垂体腺苷环化酶激活肽对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用 被引量：19

1

作者 刘宪霜 崔旭 +4 位作者 王鲁宁 李文彬 韩志涛 房征宇 尹志奎 《中国临床康复》 CSCD 2003年第1期34-35,37,F003,共4页

目的:观察垂体腺苷环化酶激活肽(pituitaryadenylatecyclase-activatingpolypeptide,PACAP)对缺血再灌注脑神经元凋亡的防治作用。方法:利用四血管结扎法,建立老龄大鼠脑缺血再灌注模型,侧脑室注射PACAP,观察脑组织丙二醛(MDA)含量和超... 目的:观察垂体腺苷环化酶激活肽(pituitaryadenylatecyclase-activatingpolypeptide,PACAP)对缺血再灌注脑神经元凋亡的防治作用。方法:利用四血管结扎法,建立老龄大鼠脑缺血再灌注模型,侧脑室注射PACAP,观察脑组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧物酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,计数海马CA1区存活和凋亡神经元数目,电镜观察神经元的超微结构变化。结果:PACAP治疗后脑组织MDA含量为(1.35±0.39)nmol/mg,SOD和GSH-Px活性分别为(115±20)NU/mg、(10.3±2.0)U/mg,与缺血再灌注组有明显差异(P<0.05),海马CA1区存活和凋亡神经元数目为48.8±4.3,14.3±2.9,能促进神经元存活和减轻凋亡损伤(P<0.01),保护超微结构。结论:PACAP的保护作用可能与其降低脑组织氧自由基水平,提高抗氧化酶活性,防止神经元凋亡有关。 展开更多

关键词 脑缺血 再灌注损伤 垂体腺苷环化酶激活肽

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以病例讨论为中心的PBL教学法在药理学教学中的应用 被引量：16

2

作者 张崇 张慧 +3 位作者 牛秉轩 张来宾 宋宇 尹志奎 《中国高等医学教育》 2015年第6期104-105,共2页

目的:探讨以病例讨论为中心的PBL教学法运用于药理学教学中的效果。方法:对2010级临床本科学生,对照组82人、研究组78人分别采用传统教学法和以病例讨论为中心的PBL教学法进行教学,用考试成绩及问卷调查方式评价教学效果。结果:以病例... 目的:探讨以病例讨论为中心的PBL教学法运用于药理学教学中的效果。方法:对2010级临床本科学生,对照组82人、研究组78人分别采用传统教学法和以病例讨论为中心的PBL教学法进行教学,用考试成绩及问卷调查方式评价教学效果。结果:以病例讨论为中心的PBL教学法激发了学习的兴趣和主动性、培养了临床思维能力、提高了学习成绩。结论:采用病例讨论为中心的PBL教学法有助于提高药理学教学效果。 展开更多

关键词 PBL教学法 药理学 病例讨论

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α-硫辛酸对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用 被引量：13

3

作者 尹志奎 郑斌 +2 位作者 崔旭 黄能慧 李诚秀 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第23期18-19,共2页

关键词 Α-硫辛酸 脑缺血 再灌注损伤 凋亡

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高效液相色谱法测定不同产地白芷中欧前胡素和异欧前胡素含量 被引量：11

4

作者 张慧 海广范 +1 位作者 尹志奎 聂红 《新乡医学院学报》 CAS 2009年第2期138-140,共3页

目的采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定不同产地白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量,为更好的评价不同产地白芷的质量提供依据。方法色谱柱：L ichrospher-C18（250×4.6 mm,5μm）,柱温：30℃,流动相：甲醇-水,梯度洗脱,流速为1.0... 目的采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定不同产地白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量,为更好的评价不同产地白芷的质量提供依据。方法色谱柱：L ichrospher-C18（250×4.6 mm,5μm）,柱温：30℃,流动相：甲醇-水,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1。结果欧前胡素、异欧前胡素进样量分别在0.54-5.40μg、0.244-2.44μg范围内,呈现良好的线性关系。欧前胡素平均回收率99.020%,相对标准偏差（RSD）3.318%;异欧前胡素平均回收率97.528%,RSD 2.904%。欧前胡素平均含量为1.465 mg·g^-1;异欧前胡素平均含量为0.575 mg·g^-1。结论该测定方法简单,快速,重现性好,可作为该药材质量的控制方法。 展开更多

