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检测狂犬病病毒中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法的建立 被引量：27
1
作者 严家新 李承平 +4 位作者 朱家鸿 曹瑞瑶 薛红钢 刘碧芬 徐葛林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期93-96,共4页
在制备出抗狂犬病病毒（RV）核蛋白（NP）荧光标记抗体的基础上，建立起检测RV中和抗体的快速荧光灶抑制试验（RFFIT）方法。经与小鼠中和试验（MNT）比较，其重复性、特异性和灵敏度差异均无显著意义。该方法在大多数需要检测RV中和抗... 在制备出抗狂犬病病毒（RV）核蛋白（NP）荧光标记抗体的基础上，建立起检测RV中和抗体的快速荧光灶抑制试验（RFFIT）方法。经与小鼠中和试验（MNT）比较，其重复性、特异性和灵敏度差异均无显著意义。该方法在大多数需要检测RV中和抗体的情况下可取代MNT。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 中和抗体 荧光灶抑制试验
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我国流行的4株狂犬病街毒株G基因序列及分子流行病学研究 被引量：18
2
作者 刘胜牙 严家新 +2 位作者 徐葛林 吴杰 郑新雄 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期129-132,共4页
目的探讨我国流行的狂犬病毒(RV)基因差异,评价现有疫苗的适用性。方法通过RT-PCR并对其产物测序后获得4株RV街毒株的G基因序列以及G与M和L基因的区间序列。利用计算机分析软件比较4株RV与已经发表的毒株的核苷酸和推导的氨基酸序列。... 目的探讨我国流行的狂犬病毒(RV)基因差异,评价现有疫苗的适用性。方法通过RT-PCR并对其产物测序后获得4株RV街毒株的G基因序列以及G与M和L基因的区间序列。利用计算机分析软件比较4株RV与已经发表的毒株的核苷酸和推导的氨基酸序列。结果糖蛋白(GP)完整的编码基因序列长度为1575 bp。GP氨基酸序列同源性明显高于相应的核苷酸序列(除Mokola外),4株街毒与CTN的同源性高于aG株。GP不同区段比较显示,膜外区同源性高于膜内区。G-M区间核苷酸序列长度为5 bp;除广西4外,其余毒株100％同源。GL区间核苷酸序列长度为2,4 bp,越1与肥东同源性为100％。结论4株RV均属于基因I型。广西的毒株之间存在不同的来源。街毒与疫苗株之间基因存在差异。4株RV与SAD-B19进化途径相近,与PV株相差较远。越1与肥东株亲缘关系极近,可能是由同一毒株演化而来。 展开更多
关键词 狂犬病毒 糖蛋白 基因序列 GP G-L区间 G-M区间 分子流行病学 毒株
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狂犬病毒糖蛋白DNA疫苗的研制及其免疫效果的观察 被引量：13
3
作者 李萍 严家新 朱家鸿 《中国病毒学》 CSCD 1997年第2期142-148,共7页
构建了含有狂犬病毒（RV）CVS株糖蛋白（GP）基因的重组质粒pCMVCVSRG，将其转染至鼠NIH3T3细胞中，用间接免疫荧光法和APAAP法均证实RVGP能在真核细胞中表达。分别将合RV不同毒株的GP基因的质粒（DNA疫苗）及空白载体质粒（对照组）免... 构建了含有狂犬病毒（RV）CVS株糖蛋白（GP）基因的重组质粒pCMVCVSRG，将其转染至鼠NIH3T3细胞中，用间接免疫荧光法和APAAP法均证实RVGP能在真核细胞中表达。分别将合RV不同毒株的GP基因的质粒（DNA疫苗）及空白载体质粒（对照组）免疫小鼠，仅DNA疫苗免疫的小鼠产生了中和抗体。以RV攻击后，DNA疫苗免疫组小鼠的存活率与对照组相比，差异有极显著性意义（P＜0．01）；不同的启动子（CMV或SV40）与不同GP基因（来源于CVS株或ERA株）对DNA疫苗的免疫效果无明显影响。在注射120d后．用PCR方法仍可检测出RVGP基因。结果表明：狂犬病DNA疫苗能够诱生低水平的中和抗体和记忆性B淋巴细胞，并能保护小鼠抵抗RV的攻击。该疫苗能在体内稳定存在。狂犬病DNA疫苗的研制为狂犬病免疫开辟了一条新途径，并可为防治其他疾病的DNA疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 狂犬病毒 DNA疫苗 研制 免疫效果
