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应用间接免疫荧光试验检测猪圆环病毒抗体 被引量:55
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作者 芦银 +2 位作者 陈德胜 陈溥言 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2002年第8期19-20,共2页
用猪肾传代细胞系PK 15增殖猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )毒株制备抗原 ,建立了检测PCV抗体的间接免疫荧光试验 (IFA)。应用该方法对 64份临床送检血清样品进行了检测。结果 ,3 8份血清呈现PCV抗体阳性 (5 9% )。IFA方法的建立为临床上进行PC... 用猪肾传代细胞系PK 15增殖猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )毒株制备抗原 ,建立了检测PCV抗体的间接免疫荧光试验 (IFA)。应用该方法对 64份临床送检血清样品进行了检测。结果 ,3 8份血清呈现PCV抗体阳性 (5 9% )。IFA方法的建立为临床上进行PCV流行病学调查及相关疾病的诊断提供了另一种检测手段。 展开更多
关键词 应用 间接免疫 荧光试验 圆环病毒 抗体
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动物附红细胞体形态结构的研究 被引量:50
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作者 陈士友 李宏全 《上海农学院学报》 1998年第3期184-188,共5页
应用光镜和电镜对几种附红细胞体显微和超微结构观察显示:附红细胞体属典型原核生物,多数为环形、球形、卵圆形、杆状等多形态生物体,直径为0.2~2.6μm,大小不等,常在红细胞表面或血浆中单个或成团寄生。该病原无细胞壁、由单层界膜包... 应用光镜和电镜对几种附红细胞体显微和超微结构观察显示:附红细胞体属典型原核生物,多数为环形、球形、卵圆形、杆状等多形态生物体,直径为0.2~2.6μm,大小不等,常在红细胞表面或血浆中单个或成团寄生。该病原无细胞壁、由单层界膜包裹着,无明显细胞器和细胞核。部分附红细胞体尚见有一至数根细长的细丝结构。附红细胞体通过这些细丝连接到红细胞膜上,使红细胞膜产生小而深的凹陷,导致红细胞结构和功能改变。 展开更多
关键词 附红细胞体 超微结构 细丝 形态结构 动物
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猪圆环病毒2型及猪繁殖与呼吸综合症病毒的快速检测 被引量:53
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作者 芦银 许立 +4 位作者 黄伟坚 陈德胜 陈溥言 《中国病毒学》 CAS CSCD 2003年第2期184-186,共3页
According to the published genome sequences of Porcine circovirus type 2 (PCV2) and Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), primers were designed and PCR, RT-PCR were set up for the detection of P... According to the published genome sequences of Porcine circovirus type 2 (PCV2) and Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), primers were designed and PCR, RT-PCR were set up for the detection of PCV2 and PRRSV, respectively. With the established methods, 38 clinical samples from the respiratory disease pigs were detected for the presence of PCV2 and PRRSV. The results demonstrated that 22 samples were positive for PCV2, 27 samples were positive for PRRSV and among the above positive samples, 18 samples were positive for both viruses. The data obtained in the present study indicated that PCV2 and PRRSV maybe play an important role in the course of the development of respiratory diseases. 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪繁殖呼吸综合症病毒 共感染 检测 呼吸道疾病 PCR RT-PCR
