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重组腺病毒AdmIL-12对树突状细胞的基因转染 被引量：1
1
作者 邵长周 张浩茹 +3 位作者 瞿介明 何礼贤 张艳红 王晋慧 《中国临床医学》 2009年第5期653-656,共4页
目的:应用重组腺病毒AdmIL-12转染树突状细胞(DC)制备DC疫苗。方法:以重组腺病毒AdmIL-12转染DC后,用流式细胞仪检测DC的表型,用RT-PCR检测IL-12在DC内的表达,用EILSA法测定细胞培养上清液中的mIL-12和mIFN-γ的含量。通过IL-12刺激T细... 目的:应用重组腺病毒AdmIL-12转染树突状细胞(DC)制备DC疫苗。方法:以重组腺病毒AdmIL-12转染DC后,用流式细胞仪检测DC的表型,用RT-PCR检测IL-12在DC内的表达,用EILSA法测定细胞培养上清液中的mIL-12和mIFN-γ的含量。通过IL-12刺激T细胞分泌IFN-γ的能力以检测DC分泌的IL-12的生物活性。结果:重组腺病毒AdmIL-12能高效转染DC,转染后DC的表型无显著改变,转染DC能大量分泌具有生物活性的IL-12。结论:腺病毒AdmIL-12成功转染DC,获得有效的DC疫苗。 展开更多
关键词 腺病毒 载体 树突状细胞 细胞因子 疫苗
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应用特异性抗原刺激树突细胞增强小鼠抵抗烟曲霉感染的能力 被引量：1
2
作者 邵长周 瞿介明 +2 位作者 何礼贤 张艳红 王晋慧 《微生物与感染》 2006年第3期134-139,共6页
目的探讨曲霉抗原刺激树突细胞(DC)应用于小鼠后对小鼠抵抗曲霉感染能力的影响。方法小鼠骨髓制备DC,尾静脉接种小鼠;腹腔内注射环磷酰胺后,鼻腔内滴入烟曲霉孢子制备侵袭性肺曲霉病小鼠模型;获取小鼠肺组织并进行匀浆,假丝酵母(念珠菌... 目的探讨曲霉抗原刺激树突细胞(DC)应用于小鼠后对小鼠抵抗曲霉感染能力的影响。方法小鼠骨髓制备DC,尾静脉接种小鼠;腹腔内注射环磷酰胺后,鼻腔内滴入烟曲霉孢子制备侵袭性肺曲霉病小鼠模型;获取小鼠肺组织并进行匀浆,假丝酵母(念珠菌)显色培养基接种后进行菌落计数,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测mγ干扰素(ndFN-γ)含量,部分肺组织进行HE和GMS染色;以反转录．聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测小鼠脾脏中细胞因子IFN-γ的mRNA表达。结果与单纯接种DE和热灭活烟曲霉(HAF)的小鼠相比,烟曲霉抗原刺激DC回输的小鼠存活率显著增高,脾脏内IFN-γ的mRNA表达增加,肺组织烟曲霉负荷明显降低,肺组织匀浆中IFN-γ含量(3．60±1．57ng/ml)亦高于非刺激DC免疫小鼠(HAF．1．35±0．47ngml;单纯DC,1．1±0．42ngml,P＜0．01),接受单纯DC和HAF的小鼠肺组织可见烟曲霉孢子、菌丝生长,有支气管壁的破坏,支气管周围坏死,肺泡和间质内炎症细胞浸润,而接受烟曲霉抗原刺激DC的小鼠肺内浸润炎症细胞减少,未发现坏死和真菌生长。结论应用烟曲霉抗原刺激DC,可以在小鼠体内诱导特异性Th1型反应．增强小鼠抵抗烟曲霉感染的能力。 展开更多
关键词 树突细胞 侵袭性肺曲霉病 T细胞免疫 病理
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hb1f广泛表达转基因小鼠品系的建立及其组织形态学分析 被引量：1
3
作者 王水良 贺艳 +5 位作者 谢幼华 汪垣 厉建中 王龙 王铸钢 傅继梁 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第23期2457-2460,共4页
人核受体hB1F是核受体超家族Ftz-F1亚家族的新成员,对其同源基因的研究提示它可能在生物体的胆固醇代谢平衡调节中有重要作用.在通过显微注射法获得携有hblf转基因的Founder小鼠后,各Founder小鼠分别与正常C57小鼠杂交,同一Founder小鼠... 人核受体hB1F是核受体超家族Ftz-F1亚家族的新成员,对其同源基因的研究提示它可能在生物体的胆固醇代谢平衡调节中有重要作用.在通过显微注射法获得携有hblf转基因的Founder小鼠后,各Founder小鼠分别与正常C57小鼠杂交,同一Founder小鼠经PCR鉴定阳性的F1代间再相互杂交建系.经F1,F2以及测交子代的分子鉴定,已成功完成了hblf广泛表达转基因小鼠品系的建立,同时也对建系小鼠做了初步的组织形态学分析. 展开更多
关键词 HB1F 转基因小鼠 组织形态学 表型分析 乙型肝炎病毒
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发夹状核酶G_(11)突变对体外切割活性的影响
4
作者 宋宇虎 林菊生 +4 位作者 孔心涓 刘南植 王南下 李斌 金由辛 《自然科学进展》 北大核心 2003年第4期404-407,共4页
为了研究发夹状核酶结构中G_(11)特定核苷酸对于其体外切割活性的影响,用^(32)P标记长度为267nt含有乙型肝炎病毒C区 pKC的体外转录物作为靶 RNA,把合成的 G_(11)位突变的发夹状核酶基因片段克隆入自剪切核酶载体 p1.5内形成pHpRz ;利用... 为了研究发夹状核酶结构中G_(11)特定核苷酸对于其体外切割活性的影响,用^(32)P标记长度为267nt含有乙型肝炎病毒C区 pKC的体外转录物作为靶 RNA,把合成的 G_(11)位突变的发夹状核酶基因片段克隆入自剪切核酶载体 p1.5内形成pHpRz ;利用^(32)P标记pHpRz的体外转录物,凝胶电泳进行核酶的鉴定和纯化。把未标记的各种核酶与同位素标记的靶RNA在不同条件下进行切割反应,凝胶电泳,放射自显影分析反应结果。切割结果显示与底物的靶序列完全互补的发夹状核酶具有最高的切割活性,随着与靶序列的互补能力降低发夹状核酶的切割活性逐渐下降,甚至消失,这表明发夹状核酶结构中的G_(11)位点对于发夹状核酶的切割活性不是必需的,所以与发夹状核酶的G_(11)位点相对应的靶序列的选择不受此位点的限制。 展开更多
关键词 发夹状核酶 G11位点 点突变 体外切割活性 酶反应动力学 酶活性 酶结构
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