关键词 白芷 高效液相色谱法 欧前胡素 异欧前胡素

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弓形虫MIC6羧基端相互作用蛋白的筛选 被引量：9

5

作者 郑斌 尹志奎 +1 位作者 何蔼 詹希美 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期970-974,共5页

目的筛选与弓形虫微线体蛋白6羧基端(MIC6C)相互作用的蛋白。方法以GST-MIC6C蛋白作为探针蛋白,利用GST pull-down技术,从弓形虫裂解液中筛选与其相互作用的蛋白,SDS-PAGE分析实验产物;将目标蛋白条带转印至PVDF膜,测蛋白序列,BLAST2在... 目的筛选与弓形虫微线体蛋白6羧基端(MIC6C)相互作用的蛋白。方法以GST-MIC6C蛋白作为探针蛋白,利用GST pull-down技术,从弓形虫裂解液中筛选与其相互作用的蛋白,SDS-PAGE分析实验产物;将目标蛋白条带转印至PVDF膜,测蛋白序列,BLAST2在线对比搜索相似蛋白序列,初步确定目标蛋白。制备目标蛋白的抗体,Western blot分析GST pull-down实验产物。结果 GST pull-down实验筛选到的目标蛋白的序列与弓形虫醛缩酶的序列一致;制备了醛缩酶的多克隆抗体,目标蛋白条带能被该抗体特异地识别。结论采用GST pull-down技术,初步筛选出与弓形虫MIC6C相互作用的蛋白为醛缩酶。 展开更多

关键词 刚地弓形虫 微线体蛋白6羧基端 GSTpull-down 醛缩酶

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刚地弓形虫醛缩酶蛋白的表达及其多克隆抗体的纯化 被引量：8

6

作者 尹志奎 邓智建 郑斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1114-1116,共3页

目的:体外制备弓形虫醛缩酶(aldolase)蛋白及其多克隆抗体。方法:以弓形虫cDNA链为模板,PCR扩增醛缩酶基因,构建aldolase/pET30a原核表达系统;IPTG诱导表达aldolase-His6蛋白;用纯化的蛋白加免疫佐剂免疫SD大鼠,收集抗血清,制备多克隆抗... 目的:体外制备弓形虫醛缩酶(aldolase)蛋白及其多克隆抗体。方法:以弓形虫cDNA链为模板,PCR扩增醛缩酶基因,构建aldolase/pET30a原核表达系统;IPTG诱导表达aldolase-His6蛋白;用纯化的蛋白加免疫佐剂免疫SD大鼠,收集抗血清,制备多克隆抗体,亲和层析纯化并分析抗体的效价。结果:构建了aldolase原核表达系统,表达并纯化了aldolase-His6蛋白;获得了抗该蛋白的大鼠源性抗血清,纯化后的多克隆抗体效价为1∶4000。结论:在体外制备并纯化了aldolase-His6蛋白及其多克隆抗体,为后续研究aldolase的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 刚地弓形虫 醛缩酶 蛋白表达 多克隆抗体