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附红细胞体及附红细胞体病的研究现状和展望 被引量:49
4
作者 《上海农学院学报》 1992年第2期171-178,共8页
根据笔者在上海首次在奶牛、仔猪和犬中发现附红细胞体病的病原体及参考其他文献,本文综述了该病的病原体、流行病学、临床症状、病理、诊断和防治等生物学特征。对该病的研究现状和发展趋势也作了一一论述。
关键词 附红细胞体 病原体 流行病学 症状 诊断 防治 附红细胞体病
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上海地区奶牛乳房炎主要病原菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:48
5
作者 易明梅 黄奕倩 +4 位作者 朱建 孙怀昌 袁耀明 王赞江 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期360-363,共4页
为了获得上海地区奶牛乳房炎病原菌及其药物敏感性的系统资料并为指导临床合理用药和提高奶牛乳房炎防治效果提供理论依据,本研究对在上海郊区4个奶牛场采集的临床型和隐性乳房炎患牛的126份奶样进行细菌培养、分离鉴定和药敏试验。共... 为了获得上海地区奶牛乳房炎病原菌及其药物敏感性的系统资料并为指导临床合理用药和提高奶牛乳房炎防治效果提供理论依据,本研究对在上海郊区4个奶牛场采集的临床型和隐性乳房炎患牛的126份奶样进行细菌培养、分离鉴定和药敏试验。共分离到萄葡球菌,无乳链球菌,大肠杆菌3种主要病原菌107株,其中金黄色葡萄球菌74株,占分离菌株的69.16%;无乳链球菌27株,占分离菌株的25.23%;病原菌单独感染率为48.78%,其中金黄色葡萄球菌的单独感染率达39.02%;病原菌混合感染率占51.22%,多为金黄色葡萄球菌和无乳链球菌混合感染。主要病原菌对头孢拉定、环丙沙星、庆大霉素敏感,对大多数抗菌素产生了不同程度的耐药性,对氨苄青霉素产生了完全耐药性。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 主要病原菌 分离鉴定 药敏试验
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附红细胞体病患畜病理组织学及血液学变化的研究 被引量:29
6
作者 李宏全 《上海农学院学报》 1998年第2期116-120,共5页
对急性附红细胞体病患畜(猪、犬)病理组织学、血液学和部分生理生化指标变化的研究显示:患畜均有体温升高、呼吸和心跳加快、谷-丙转氨酶和血清胆红素增高、血糖降低、红细胞压积、红细胞总数、淋巴细胞下降、白细胞总被上升等血液学... 对急性附红细胞体病患畜(猪、犬)病理组织学、血液学和部分生理生化指标变化的研究显示:患畜均有体温升高、呼吸和心跳加快、谷-丙转氨酶和血清胆红素增高、血糖降低、红细胞压积、红细胞总数、淋巴细胞下降、白细胞总被上升等血液学和生理生化指标变化;病理剖检可见血液稀薄,血凝延迟、胃肠粘膜出血,其他部位粘膜、浆膜和脂肪黄染,肝脾肿大;心、肝、脾、肾等大部分实质器官有含铁血黄素沉着和广泛的器官损害等组织学变化。结果表明:贫血、肝功能下降、血糖降低和广泛的器官损害是急性附红细胞体病主要的特征。 展开更多
关键词 附红细胞体病 病理组织学 血液学 肝功能 血糖
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断奶仔猪多系统消耗综合征 被引量:30
7
作者 陈溥言 芦银 《畜牧与兽医》 北大核心 2002年第7期33-35,共3页
断奶仔猪多系统消耗综合征是由猪圆环病毒Ⅱ型感染所引起的一种新传染病。近几年来 ,该病呈不断蔓延趋势 ,已给世界养猪业带来了巨大的经济损失。本文就该病的病原、流行病学、临床症状、病理变化、致病机理、危害及防治等方面作简单介... 断奶仔猪多系统消耗综合征是由猪圆环病毒Ⅱ型感染所引起的一种新传染病。近几年来 ,该病呈不断蔓延趋势 ,已给世界养猪业带来了巨大的经济损失。本文就该病的病原、流行病学、临床症状、病理变化、致病机理、危害及防治等方面作简单介绍 。 展开更多
关键词 断奶仔猪多系统消耗综合征 猪圆环病毒Ⅱ型 致病机理 防治 病厚 流行病学 症状 病理变化 危害