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人用狂犬病疫苗的过去、现在和未来 被引量：12
4
作者 王继麟 严家新 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期23-25,共3页
关键词 狂犬病疫苗 HDCV PHKCV 原代细胞培养疫苗 传代细胞系疫苗
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狂犬病毒疫苗株CTN-1八代次N和G基因序列测定及分析 被引量：15
5
作者 孟胜利 徐葛林 +4 位作者 明平刚 孙文 吴杰 杨晓明 严家新 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期327-332,335,共7页
目的测定八个代次CTN-1疫苗株核蛋白（N）和糖蛋白（G）基因序列，并与代表性疫苗株和街毒株进行比较。方法用RT-PCR反应扩增八代次CTN-1的N和G基因，获得cDNA，进行序列测定。结果八个代次CTN-1的N和G基因序列与其它疫苗株比较，核苷... 目的测定八个代次CTN-1疫苗株核蛋白（N）和糖蛋白（G）基因序列，并与代表性疫苗株和街毒株进行比较。方法用RT-PCR反应扩增八代次CTN-1的N和G基因，获得cDNA，进行序列测定。结果八个代次CTN-1的N和G基因序列与其它疫苗株比较，核苷酸的同源性分别为82．7％～84．5％和86．6％～88．5％，氨基酸同源性分别为88．9％～92．5％和95．3％～98．2％；与在我国分离的街毒株相比，核苷酸的同源性分别为84．2％～95．0％和80．4％～94．3％，氨基酸同源性分别为92．1％～99．6％和88．7％～98．5％。CTN-1株八个代次之间的核苷酸序列几乎完全相同。结论CTN-1株在传代过程中N和G基因变异小，与中国流行的代表性街毒株的同源性高于其它疫苗株。 展开更多
关键词 狂犬病毒 传代 CTN-1 序列测定
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抗狂犬病毒核蛋白荧光标记抗体的制备和初步鉴定 被引量：13
6
作者 严家新 祝玉桃 +2 位作者 李承平 徐葛林 朱家鸿 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期59-61,F003,共4页
目的　建立抗狂犬病毒 (RV)核蛋白 (NP)荧光标记抗体的制备方法并进行初步鉴定。方法　采用两种方法制备该试剂 :1 从RV感染的细胞中提纯RV核糖核蛋白 (RNP)作抗原 ,免疫动物然后制备荧光标记抗体 ;2 直接用本室原制备的 4株抗RV　NP... 目的　建立抗狂犬病毒 (RV)核蛋白 (NP)荧光标记抗体的制备方法并进行初步鉴定。方法　采用两种方法制备该试剂 :1 从RV感染的细胞中提纯RV核糖核蛋白 (RNP)作抗原 ,免疫动物然后制备荧光标记抗体 ;2 直接用本室原制备的 4株抗RV　NP的单克隆抗体混合进行标记。结果　制备的试剂有较高的敏感性和特异性 ,经与法国巴斯德诊断用品公司的相应产品进行比较 ,所得结果的符合率为 10 0 %。特别是用后一种方法制备的试剂优点更多。结论　该制品可替代进口产品 。 展开更多
关键词 狂犬病毒核蛋白 荧光标记抗体 单克隆抗体
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狂犬病流行简史 被引量：8
7
作者 严家新 潘南胜 《中华医史杂志》 CAS 1994年第4期196-199,共4页
有关病毒病的历史记载以狂犬病的记载为最早，也最可靠。本文对中外有关史料进行评述，勾画出狂犬病从古至今流行的基本轮廓。目前狂犬病在中国流行的形势十分严峻，应借鉴已消灭了狂犬病国家的经验。
关键词 狂犬病 流行病学
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DNA疫苗研究进展 被引量：9
8