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雌激素对脑缺血大鼠的神经保护作用 被引量：8

7

作者 崔泰震 海广范 +2 位作者 朱志远 尹志奎 刘巨源 《新乡医学院学报》 CAS 2004年第4期246-248,共3页

目的　研究雌激素对脑缺血大鼠的神经保护作用与SOD及Bcl 2蛋白表达的关系。方法　 30只雌性SD大鼠随机分成 3组 ,每组 10只。Ⅰ组 (假手术组 )仅打开腹腔而不切除双侧卵巢 ,每日腹腔注射生理盐水 ,连续 2周 ;Ⅱ组 (双侧卵巢切除组 )实... 目的　研究雌激素对脑缺血大鼠的神经保护作用与SOD及Bcl 2蛋白表达的关系。方法　 30只雌性SD大鼠随机分成 3组 ,每组 10只。Ⅰ组 (假手术组 )仅打开腹腔而不切除双侧卵巢 ,每日腹腔注射生理盐水 ,连续 2周 ;Ⅱ组 (双侧卵巢切除组 )实验前 2周手术切除双侧卵巢 ,每日腹腔注射生理盐水 ,连续 2周 ;Ⅲ组 (17β E2 治疗组 )卵巢切除后给予 17β 雌二醇 (17β E2 ) 0 .1mg·kg-1,连续 2周。 30只大鼠均采用大鼠大脑中动脉阻断制成局灶性脑缺血模型。在缺血 2h、再灌注 4 8h后立即断头取脑 ,比较 3组大鼠的脑组织凋亡细胞数、SOD含量及Bcl 2蛋白的表达。结果　Ⅱ组与Ⅰ组、Ⅲ组比较 ,动物脑组织凋亡细胞数明显增多 (P <0 .0 5 ) ,SOD含量及Bcl 2蛋白的表达明显减少 (P <0 .0 5 ) ;Ⅰ组与Ⅲ组相比较上述检测指标无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　雌激素上调大鼠脑缺血时脑组织中SOD的含量和Bcl 2蛋白的表达与其神经保护作用有关。 展开更多

关键词 雌激素 脑缺血-再灌注 神经保护作用 超氧化物歧化酶 B细胞淋巴瘤2基因

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三聚氯氰促进的咪唑并[1,2-a]吡啶类化合物的合成 被引量：8

8

作者 尹志奎 田拴宝 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第2期387-391,共5页

以三聚氯氰作为反应促进剂,在室温和CH3CN作为溶剂的条件下,利用取代2-氨基吡啶、醛和烷基异腈三组分缩合,高收率地实现了一系列咪唑并[1,2-a]吡啶类化合物的合成.产物结构经1H NMR,13C NMR和元素分析等进行了表征.

关键词 咪唑并[1 2-a]啶类化合物 三聚氯氰 Groebcke反应 多组分反应 合成

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α-硫辛酸对果蝇寿命的影响 被引量：3

9

作者 尹志奎 崔泰震 +2 位作者 崔旭 李文彬 郑风劲 《齐齐哈尔医学院学报》 2004年第6期606-607,共2页

目的　建立果蝇的半乳糖衰老模型 ,观察α -硫辛酸对果蝇寿命影响。方法　将未交配的果蝇按性别随机分为四组 :对照组、半乳糖组、α -硫辛酸低剂量组、α -硫辛酸高剂量组 ,观测果蝇平均寿命 (AverageLifeSpan ,ALS)、果蝇最高寿命 (Ma... 目的　建立果蝇的半乳糖衰老模型 ,观察α -硫辛酸对果蝇寿命影响。方法　将未交配的果蝇按性别随机分为四组 :对照组、半乳糖组、α -硫辛酸低剂量组、α -硫辛酸高剂量组 ,观测果蝇平均寿命 (AverageLifeSpan ,ALS)、果蝇最高寿命 (MaximumLifeSpan ,MLS)和果蝇半数死亡时间(LD50 )。结果　D -半乳糖组果蝇的生存曲线比对照组左移 ,具有显著性意义 (P <0 .0 1) ,LD50 缩小 ;α-硫辛酸低剂量组、高剂量组生存曲线比对照组右移 ,具有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论　D -半乳糖可以诱导果蝇的衰老 ,α-硫辛酸能预防D 展开更多

关键词 Α-硫辛酸 果蝇 真核多细胞生物 分子生物学

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GST沉降技术验证弓形虫醛缩酶与肌动蛋白的相互作用 被引量：6

10

作者 郑斌 尹志奎 +2 位作者 何蔼 李卓雅 詹希美 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期363-367,共5页