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猪圆环病毒2型分离毒株全基因组的克隆及序列分析 被引量:15
8
作者 芦银 +4 位作者 陈德胜 黄伟坚 戴亚斌 陈溥言 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期42-46,共5页
根据GenBank中猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )基因序列 ,设计两对特异性引物 ,用PCR方法从接种疑似PMWS仔猪病料的细胞中分段扩增 2个分离毒株全基因组。将扩增片段克隆入 pGEM Teasy载体 ,筛选获得含有相应片段的阳性重组质粒。对质粒中的插... 根据GenBank中猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )基因序列 ,设计两对特异性引物 ,用PCR方法从接种疑似PMWS仔猪病料的细胞中分段扩增 2个分离毒株全基因组。将扩增片段克隆入 pGEM Teasy载体 ,筛选获得含有相应片段的阳性重组质粒。对质粒中的插入片段进行测序拼接 ,获得 2株均为 176 8bp的全基因组序列。应用DNAstar序列分析软件 ,对所测PCV 2序列与GenBank中的国内外PCV毒株进行同源性比较 ,并绘制系统发生树 ,结果发现 :所测两毒株之间的核苷酸序列同源性极高 ,可达 99 8% ,亲缘关系密切 ;与PCV 2参考毒株的同源性介于95 3%~ 99 7%之间 ,其中与美国的一株PCV 2同源性最高 ,分别为 99 5 %和 99 7% ,亲缘关系很近 ;与国内两分离株同源性分别为 96 4%和 98 8%~ 98 9% ;与PCV 1参考毒株同源性仅为 77 1%~ 77 5 %。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 PCR 序列分析
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牛肉中大肠杆菌O_(157)的调查 被引量:31
9
作者 严亚贤 施惠源 《畜牧与兽医》 北大核心 2003年第2期14-15,共2页
应用分离培养、形态特征观察、API2 0E生化特性鉴定、玻片凝集试验、快速检测试剂盒等方法对上海某地区 5家超市及 3个菜市场的生牛肉进行大肠杆菌O1 57的分离与鉴定 ,并测定分离株对小鼠的毒力。结果从 1 0 0份样本中检测出 3株大肠杆... 应用分离培养、形态特征观察、API2 0E生化特性鉴定、玻片凝集试验、快速检测试剂盒等方法对上海某地区 5家超市及 3个菜市场的生牛肉进行大肠杆菌O1 57的分离与鉴定 ,并测定分离株对小鼠的毒力。结果从 1 0 0份样本中检测出 3株大肠杆菌O1 57,且对小鼠均有致病性 ,表明超市、菜市场生牛肉中存在大肠杆菌O1 展开更多
关键词 牛肉 大肠杆菌O157 分离 鉴定 动物试验 食品卫生检验 致病性
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犬瘟热病毒当前研究进展 被引量:24
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作者 许莎琼 朱建 +2 位作者 傅志强 吴祖立 《上海畜牧兽医通讯》 2006年第1期5-7,共3页
关键词 犬瘟热病毒 动物养殖业 野生动物保护 分子流行病学 Virus 公共卫生学 实验动物 传染病 CDv 养犬业
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人工复制附红细胞体病的研究 被引量:23
11
作者 《上海农学院学报》 1998年第2期132-140,共9页
21只体重(7±2.3)kg健康杂种犬(经连续5天肌注四环素10mg/kg体重和血液附红细胞体检查阴性后),随机分为3组;Ⅰ组为切脾组,Ⅱ组为切脾加免疫抑制剂注射组,Ⅲ组为对照组。各组大均腹腔注射附红细胞体病患犬抗凝血4ml(红细胞用红... 21只体重(7±2.3)kg健康杂种犬(经连续5天肌注四环素10mg/kg体重和血液附红细胞体检查阴性后),随机分为3组;Ⅰ组为切脾组,Ⅱ组为切脾加免疫抑制剂注射组,Ⅲ组为对照组。各组大均腹腔注射附红细胞体病患犬抗凝血4ml(红细胞用红细胞体感染率94%,红细胞数3.8 ×10~6/mm^3),逐日采血进行血液学变化、生理指标以及临床病征等测定。结果表明,接种后第 1天Ⅰ组和Ⅱ组红细胞附红细胞体感染率为1.5%和2.1%,第6天Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别为81.3%、86.5%和75.2%;血象变化表现出不同程度的红细胞压积、血红蛋白、红细胞总数、嗜酸性白细胞、淋巴细胞下降;白细胞总数、嗜中性白细胞、单核细胞上升的趋势;Ⅰ、Ⅱ组中出现贫血、黄疸、发热、食欲不振、腹泻、呕吐等明显症状的发病犬分别为5只、7只,发病率分别为71%、100%,其中Ⅱ组病势最重,并死亡犬2只。两实验组发病犬其临床症状、血象变化、生理指标及病理组织学变化均同自然发病患犬变化相似,对照组无明显变化。 展开更多