作者 李萍 严家新 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 1995年第3期100-104,共5页
裸露DNA技术为亚单位疫苗的发展提供了一条崭新的途径.DNA疫苗兼有重组亚单位疫苗的安全性和减毒活疫苗诱导全面免疫应答的高效力,已成为疫苗研究领域中的热点之一.抗流感、艾滋病、狂犬病、乙型肝炎、结核病、疟疾和利什曼病等疾病的DN... 裸露DNA技术为亚单位疫苗的发展提供了一条崭新的途径.DNA疫苗兼有重组亚单位疫苗的安全性和减毒活疫苗诱导全面免疫应答的高效力,已成为疫苗研究领域中的热点之一.抗流感、艾滋病、狂犬病、乙型肝炎、结核病、疟疾和利什曼病等疾病的DNA疫苗的动物实验已取得可喜结果,该疫苗的最大优点是有可能对变异迅速的病原微生物提供交叉防御作用.本文对DNA疫苗的研究状况作一简述. 展开更多
关键词 疫苗 DNA疫苗 研究 流行性感冒 艾滋病 狂犬病
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狂犬病毒糖蛋白及核蛋白在非复制型痘苗病毒天坛株中的共同表达 被引量：8
9
作者 李萍 朱家鸿 +5 位作者 严家新 郭斐 胡巧玲 王继麟 刘碧芬 阮力 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期481-484,共4页
目的　提高重组痘苗病毒狂犬疫苗的有效性和安全性。方法　利用TK区表达狂犬病毒糖蛋白 (RG)的重组痘苗病毒作为亲本株 ,通过两步同源重组 ,删除痘苗病毒基因组CK片段间与毒力和宿主范围相关的核酸片段 ,同时将狂犬病毒核蛋白 (RN)基因... 目的　提高重组痘苗病毒狂犬疫苗的有效性和安全性。方法　利用TK区表达狂犬病毒糖蛋白 (RG)的重组痘苗病毒作为亲本株 ,通过两步同源重组 ,删除痘苗病毒基因组CK片段间与毒力和宿主范围相关的核酸片段 ,同时将狂犬病毒核蛋白 (RN)基因插入C K片段之间 ,获得了含有RG基因和RN基因的非复制型重组痘苗病毒VTKRGΔCKLacZRN。结果　经PCR鉴定 ,RN基因已插入CK区 ;Westernblot结果显示 ,该株病毒能同时表达RG和RN ,相对分子质量 (Mr)分别为 6 5× 10 3 和 5 0 5× 10 3。VTKRGΔCKLacZRN在人源细胞如TK 143细胞中不能正常繁殖 ,在鸡胚成纤维细胞 (CEF)中能正常复制。与非复制型重组病毒VTKRGΔCK相比 ,VTKRGΔCKLacZRN免疫小鼠后能更快地诱生较高滴度的中和抗体 ,效果相当于复制型重组病毒VTKRG免疫组 ;它们均能保护小鼠针对致死剂量狂犬病毒国际标准攻击毒株 (CVS)的攻击。 展开更多
关键词 狂犬病毒 糖蛋白 核蛋白 非复制型痘苗病毒 表达
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抗狂犬病毒核蛋白单克隆抗体在狂犬病街毒检测中的应用 被引量：9
10
作者 徐葛林 严家新 +5 位作者 Larrous F 祝玉桃 Cozette P 薛红刚 胡巧玲 Bourhy H 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期113-115,共3页
目的　测试抗狂犬病毒核蛋白单克隆抗体用于间接免疫荧光法检测已确认的狂犬病阳性及狂犬病阴性的动物脑组织标本的灵敏度和特异性。方法　将巴斯德研究所狂犬病参考中心保存的来自不同国家的 6 2份狂犬病街毒动物脑组织标本以及 2 71... 目的　测试抗狂犬病毒核蛋白单克隆抗体用于间接免疫荧光法检测已确认的狂犬病阳性及狂犬病阴性的动物脑组织标本的灵敏度和特异性。方法　将巴斯德研究所狂犬病参考中心保存的来自不同国家的 6 2份狂犬病街毒动物脑组织标本以及 2 71份法国境内收集的正常动物脑组织标本 ,用上述间接免疫荧光检测 ,并以巴斯德研究所狂犬病参考中心提供的狂犬病毒酶联免疫吸附法、组织细胞分离法及直接免疫荧光法等三个试验作确认试验 ,进行比较。结果　间接免疫荧光法可检测涵盖狂犬病毒 7个基因型在内的所有 6 2份街毒标本 ,对确认为狂犬病阴性的动物脑组织标本检测均为阴性 ,其特异性和灵敏度均达到 10 0 %。结论　抗狂犬病毒核蛋白单抗作为间接免疫荧光法检测狂犬病毒具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 狂犬病毒 间接免疫荧光法 脑组织 核蛋白 单克隆抗体 标本 阴性 动物 基因型 保存