目的通过GST沉降技术(GST pull-down)验证刚地弓形虫醛缩酶(aldolase)与肌动蛋白(actin)的相互作用。方法 PCR扩增弓形虫cDNA中aldolase和actin基因,分别亚克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1和pET30a,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),1 mmol/L异丙... 目的通过GST沉降技术(GST pull-down)验证刚地弓形虫醛缩酶(aldolase)与肌动蛋白(actin)的相互作用。方法 PCR扩增弓形虫cDNA中aldolase和actin基因,分别亚克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1和pET30a,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,亲和层析法纯化表达产物。采用腹部皮内多点注射免疫SD大鼠15只,首次免疫Actin-His6蛋白量为200μg/只,第2次起免疫蛋白量为100μg/只,共免疫4次,每次间隔7 d,末次免疫后5 d收集心脏血,制备Actin-His6抗血清。以纯化的GST-Aldolase蛋白作为探针蛋白与Actin-His6蛋白液进行GST沉降实验,实验产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析。结果获得了弓形虫aldolase和actin基因序列,构建了相应的原核表达载体。表达并纯化了GST-Aldolase和Actin-His6蛋白。Actin-His6蛋白免疫SD大鼠后获得其抗血清,经抗体亲和纯化柱纯化,获得Actin-His6多克隆抗体。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,GST沉降实验产物中的蛋白条带可被Aldolase-His6多克隆抗体和Actin-His6多克隆抗体识别。结论弓形虫醛缩酶与肌动蛋白存在相互作用。 展开更多

关键词 刚地弓形虫 醛缩酶 肌动蛋白 GST沉降技术 蛋白相互作用

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国外羊弓形虫感染情况及影响因素研究进展 被引量：5

11

作者 郑斌 尹志奎 +1 位作者 韩丁丁 亢彩彩 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第6期571-573,共3页

弓形虫可以感染多种动物和人导致人兽共患弓形虫病。山羊和绵羊感染后不仅影响其发育、繁衍,对畜牧业发展造成一定的经济损失。若以感染动物来源的奶和肉制品为食物,还可能威胁到人类的健康。本文对国外的山羊、绵羊弓形虫感染情况及影... 弓形虫可以感染多种动物和人导致人兽共患弓形虫病。山羊和绵羊感染后不仅影响其发育、繁衍,对畜牧业发展造成一定的经济损失。若以感染动物来源的奶和肉制品为食物,还可能威胁到人类的健康。本文对国外的山羊、绵羊弓形虫感染情况及影响因素的研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 山羊 绵羊 弓形虫 血清阳性率 影响因素 综述

原文传递

水的酸碱度对Bradford法检测蛋白质含量的影响 被引量：5

12

作者 海广范 张慧 +1 位作者 牛秉轩 尹志奎 《新乡医学院学报》 CAS 2009年第2期144-146,共3页

目的探讨水酸碱度的变化对Bradford法检测蛋白质含量的影响。方法用pH分别为4.0(pH=4.0组)、7.0(pH=7.0组)和10.0(pH=10.0组)的双蒸水配置Bradford法所需要的试剂,绘制标准曲线,检测标准蛋白浓度,比较水的酸碱度的变化对标准曲线的影响... 目的探讨水酸碱度的变化对Bradford法检测蛋白质含量的影响。方法用pH分别为4.0(pH=4.0组)、7.0(pH=7.0组)和10.0(pH=10.0组)的双蒸水配置Bradford法所需要的试剂,绘制标准曲线,检测标准蛋白浓度,比较水的酸碱度的变化对标准曲线的影响。结果pH=4.0组和pH=7.0组的标准曲线拟合度较pH=10.0组标准曲线拟合度明显增高;pH=4.0组和pH=7.0组检测的蛋白质含量与已知蛋白浓度相比差别无统计学意义(P>0.05);pH=10.0组检测蛋白质的含量与已知蛋白浓度、pH=7.0组和pH=4.0组相比差别均有统计学意义(P<0.05),pH=7.0组和pH=4.0组检测蛋白质含量的准确性高于pH=10.0组。结论双蒸水酸碱度的变化可以影响Bradford法检测蛋白质含量的精确度。 展开更多

关键词 酸碱度 Bradford法 蛋白质含量

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脑组织切片免疫组化技术中漂片法与贴片法效果比较 被引量：5