关键词 附红细胞体病 人工复制 切脾术 免疫抑制剂
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基于高通量测序技术的冠心病患者肠道菌群多样性研究 被引量:27
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作者 胡海兵 崔立 +4 位作者 郭靓骅 王春艳 余强 尹桂芝 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2016年第2期1-11,19,共12页
为了分析冠心病人群肠道菌群结构和多样性特征,探究冠心病人群与健康人群肠道菌群结构差异。研究共采集50例冠心病患者和35例健康人粪便样本,提取粪便样本总DNA;根据细菌16SrDNA V3~V5区设计引物进行扩增,利用Illumina Miseq平台进行高... 为了分析冠心病人群肠道菌群结构和多样性特征,探究冠心病人群与健康人群肠道菌群结构差异。研究共采集50例冠心病患者和35例健康人粪便样本,提取粪便样本总DNA;根据细菌16SrDNA V3~V5区设计引物进行扩增,利用Illumina Miseq平台进行高通量测序;测序结果经过Reads拼接,OTUs(operational taxonomic units)聚类,物种注释,α多样分析,主成分分析,最终得到样品物种信息。在冠心病组和健康组中,拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)的丰度最高,其中拟杆菌门分别占到46.94%和61.96%,厚壁菌门分别占到41.51%和30.58%;丰度较高的是变形菌门(Proteobacteria)、梭杆菌门(Fusobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)。此外,两组菌群结构差异性表现为:冠心病组的拟杆菌门明显低于对照组(P=0.015〈0.05);而冠心病组的厚壁菌门显著高于对照组(P=0.009〈0.01)。α多样性分析结果显示,两组人群各样本在细菌种群多样性方面没有明显差异。OTUs比对结果表示,Veillonella、Veillonella dispar、Scardovia、Mogibacterium致病菌在冠心病组显著增高,而Bacteroidetes门下Parabacteroides、Bacteroides uniformis、Bacteroides caccae等有益菌则显著降低。主成份分析显示,综合PC1、PC2、PC3因素冠心病组和对照组样本被较好的区分开,表明健康组和冠心病组菌群结构存在显著差异。这些结果表明,冠心病患者与健康人群在肠道菌群多样性方面没有明显差异,但在菌群结构上存在较大差异;同时冠心病人肠道菌群致病菌数量多于健康人群,而拟杆菌类有益菌低于健康人群。 展开更多
关键词 肠道菌群 冠心病 宏基因组 高通量测序
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猪链球菌致病性研究及其公共卫生意义 被引量:21
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作者 陆承平 姚火春 +7 位作者 范红结 孙建和 顾宏伟 王楷 赵冉 濮俊义 张炜 《中国预防医学杂志》 CAS 2006年第4期361-362,共2页
关键词 猪链球菌2型 致病性研究 公共卫生 人畜共患病原菌 急性传染病 血清型 大范围
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中草药对热应激奶牛生产性能和血液指标的影响 被引量:24
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作者 陈琦 沈素芳 +3 位作者 刘佩红 崔立 姜法铭 《中国奶牛》 2007年第11期10-13,共4页
选择经产、胎次相同和产奶量相近的荷斯坦奶牛30头,随机分为对照组、试验1组和试验2组,每组10头。对照组饲喂基础日粮,试验组精料中每头每天添加300g复方中草药。测定产奶量、直肠温度,采集血样以放射免疫法测定外周血清中COR、ACTH、I... 选择经产、胎次相同和产奶量相近的荷斯坦奶牛30头,随机分为对照组、试验1组和试验2组,每组10头。对照组饲喂基础日粮,试验组精料中每头每天添加300g复方中草药。测定产奶量、直肠温度,采集血样以放射免疫法测定外周血清中COR、ACTH、IL-2、IL-6的水平,用全自动血液分析仪测定全血中WBC等20项指标。结果显示:(1)在9月2日~9月15日期间,试验组产奶量比对照组显著增加;(2)血清COR和ACTH水平在热应激条件下显著上升,而白细胞介素水平在热应激条件下显著下降,中草药处理组的激素水平均得到显著缓解(P<0.05);(3)在血液指标分析中,WBC、LY、Hb、RBC、HCT在热应激条件下,随着温度的升高而明显下降,表明中草药能有效缓解奶牛热应激。 展开更多