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狂犬病毒aG株糖蛋白在pET原核系统中的表达及纯化 被引量：9
11
作者 何珺 严家新 +1 位作者 李承平 朱家鸿 《微生物学免疫学进展》 1999年第3期1-6,共6页
在狂犬病的临床诊断和基础研究中都迫切需要大量纯度高且价廉的狂犬病毒糖蛋白抗原。本文应用带有Ｈｉｓ６尾的ｐＥＴ原核表达系统对狂犬病毒（ＲＶ）ａＧ株的糖蛋白（ＧＰ）进行表达和纯化。构建的融合表达载体ｐＥＴ－ａＧ１和ｐＥＴ... 在狂犬病的临床诊断和基础研究中都迫切需要大量纯度高且价廉的狂犬病毒糖蛋白抗原。本文应用带有Ｈｉｓ６尾的ｐＥＴ原核表达系统对狂犬病毒（ＲＶ）ａＧ株的糖蛋白（ＧＰ）进行表达和纯化。构建的融合表达载体ｐＥＴ－ａＧ１和ｐＥＴ－ａＧ２（－５７ｂｐ）分别含有ＲＶａＧ株ＧＰ基因的全序列及删除了为ＧＰ信号肽编码的５８个碱基的序列。用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹、间接ＥＬＩＳＡ检测都证明表达产物为ＲＶＧＰ，且位于菌体中的包涵体内。经固定化金属螯合层析（ＩＭＡＣ）提纯，ｐＥＴ－ａＧ１表达产物有较高的特异性和纯度，可用作测定ＲＶＧＰ抗体的免疫诊断试剂。 展开更多
关键词 狂犬病毒 糖蛋白 融合表达系统 金属螯合层析
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两种亲和层析方法纯化兔抗CHO细胞蛋白多克隆抗体的比较 被引量：9
12
作者 杜洪桥 朱蓉 +1 位作者 徐葛林 严家新 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第8期968-970,共3页
目的比较两种亲和层析法纯化兔抗CHO细胞蛋白多克隆抗体的效果。方法制备可溶性CHO细胞蛋白,免疫家兔,获得兔免疫血清,采用蛋白A亲和层析和抗原偶联亲和层析两种方法分别纯化兔抗CHO细胞蛋白抗体,ELISA测定抗体效价;SDS-PAGE分析抗体纯... 目的比较两种亲和层析法纯化兔抗CHO细胞蛋白多克隆抗体的效果。方法制备可溶性CHO细胞蛋白,免疫家兔,获得兔免疫血清,采用蛋白A亲和层析和抗原偶联亲和层析两种方法分别纯化兔抗CHO细胞蛋白抗体,ELISA测定抗体效价;SDS-PAGE分析抗体纯度;Western blot分析抗体的特异性。结果兔IgG经蛋白A亲和层析纯化后,ELISA效价约为1∶106,抗体纯度达81.3%;经抗原偶联亲和层析纯化后,ELISA效价可达1∶107,抗体纯度达80.6%。两种方法纯化的抗体特异性均较好。结论抗原偶联亲和层析法更适合纯化兔抗CHO细胞蛋白多克隆抗体。 展开更多
关键词 亲和层析 宿主细胞蛋白 多克隆抗体
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中国12株狂犬病街毒株G基因序列测定与分析 被引量：8
13
作者 孟胜利 徐葛林 +3 位作者 吴杰 王定明 严家新 杨晓明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期497-501,共5页
目的了解中国狂犬病毒的流行情况以及街毒株与中国人用、兽用狂犬病疫苗株在G基因核苷酸和氨基酸水平的差异,为有效控制狂犬病疫情提供初步科学依据。方法对12株街毒株G基因进行了全基因测序,与其它36株中国狂犬病街毒株,以及中国的疫... 目的了解中国狂犬病毒的流行情况以及街毒株与中国人用、兽用狂犬病疫苗株在G基因核苷酸和氨基酸水平的差异,为有效控制狂犬病疫情提供初步科学依据。方法对12株街毒株G基因进行了全基因测序,与其它36株中国狂犬病街毒株,以及中国的疫苗株和其它国家毒株的G基因序列进行了综合分析。结果序列分析表明来源于中国的50株狂犬病毒均为基因Ⅰ型狂犬病毒;其中具有代表性的6株病毒与我国现在使用的各种疫苗株在G基因的核苷酸和氨基酸水平上均存在不同程度的差异,与我国人用疫苗株CTN同源性较高;进化分析表明,我国主要流行狂犬病毒与泰国、印度尼西亚、马来西亚等东南亚狂犬病毒株处于同一分支。中国毒株之间G基因核苷酸同源性分别≥82.3%;氨基酸同源性分别≥92.1%;中国街毒株与疫苗株相比较核苷酸的同源性为79.3%～94.2%,氨基酸的同源性为87.8%～97.9%。结论我国的狂犬病毒为基因Ⅰ型狂犬病毒,可以明确分为6个进化群。无论在核苷酸还是氨基酸水平上,中国多数街毒株与疫苗株CTN之间的同源性要高于与其它疫苗株。 展开更多