13

作者 詹合琴 李生营 +1 位作者 尹志奎 吴蓝鸥 《新乡医学院学报》 CAS 2006年第1期9-11,共3页

目的探讨脑组织切片免疫组化技术中漂片法与贴片法的效果。方法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,脑组织冰冻切片,采用兔抗BDNF(1∶500)抗体,同时运用漂片法和贴片法进行免疫组化ABC法染色。结果漂片法阳性神经元数目和灰度值与贴片法比较有... 目的探讨脑组织切片免疫组化技术中漂片法与贴片法的效果。方法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,脑组织冰冻切片,采用兔抗BDNF(1∶500)抗体,同时运用漂片法和贴片法进行免疫组化ABC法染色。结果漂片法阳性神经元数目和灰度值与贴片法比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论脑组织切片免疫组化技术采用漂片法效果更为可靠。 展开更多

关键词 脑组织切片 免疫组化技术 漂片法 贴片法

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帕利哌酮缓释片联合米氮平治疗精神分裂症阴性症状患者及其社会功能的研究 被引量：5

14

作者 王东平 尹志奎 +1 位作者 詹合琴 卫世强 《新乡医学院学报》 CAS 2013年第12期958-961,共4页

目的探讨帕利哌酮缓释片联合米氮平治疗精神分裂症阴性症状患者临床疗效、社会功能改善程度及不良反应。方法将150例阴性症状为主的精神分裂症患者分为3组,帕利哌酮缓释片组50例,帕利哌酮缓释片+米氮平组50例,帕利哌酮缓释片+安慰剂组5... 目的探讨帕利哌酮缓释片联合米氮平治疗精神分裂症阴性症状患者临床疗效、社会功能改善程度及不良反应。方法将150例阴性症状为主的精神分裂症患者分为3组,帕利哌酮缓释片组50例,帕利哌酮缓释片+米氮平组50例,帕利哌酮缓释片+安慰剂组50例。帕利哌酮缓释片组患者给予帕利哌酮缓释片治疗,起始剂量均为6 mg·d-1,根据病情,1周后调整为6～12 mg·d-1。在帕利哌酮缓释片组患者治疗的基础上,帕利哌酮缓释片+米氮平组联用米氮平15～45 mg·d-1治疗,帕利哌酮缓释片+安慰剂组给予安慰剂15～45 mg·d-1治疗,疗程12周。分别采用阳性和阴性症状量表(PANSS)、社会功能缺陷量表(SDSS)和不良反应症状量表(TESS)评定疗效、社会功能及安全性。结果治疗后3组患者PANSS总分均较治疗前显著降低(P<0 05)。治疗后第12周末,帕利哌酮缓释片+米氮平组患者的SDSS总分及PANSS阴性因子分均显著低于帕利哌酮缓释片组和帕利哌酮缓释片+安慰剂组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。3组不良反应均为轻度。结论帕利哌酮缓释片联合米氮平治疗精神分裂症阴性症状患者具有疗效好、患者社会功能恢复好及不良反应少的特点。 展开更多

关键词 帕利哌酮缓释片 米氮平 精神分裂症 阴性症状 社会功能

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α-硫辛酸对果蝇生化指标的影响 被引量：3

15

作者 郑风劲 尹志奎 +1 位作者 刘瑞丽 崔旭 《新乡医学院学报》 CAS 2004年第2期100-101,共2页

目的　建立果蝇的半乳糖衰老模型 ,观察α 硫辛酸对果蝇生化指标的影响。方法　将未交配的果蝇按性别随机分为 4组 :对照组、半乳糖组、α 硫辛酸低剂量组、α 硫辛酸高剂量组。收集 40日龄果蝇 ,分别用化学发光法检测超氧化物歧化酶 (S... 目的　建立果蝇的半乳糖衰老模型 ,观察α 硫辛酸对果蝇生化指标的影响。方法　将未交配的果蝇按性别随机分为 4组 :对照组、半乳糖组、α 硫辛酸低剂量组、α 硫辛酸高剂量组。收集 40日龄果蝇 ,分别用化学发光法检测超氧化物歧化酶 (SOD)水平 ,用比色法检测丙二醛(MDA)和过氧化物酶 (GSH Px)水平。结果　α 硫辛酸低剂量组、高剂量组GSH Px及SOD含量比半乳糖组增加 (P <0 .0 5) ,MDA含量减小 (P <0 .0 5)。结论　α 硫辛酸能对抗D 展开更多

