重少精症患者 (其中无精症 72例 ,严重少精症 2 8例 )进行 Y染色体... 目的 :研究特发性无精症和严重少精症患者与 Y染色体微缺失的关系 ,建立无精症和严重少精症患者 Y染色体微缺失的分子检测方法。方法 :应用 PCR技术对 1 0 0例无精症和严重少精症患者 (其中无精症 72例 ,严重少精症 2 8例 )进行 Y染色体 AZFa、AZFb、AZFc/DAZ、SRY的微缺失检测。结果 :1 2例患者 (1 2 % )有 AZFc的微缺失 (其中无精症 8例 ,占 1 1 .1 % ;严重少精症 4例 ,占 1 4.3% ) ,且其中 1例无精症患者为 AZFb、AZFc双重缺失 ;所有病例未发现有 AZFa的缺失 ;SRY基因 PCR扩增均为阳性。6 0例已有生育的正常男性均无 AZFa、AZFb、AZFc、SRY微缺失。结论 :Y染色体微缺失 ,特别是 AZFc/DAZ的缺失是引起无精和严重少精、造成男性不育的重要原因之一 ,在进行遗传咨询和行卵细胞质内注入精子术 (ICSI)时 ,有必要对不明原因的不育男性患者进行 展开更多
关键词 不育症 男性不育症 特发性无精症 少精症 Y染色体 微缺失
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Turner综合征患者标记染色体的鉴定与分析 被引量：11
12
作者 谭跃球 程德华 +2 位作者 狄玉芬 李麓芸 卢光琇 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期679-682,共4页
目的分析11例携带标记染色体的 Turner 综合征患者的核型,研究这类染色体的表型效应。方法选择11例具 Turner 综合征表型的患者,常规核型分析均显示为携带标记染色体的嵌合体,其中6例标记染色体呈环状。患者 G 带核型表示为 mos.45,X/46... 目的分析11例携带标记染色体的 Turner 综合征患者的核型,研究这类染色体的表型效应。方法选择11例具 Turner 综合征表型的患者,常规核型分析均显示为携带标记染色体的嵌合体,其中6例标记染色体呈环状。患者 G 带核型表示为 mos.45,X/46,X,+mar 或者 mos.45,X/46,X,+r.以 X/Y 着丝粒探针,应用荧光原位杂交(FISH)技术分析这些标记染色体起源,对其中2例较大的环状染色体,结合反向染色体涂染确定断裂位点,比较不同断裂位点的标记染色体的遗传学效应。结果 11例患者所携带的标记染色体均为环状染色体,r(X)的断裂位点分别位于 Xp22、Xq22、Xq24、Xq26等。结论 Turner 综合征患者的标记染色体主要来源于 X 染色体,且表现为 r(X)形式。r(X)均以嵌合型的形式存在。 展开更多
关键词 特纳综合征 原位杂交 荧光 遗传标记 环状染色体
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SSCP突变分析技术新进展 被引量：6
13
作者 邢晓为 傅俊江 李麓芸 《国外医学（遗传学分册）》 2001年第6期296-297,共2页
单链构象多态性是突变分析中的一项重要技术。近年来 ,在分辨率、自动化、高通量等方面有了较大改进 ,是现代分子遗传学研究中用于已知基因突变检测和未知基因突变筛查的一种非常有用的工具。
关键词 单链构象多态性 突变分析 基因突变 分子遗传学
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人类额外小染色体的研究 被引量：11
14
作者 邓汉湘 夏家辉 李麓芸 《遗传与疾病》 CSCD 北大核心 1989年第2期72-73,127+130,共2页
本文运用达达哌(DA/DAPI)显带技术,并结合多种细胞遗传学技术对1例人类额外小染色体(mar)的显带特征及其起源进行了研究,还就其构成与表型效应的关系进行了探讨。结果查明,本例mar携带者的核型为47,XY,+psu dic(15)(pter→cen→q11.2::q... 本文运用达达哌(DA/DAPI)显带技术,并结合多种细胞遗传学技术对1例人类额外小染色体(mar)的显带特征及其起源进行了研究,还就其构成与表型效应的关系进行了探讨。结果查明,本例mar携带者的核型为47,XY,+psu dic(15)(pter→cen→q11.2::q11.2→pter),同时提示语言障碍和生育力低下,可能与15q11.2的重复相关。 展开更多
关键词 染色体 达达哌技术 遗传 咨询