关键词 中草药 奶牛 产奶量 血液指标
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冷热刺激对犬血清皮质醇、促肾上腺皮质激素及血液生理指标的影响 被引量:16
15
作者 赵恩军 +2 位作者 张斌 谢爱纯 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期457-460,共4页
对体重为4 5±0 5kg的雄性京巴、沙皮和杂种宠物犬,随机分成2组,每组9只,由桡静脉采取自身对照血液后,冷应激组置于0℃的冰水混合物中30min,分别于刺激结束后0h、1h、2h采血;热应激组置于41~42℃的环境中1h,分别于刺激30min和60min... 对体重为4 5±0 5kg的雄性京巴、沙皮和杂种宠物犬,随机分成2组,每组9只,由桡静脉采取自身对照血液后,冷应激组置于0℃的冰水混合物中30min,分别于刺激结束后0h、1h、2h采血;热应激组置于41~42℃的环境中1h,分别于刺激30min和60min时,刺激结束后1h和2h采血。测定血样中的红细胞数、白细胞数、血红蛋白含量、红细胞比容、血沉、红细胞脆性等血液指标,并用放射免疫法测定血清中的皮质醇、促肾上腺皮质激素(ACTH)的浓度。结果表明:在热刺激条件下,各试验期皮质醇和ACTH的浓度均高于各自对照期,但热刺激30min和60min时,与各自对照期相比,皮质醇浓度和ACTH浓度差异均极显著(P<0 01);刺激结束后1h,皮质醇浓度与对照期相比差异仍极显著(P<0 01),ACTH浓度差异显著(P<0 05);刺激结束后2h二者虽都高于对照期,但差异不显著(P>0 05)。冷刺激条件下,各试验期皮质醇和ACTH的浓度均高于各自对照期,其中冷刺激结束时均差异极显著(P<0 01),结束后1h差异显著(P<0 05),结束后2h差异不显著(P>0 05)。冷热刺激对各项血液生理指标也都有或多或少的影响。以上结果显示:上述神经内分泌和血液生理指标的改变与急性冷热应激反应有关,提高了机体对环境变化的适应能力,从而保证生命活动的正常进行。 展开更多
关键词 冷热刺激 血清皮质醇 促肾上腺皮质激素 血液 生理指标 影响因素 桡静脉 体重
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多重PCR方法检测猪链球菌主要致病血清型及其毒力因子 被引量:19
16
作者 郑升博 +3 位作者 陆伟芳 袁聪俐 杨志彪 崔立 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2010年第1期53-58,共6页
根据猪链球菌基因序列,设计合成10对引物,通过在3个反应体系Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ中的组合优化,建立涵盖7种猪链球菌主要毒力因子mrp、epf、sly、gdh、gapdh、orf2和fbps及猪链球菌主要致病性血清型(2、7、9型)的快速敏感的多重PCR检测方法。对不... 根据猪链球菌基因序列,设计合成10对引物,通过在3个反应体系Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ中的组合优化,建立涵盖7种猪链球菌主要毒力因子mrp、epf、sly、gdh、gapdh、orf2和fbps及猪链球菌主要致病性血清型(2、7、9型)的快速敏感的多重PCR检测方法。对不同菌株检测结果显示,该多重PCR方法特异性强、敏感性高,能快速检测出猪链球菌2、7、9型及其毒力因子表型,可用于快速诊断及猪链球菌的分子流行病学调查。 展开更多
关键词 猪链球菌 多重PCR 血清型 毒力因子
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猪附红细胞体小鼠感染模型的建立及相关指标检测 被引量:17
17
作者 余飞 +2 位作者 崔立 袁聪俐 杨志彪 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2008年第1期42-45,共4页