关键词 Α-硫辛酸 果蝇 生化指标

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Lactuside B对缺血性脑损伤的影响 被引量：5

16

作者 詹合琴 尹志奎 +1 位作者 杨锦南 闫福林 《陕西医学杂志》 CAS 2009年第5期515-517,共3页

目的:初步探讨Lactuside B的抗脑缺血作用。方法:采用小鼠断头法,测定小鼠喘气时间;采用大鼠不完全性脑缺血模型,测定大鼠脑组织的含水量、MDA、SOD和NO值。结果:Lactuside B各剂量组均能明显延长小鼠断头张口喘气时间;Lactuside B各剂... 目的:初步探讨Lactuside B的抗脑缺血作用。方法:采用小鼠断头法,测定小鼠喘气时间;采用大鼠不完全性脑缺血模型,测定大鼠脑组织的含水量、MDA、SOD和NO值。结果:Lactuside B各剂量组均能明显延长小鼠断头张口喘气时间;Lactuside B各剂量组能显著降低脑缺血后脑组织的含水量,其中高剂量组强于阳性药物对照组;Lactuside B各剂量组能显著降低脑缺血后脑组织MDA的含量,升高SOD和NO的含量。该药高剂量组对NO的升高作用优于尼莫地平。结论:Lactuside B具有较好的抗脑缺血作用。 展开更多

关键词 脑缺血/并发症 脑损伤/病因学 脑损伤/病理生理学 丙二醛/代谢 一氧化氮/代谢 模型 动物 大鼠

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弓形虫GRA7基因在大肠埃希菌中的表达 被引量：5

17

作者 尹志奎 杨锦楠 +1 位作者 许兵红 刘世国 《新乡医学院学报》 CAS 2005年第2期99-101,共3页

目的　在大肠埃希菌中表达致密颗粒蛋白(GRA7)。方法　将弓形虫GRA7基因克隆入原核表达载体p GEX- 4 T- 1,构建重组质粒p GEX- 4 T- 1/GRA7并转化大肠埃希菌BL2 1。IPTG体外诱导重组质粒菌的表达,对表达的GRA7融合蛋白进行SDS- PAGE和We... 目的　在大肠埃希菌中表达致密颗粒蛋白(GRA7)。方法　将弓形虫GRA7基因克隆入原核表达载体p GEX- 4 T- 1,构建重组质粒p GEX- 4 T- 1/GRA7并转化大肠埃希菌BL2 1。IPTG体外诱导重组质粒菌的表达,对表达的GRA7融合蛋白进行SDS- PAGE和Western- blotting分析。结果　成功构建了p GEX- 4 T- 1/GRA7重组质粒,该重组质粒在大肠埃希菌中表达了目的蛋白,该蛋白能与抗GST抗体结合。结论　GRA7基因在大肠埃希菌中以GST融合蛋白的形式得到表达。 展开更多

关键词 弓形虫 致密颗粒蛋白7 蛋白质表达

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重组刚地弓形虫MIC8 CTD蛋白及其多克隆抗体的制备 被引量：5

18

作者 郑斌 尹志奎 +1 位作者 何蔼 詹希美 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第8期581-584,共4页

目的制备弓形虫微线体蛋白8羧基端胞质尾(MIC8 CTD)重组蛋白及其多克隆抗体。方法以弓形虫基因组为模板,PCR扩增MIC8 CTD基因片段,构建MIC8 CTD/pGEX-4T-1原核表达系统;IPTG诱导表达GST-MIC8CTD融合蛋白;用纯化的融合蛋白加免疫佐剂免... 目的制备弓形虫微线体蛋白8羧基端胞质尾(MIC8 CTD)重组蛋白及其多克隆抗体。方法以弓形虫基因组为模板,PCR扩增MIC8 CTD基因片段,构建MIC8 CTD/pGEX-4T-1原核表达系统;IPTG诱导表达GST-MIC8CTD融合蛋白;用纯化的融合蛋白加免疫佐剂免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,亲和层析纯化并分析抗体的特异性及效价。结果构建了MIC8 CTD原核表达系统,表达并纯化了GST-MIC8 CTD融合蛋白;获得了抗该蛋白的兔源性抗血清,纯化后的多克隆抗体能特异识别MIC8 CTD,ELISA测定抗体效价为1∶8 000。结论制备的GST-MIC8 CTD融合蛋白具有免疫原性,用该抗原免疫动物可获得高效价的多克隆抗体。 展开更多