关键词 狂犬病毒 分子流行病 G基因 测序分析 中国
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中国狂犬病毒疫苗株CTN-1-V三个代次的GP基因序列分析 被引量：8
14
作者 明平刚 孙文 +3 位作者 徐葛林 吴杰 杨晓明 严家新 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期217-219,235,共4页
目的分析三个代次CTN-1-V病毒株糖蛋白(GP)基因部分序列,并与代表性街毒株进行比较。方法利用RTPCR反应,从感染了CTN-1-V病毒的小鼠脑内获得GPcDNA的部分片段,并进行序列测定。结果三个代次的CTN-1-V病毒株GPcDNA序列的690个核苷酸与代... 目的分析三个代次CTN-1-V病毒株糖蛋白(GP)基因部分序列,并与代表性街毒株进行比较。方法利用RTPCR反应,从感染了CTN-1-V病毒的小鼠脑内获得GPcDNA的部分片段,并进行序列测定。结果三个代次的CTN-1-V病毒株GPcDNA序列的690个核苷酸与代表性狂犬病毒GP核苷酸相应序列同源性为83.2%～96.8%,氨基酸序列同源性为90.0%～97.4%。CTN1V株三代之间的核苷酸序列几乎相同。结论CTN1V株在传代过程中GP基因结构基本稳定,与中国流行的代表性街毒株的同源性高于aG株和PV株。 展开更多
关键词 狂犬病毒 传代 基因序列 中国
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两种无佐剂国产狂犬病疫苗的免疫效果观察 被引量：7
15
作者 赵德峰 徐葛林 +3 位作者 郑新雄 祝玉桃 胡巧玲 严家新 《公共卫生与预防医学》 2007年第3期36-38,共3页
目的评价以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)及以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)的免疫效果。方法选取35名(1组)和46名(2组)一般的Ⅱ级暴露后患者,按0、3、7、14和28d的免疫程序,分... 目的评价以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)及以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)的免疫效果。方法选取35名(1组)和46名(2组)一般的Ⅱ级暴露后患者,按0、3、7、14和28d的免疫程序,分别接种武汉生物制品研究所(CTN-1株毒种、Vero细胞)和河南普新生物技术公司生产的无佐剂狂犬病疫苗(aG株毒种、原代地鼠肾细胞),观察接种后的不良反应,采用快速荧光灶抑制实验(RFFTT)检测初免后7、14d血清狂犬病毒中和抗体。结果两种疫苗初免后7d的抗体阳转率分别为58.52%和65.22%,无显著性差异,初免后14d的抗体阳转率均为100%,接种Vero细胞狂苗组无不良反应;接种原代地鼠肾细胞狂苗组有1人接种第二针后出现4cm×4cm的红肿。结论两种无佐剂国产狂犬病疫苗产生保护性抗体时间短,以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)免疫效果好于以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 免疫效果 安全性
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应采用细胞培养法取代动物试验法检定狂犬病疫苗 被引量：5
16
作者 严家新 祝玉桃 +2 位作者 徐葛林 黄仕和 方志正 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期192-194,共3页
在<中国生物制品规程>2000年版中,规定的狂犬病疫苗的多项检定均采用小鼠实验,如病毒滴定、病毒灭活确证试验以及疫苗效力测定等.