构建了猪附红细胞体小鼠感染模型,研究了感染后血液常规指标,红细胞免疫功能和脾淋巴细胞转化功能,旨在为附红细胞体病跨种间感染机制研究以及免疫功能变化研究提供借鉴。研究采用分离纯化的猪附红细胞体为感染源,以尾静脉注射方式人工... 构建了猪附红细胞体小鼠感染模型,研究了感染后血液常规指标,红细胞免疫功能和脾淋巴细胞转化功能,旨在为附红细胞体病跨种间感染机制研究以及免疫功能变化研究提供借鉴。研究采用分离纯化的猪附红细胞体为感染源,以尾静脉注射方式人工感染SPF小鼠,感染后通过血液压片镜检,PCR检测及透射电镜检测鉴定模型建立成功。同时检测对照组和试验组小鼠的血液常规指标变化,红细胞免疫黏附功能和脾淋巴细胞转化功能变化,发现试验组小鼠红细胞总数减少,血红蛋白含量降低,红细胞比容降低,红细胞免疫黏附功能下降,其他指标没有显著变化。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 模型 血液学变化 红细胞免疫
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甘油浓度对蓝狐精子深低温冷冻保存的影响及冻融前后精子的超微结构 被引量:12
18
作者 李新红 顾孝连 +1 位作者 邹兴淮 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期421-428,共8页
人工采取 8只优质芬兰雄性蓝狐的精液 ,分别利用 2 %、 4 %、 6 %和 8%甘油浓度的卵黄 -Tris -果糖 -柠檬酸钠稀释液进行稀释 ,制成细管冻精。在冻融后 0、 0 5、 2、 4、 6h检测 4种浓度组的精子运动度、质膜完整率、顶体完整率 ;并... 人工采取 8只优质芬兰雄性蓝狐的精液 ,分别利用 2 %、 4 %、 6 %和 8%甘油浓度的卵黄 -Tris -果糖 -柠檬酸钠稀释液进行稀释 ,制成细管冻精。在冻融后 0、 0 5、 2、 4、 6h检测 4种浓度组的精子运动度、质膜完整率、顶体完整率 ;并利用透射电镜观察冻融前后精子的超微结构变化。冻融后 0h ,4 %甘油浓度组冻融精子的运动度、质膜完整率、顶体的完整率均最高 (分别为 4 1 8%、 4 3 6 %、 4 8 4 % ) ,2 %浓度组最低 (分别为 2 4 5 %、 2 7 6 %、 31 7% ) ;随着检测时间延长 ,2 %与 4 %组的精子特性差异显著 ,但 2 %、 6 %、 8% 3个组间差异不显著 ;6h时各组间精子的运动度均不超过 10 % ,最高质膜完整率和顶体完整率分别为 11 8%、12 7%。说明蓝狐精液稀释剂中甘油的适宜浓度应为 4 % ,冻融后精子的活力维持时间较短。蓝狐精子冻融过程中质膜极易发生膨胀或断裂、顶体囊泡化或溃散 ,而质膜和顶体丢失现象较少。 展开更多
关键词 蓝狐 精子 低温保存 甘油 特性
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猪链球菌2型致病机制研究进展 被引量:16
19
作者 朱建 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第9期815-817,共3页
关键词 猪链球菌2型 机制研究 致病 人类感染 猪链球菌病 支气管炎 疑似病例 首次报道 盛夏季节
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应用RT-PCR技术快速检测鉴定猪瘟病毒 被引量:14
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作者 李春阳 单松 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2003年第1期34-39,共6页
根据所有已报道的猪瘟病毒株(HCV)和牛病毒性腹泻病毒株(BVDV)的序列设计了3条引物Pa、Pb、Pc。应用RT-PCR技术,引物对Pa/Pb从猪瘟HCLV株、猪瘟Thiveral株、3株猪瘟野毒株都扩增出了预期185bp的片断,Pa/Pc从BVDVOregonC24V株中也扩增出... 根据所有已报道的猪瘟病毒株(HCV)和牛病毒性腹泻病毒株(BVDV)的序列设计了3条引物Pa、Pb、Pc。应用RT-PCR技术,引物对Pa/Pb从猪瘟HCLV株、猪瘟Thiveral株、3株猪瘟野毒株都扩增出了预期185bp的片断,Pa/Pc从BVDVOregonC24V株中也扩增出了240bp的片断,而Pa/Pb与牛睾丸原代细胞、PK-15细胞、BVDVOregonC24V株均无反应,Pa/Pc也不与所试验的5株猪瘟毒株反应。采用多重PCR可以从同时含有HCV和BVDV核酸的样品中扩增出各自的特异性条带。针对猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)的特异性插入序列,设计了引物Pr、Pra、Prb,可以从HCLV细胞毒或用HCLV人工感染的兔脾组织毒中扩增出预期200bp的片断,而Pr、Pra、Prb与猪瘟Thiveral株和3株猪瘟野毒株均不反应。通过含毒量梯度试验,得出了RT-PCR可检测猪瘟病毒量的下限为200RID或200TCID50。 展开更多
关键词 应用 RT-PCR技术 猪瘟病毒 牛病毒性腹泻病毒
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