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13q部分三体的分子细胞检测及其与斜颈体征的可能关系 被引量：9
15
作者 杜娟 谭跃球 +1 位作者 李麓芸 卢光琇 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2003年第3期189-192,共4页
目的　探讨斜颈与 13号染色体部分三体的可能关系。方法　应用染色体显带技术结合荧光原位杂交确诊两个具有 13q部份三体典型临床症状病例的核型 ,并比较他们的临床表型与已报道病例的异同。结果　两例患者均为 13q14→qter的部分三体 ... 目的　探讨斜颈与 13号染色体部分三体的可能关系。方法　应用染色体显带技术结合荧光原位杂交确诊两个具有 13q部份三体典型临床症状病例的核型 ,并比较他们的临床表型与已报道病例的异同。结果　两例患者均为 13q14→qter的部分三体 ,尽管另一条衍生染色体不同 ,但他们都有斜颈临床体征。结论　 13q14→ qter可能与斜颈相关 ,结合以前报道过的一篇文献 ,该基因更精确的定位可能为 展开更多
关键词 13q部分三体 分子细胞检测 斜颈 体征 荧光原位杂交
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应用RAPD技术对蜘蛛系统演化的初步研究 被引量：7
16
作者 徐湘 唐果 +4 位作者 王智 尹长民 傅俊江 卢光琇 李麓芸 《生命科学研究》 CAS CSCD 1999年第4期304-307,共4页
利用随机扩增多态ＤＮＡ 技术检测了３ 类不同蜘蛛的系统发生关系．用１２ 个随机引物对各实验蜘蛛的基因组ＤＮＡ 进行扩增，选择其中扩增谱带清晰的８ 个引物进行分析并计算不同类蜘蛛间的遗传距离．结果表明：所有８ 个引物获得的Ｒ... 利用随机扩增多态ＤＮＡ 技术检测了３ 类不同蜘蛛的系统发生关系．用１２ 个随机引物对各实验蜘蛛的基因组ＤＮＡ 进行扩增，选择其中扩增谱带清晰的８ 个引物进行分析并计算不同类蜘蛛间的遗传距离．结果表明：所有８ 个引物获得的ＲＡＰＤ谱带均表现为不同程度的多态性；地穴型蜘蛛与结网型蜘蛛间的遗传距离及结网型与游猎型之间的遗传距离，均比地穴型与游猎型之间的遗传距离近，体现了蜘蛛由地穴→结网→游猎的系统演化进程．这一结论与根据古生物学、胚胎学、形态学及生态学等得出的结论一致，从而进一步从ＤＮＡ 分子水平上为蜘蛛系统演化提供了新的证据． 展开更多
关键词 RAPD 蜘蛛 系统演化 基因组 DNA
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粘多糖贮积症Ⅱ型患者IDS基因的一个新突变 被引量：10
17
作者 张春芽 李麓芸 +2 位作者 刘上峰 傅俊江 卢光琇 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期269-271,共3页
目的　研究粘多糖贮积症 型 ( mucopolysaccharidosis type ,MPS )患者的艾杜糖 - 2 -硫酸酯酶 ( iduronate- 2 - sulfatase,IDS)基因的基因突变。方法　应用聚合酶链反应 -单链构象多态性( polymerase chain reaction- single strand ... 目的　研究粘多糖贮积症 型 ( mucopolysaccharidosis type ,MPS )患者的艾杜糖 - 2 -硫酸酯酶 ( iduronate- 2 - sulfatase,IDS)基因的基因突变。方法　应用聚合酶链反应 -单链构象多态性( polymerase chain reaction- single strand conformation polymorphism,PCR- SSCP)对患者的 IDS基因可能的常见突变第 2、3、5、7～ 9外显子进行检测 ,并对 PCR- SSCP检出的突变进行直接测序 ,测序发现的突变进行 PCR-限制性酶切分析验证。结果　经 PCR- SSCP和 DNA序列分析发现该患者的第 7外显子发生新的点突变 ( G12 5 3T) ;聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 ( PCR- RFL P)电泳检测示患者和母亲出现突变导致的酶切位点 ,进一步验证了序列分析结果。结论　筛查所得的点突变 G12 5 3T可能是该 MPS 展开更多
关键词 粘多糖贮积症Ⅱ型 IDS基因 艾杜糖-2-硫酸酯酶基因 基因突变 PCR-SSCP