关键词 刚地弓形虫 微线体蛋白8 羧基末端胞质尾 多克隆抗体

原文传递

三七皂苷Rg1对脑缺血后大脑皮质和海马BDNF蛋白的影响 被引量：4

19

作者 詹合琴 尹志奎 +1 位作者 翟成凯 吴蓝鸥 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第5期9-10,共2页

目的探讨三七皂苷Rg1对脑缺血后皮质和海马脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白的影响。方法取60只成年雄性SD大鼠建立大脑中动脉缺血模型，2h后进行缺血再灌注并随机分为1、2、3、4、5组各12只，分别给予生理盐水5mg／kg、尼莫地平15mg／k... 目的探讨三七皂苷Rg1对脑缺血后皮质和海马脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白的影响。方法取60只成年雄性SD大鼠建立大脑中动脉缺血模型，2h后进行缺血再灌注并随机分为1、2、3、4、5组各12只，分别给予生理盐水5mg／kg、尼莫地平15mg／kg及三七皂苷Rg150、100、200mg／kg腹腔注射，于第1、3天用4％多聚甲醛饱和苦味酸进行心脏灌注并处死动物，制作脑组织冰冻切片，采用兔抗BDNF（1：500）抗体进行免疫组化ABC法染色，观察各组不同时间大脑皮质和海马BDNF蛋白灰度值及阳性神经元数量。结果大鼠大脑皮质和海马均可见BDNF蛋白阳性表达；3～5组BDNF蛋白的灰度值低于1、2组（P〈0．05、〈0．01），阳性神经元数量显著高于1、2组（P〈0．05、〈0．01）；3、4组大脑皮质BDNF灰度值和阳性神经元数目均低于海马（P〈0．05、〈0．01）。结论三七皂苷Rg1能增加大脑皮质和海马BDNF阳性神经元的数量和蛋白含量，两部位的观察指标有显著性差异。其机制可能是BDNF不仅存在于阳性神经元中，亦可能是不同部位脑组织对药物和脑缺血的反应性不同。 展开更多

关键词 三七皂苷RG1 脑缺血 大脑皮质 海马

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河南新乡地区猪弓形虫感染与风险因素分析 被引量：4

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作者 郑斌 尹志奎 +4 位作者 李金娜 姚志军 王帅 任红斌 张海珠 《动物医学进展》 北大核心 2017年第6期117-119,共3页

为了解河南新乡地区猪弓形虫感染的情况及风险因素,用间接血凝法对2011年-2013年采集的猪血样进行检测。采用SPSS13.0统计分析资料,χ~2检验比较年度间及各风险因素的差异。结果显示,新乡地区2011年-2013年猪弓形虫血清阳性率分别为20.9... 为了解河南新乡地区猪弓形虫感染的情况及风险因素,用间接血凝法对2011年-2013年采集的猪血样进行检测。采用SPSS13.0统计分析资料,χ~2检验比较年度间及各风险因素的差异。结果显示,新乡地区2011年-2013年猪弓形虫血清阳性率分别为20.9%、34.4%和23.9%,年度间弓形虫血清阳性率差异不显著(P>0.05);弓形虫感染的风险因素中,猫出现次数的高低之间、是否接触啮齿类(鼠类)之间、有否与狗接触之间和有无流产史之间差异显著(P<0.05)。调查结果表明,河南新乡地区的猪弓形虫感染普遍存在,猫出现的次数、接触啮齿类(鼠类)、接触狗和有流产史等因素对猪感染弓形虫有影响。 展开更多

关键词 刚地弓形虫 猪 血清学调查 风险因素

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