关键词 细胞培养法 检定 狂犬病疫苗 实验方法
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狂犬病病毒CTN株反向遗传系统的改造及拯救 被引量：6
17
作者 解庭波 明平刚 +5 位作者 唐芳 黄思佳 沈智俊 王月 徐葛林 严家新 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第11期1121-1126,共6页
目的对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行改造,并拯救改造后的狂犬病病毒。方法应用基因定点突变技术分别对狂犬病病毒CTN株G蛋白的第194位和333位氨基酸进行定点突变,将突变后的G蛋白基因替换原有反向遗传系统中的G蛋白基因,同时对突变... 目的对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行改造,并拯救改造后的狂犬病病毒。方法应用基因定点突变技术分别对狂犬病病毒CTN株G蛋白的第194位和333位氨基酸进行定点突变,将突变后的G蛋白基因替换原有反向遗传系统中的G蛋白基因,同时对突变后的G蛋白基因进行拷贝,分明构建含有1、2和3个改造后G蛋白基因全长序列的感染性克隆,并将其分别与辅助质粒共转染BSR细胞,采用直接免疫荧光实验(DFA)和RT-PCR法鉴定重组病毒。结果 G蛋白的第194位天冬酰胺突变为丝氨酸,第333位谷氨酰胺突变为谷氨酸,获得含有1、2和3个突变后G蛋白基因的狂犬病病毒CTN株反向遗传系统,并拯救出重组狂犬病病毒。结论成功对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行了改造,并拯救出了重组病毒,为研制安全、稳定、高效的新型狂犬病病毒疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 CTN株 反向遗传学 定点突变 G基因
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环介导等温扩增反应的原理及应用 被引量：6
18
作者 黄思佳 解庭波 严家新 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第12期1511-1513,共3页
环介导等温扩增反应(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是日本学者Notomi于2000年在NucleicAcids Res杂志上公开的一种新的基因诊断技术,该法操作简便,扩增效率及灵敏度高,已广泛应用于食品、临床、农业等领域,有望成为主... 环介导等温扩增反应(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是日本学者Notomi于2000年在NucleicAcids Res杂志上公开的一种新的基因诊断技术,该法操作简便,扩增效率及灵敏度高,已广泛应用于食品、临床、农业等领域,有望成为主流的基因诊断方法。本文对LAMP的反应特征及原理、优缺点、临床应用作一综述。 展开更多
关键词 环介导等温扩增反应 核酸扩增技术
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裸露DNA──疫苗发展的一条新途径 被引量：5
19
作者 严家新 《生命的化学》 CAS CSCD 1994年第4期38-40,共3页
裸露ＤＮＡ──疫苗发展的一条新途径严家新（武汉生物制品研究所，武汉４３００６０）关键词裸露ＤＮＡ，疫苗自从Ｗｏｌｆｆ等１９９０年在Ｓｃｉｅｎｃｅ上发表《直接将基因转移至活体小鼠肌肉》一文以来，裸露ＤＮＡ（ｎａｋｅｄＤ... 裸露ＤＮＡ──疫苗发展的一条新途径严家新（武汉生物制品研究所，武汉４３００６０）关键词裸露ＤＮＡ，疫苗自从Ｗｏｌｆｆ等１９９０年在Ｓｃｉｅｎｃｅ上发表《直接将基因转移至活体小鼠肌肉》一文以来，裸露ＤＮＡ（ｎａｋｅｄＤＮＡ）成了疫苗研究中热门的领域之一... 展开更多
关键词 裸露DNA 疫苗 生物制品 研制
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湖北省1989～1992年A组轮状病毒分子流行病学研究 被引量：5
20
作者 潘南胜 严家新 +3 位作者 龚镇奎 方肇寅 王秋红 章菁 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1995年第3期250-253,共4页
对１９８９～１９９２年在湖北省内收集的２４９份婴幼儿腹泻粪便标本用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、碳凝集试验（ＣＡＴ）试剂盒和ＲＮＡ电泳（聚丙烯酰胺凝胶电泳，ＰＡＧＥ）等３种方法检测Ａ组轮状病毒（ＲＶ）。这３种方法各... 对１９８９～１９９２年在湖北省内收集的２４９份婴幼儿腹泻粪便标本用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、碳凝集试验（ＣＡＴ）试剂盒和ＲＮＡ电泳（聚丙烯酰胺凝胶电泳，ＰＡＧＥ）等３种方法检测Ａ组轮状病毒（ＲＶ）。这３种方法各有优点，可基本满足临床检测的需要。对部分阳性样品还用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法进行分型。共检出７种电泳型，３种血清型的Ａ组ＲＶ，另有１种毒株经ＰＣＲ鉴定型别特殊，有待进一步研究。在样品收集期间，有多种电泳型和血清型同时或交替流行，以血清Ｇ１型占优势，Ｇ２型次之，Ｇ３型较少。Ａ组ＲＶ的遗传多样性增加了预防和控制的难度。 展开更多
关键词 婴幼儿腹泻 轮状病毒 流行病学 分子流行病学
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