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用聚合酶链反应技术对脆性X综合征进行筛查与诊断 被引量：9
18
作者 李辉 李麓芸 +4 位作者 倪斌 吴嵩龄 殷照初 邹永华 陈敏 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期519-521,共3页
目的　建立脆性 X综合征大面积快速筛查与诊断的方法。方法　用 7- deza- d GTP的 PCR法扩增脆性位点智力低下 1基因 (fragile X mental retardation gene1,FMR1)的 (CGG) n 的重复区 ,检测CGG重复数的大小 ,对脆性 X综合征进行筛查 ;... 目的　建立脆性 X综合征大面积快速筛查与诊断的方法。方法　用 7- deza- d GTP的 PCR法扩增脆性位点智力低下 1基因 (fragile X mental retardation gene1,FMR1)的 (CGG) n 的重复区 ,检测CGG重复数的大小 ,对脆性 X综合征进行筛查 ;用甲基化特异性 PCR法直接检测 FMR1基因的 5′端 Cp G岛是否甲基化 ,对脆性 X综合征进行诊断。结果　在一家系 14个成员中 ,我们筛查出 2例脆性 X综合征携带者、5例患者 ;并用甲基化特异性 PCR法对筛查的结果进行了验证。结论　采用 7- deza- d GTP扩增 GC富集区的 PCR法可以对脆性 X综合征男性携带者及患者进行快速鉴定 ;用甲基化特异性 PCR法可以对脆性 X综合征患者进行快速诊断。两种方法也适用于脆性 X综合征的产前筛查与诊断。 展开更多
关键词 诊断 脆性X综合征 脆性位点智力低下1基因 三核苷酸重复 甲基化特异性聚合酶链反应
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甲基化特异性PCR检测Prader-Willi综合征 被引量：8
19
作者 宋明浩 李麓芸 +2 位作者 傅俊江 李秀蓉 卢光琇 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期54-56,共3页
目的　探讨一种高效、快速检测PraderWilli综合征(PraderWillisyndrome,PWS)的方法。方法　采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylationspecificPCR,MSPCR),其作用原理基于DNA经亚硫酸氢钠处理后,来自父方非甲基化序列的胞嘧啶转变为尿嘧... 目的　探讨一种高效、快速检测PraderWilli综合征(PraderWillisyndrome,PWS)的方法。方法　采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylationspecificPCR,MSPCR),其作用原理基于DNA经亚硫酸氢钠处理后,来自父方非甲基化序列的胞嘧啶转变为尿嘧啶,而来自母方甲基化序列则保持不变,随后用具有高度特异性的引物进行扩增。结果　PWS患者的DNA经亚硫酸氢钠处理后,扩增仅能得到来自母方甲基化序列174bp的产物,与用PW71B印迹杂交甲基化分析结果一致,与临床诊断相符,确诊为PWS。结论　MSPCR可检测由目前已知3种机理导致的PWS,是一种有效的首选筛查方法。 展开更多
关键词 P-W综合征 甲基化 聚合酶链反应
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用巢式PCR技术从cDNA文库中快速分离人类新基因5’末端 被引量：7
20
作者 傅俊江 李麓芸 《中国医师杂志》 CAS 1999年第1期24-26,共3页
为了快速获得人类新基因的全长ｃＤＮＡ序列，设计了基因特异性引物和载体特异性引物进行巢式ＰＣＲ扩增，成功地从人脑ｃＤＮＡ文库中快速分离出Ｍ６ｂ１基因５’末端而获得全长ｃＤＮＡ。推测该基因很可能是某种神经系统遗传病的致病... 为了快速获得人类新基因的全长ｃＤＮＡ序列，设计了基因特异性引物和载体特异性引物进行巢式ＰＣＲ扩增，成功地从人脑ｃＤＮＡ文库中快速分离出Ｍ６ｂ１基因５’末端而获得全长ｃＤＮＡ。推测该基因很可能是某种神经系统遗传病的致病基因。因此，巢式ＰＣＲ技术是一种快速灵敏、准确有效的从ｃＤＮＡ文库中分离新基因５’末端乃至全长基因的方法。 展开更多
关键词 巢式PCR 基因 M6bl 全长CDNA
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