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伴糖尿病牙周炎患者牙龈卟啉单胞菌FimA基因型的检测 被引量：22
1
作者 杨炳涛 徐菁玲 +2 位作者 和璐 孟焕新 徐莉 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期20-24,共5页
目的 了解伴2型糖尿病牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）菌毛蛋白A（fimbria protein A,FimA）基因型的分布情况,探讨糖尿病加重牙周破坏的可能机制.方法 纳入北京大学口腔医学院·口腔医院牙周... 目的 了解伴2型糖尿病牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）菌毛蛋白A（fimbria protein A,FimA）基因型的分布情况,探讨糖尿病加重牙周破坏的可能机制.方法 纳入北京大学口腔医学院·口腔医院牙周科中老年中重度牙周炎患者80例,其中伴2型糖尿病40例（伴糖尿病牙周炎组）,无系统性疾病者40例（单纯牙周炎组）.对两组患者分别进行问卷调查、全口牙周检查及血生化检查,滤纸条法取前牙和后牙各一个位点的龈下菌斑形成集合菌斑样本,PCR法检测样本内Pg及其FimA基因型,比较两组受试者Pg及其FimA基因型的检出差异.结果 伴糖尿病牙周炎组菌斑指数[2.35（0.58）]显著高于单纯牙周炎组[1.64（0.76）]（P＜0.05）,其他各项牙周临床指标差异均无统计学意义（P＞0.05）;伴糖尿病牙周炎组龈下菌斑Pg检出率[50％（20/40）]与单纯牙周炎组[60％ （24/40）]相比差异无统计学意义（P＞0.05）,但FimAⅡ型检出百分比[80％（16/20）]显著高于后者[42％（10/24）] （P＜0.05）.结论 伴2型糖尿病牙周炎患者较无系统性疾病牙周炎患者更易感染毒力较强的FimA Ⅱ型Pg. 展开更多
关键词 牙周炎 糖尿病 2型 紫单胞菌 龈 基因型 Diabetes mellitus type 2
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排龈术用于楔状缺损修复后牙周状况评价 被引量：11
2
作者 杨卫江 施更生 +3 位作者 梁利荣 阮方超 高慧娟 童永青 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期353-354,共2页
目的评估排龈术用于楔状缺损修复后患牙的牙周状况。方法选择楔状缺损下颌双尖牙138颗,分成 A、B 两组,A 组排龈后再用单组分光固化复合体(Dyract)充填,B 组直接 Dyract充填,于术前、术后1周、1个月、3个月、6个月分别以菌斑指数、牙龈... 目的评估排龈术用于楔状缺损修复后患牙的牙周状况。方法选择楔状缺损下颌双尖牙138颗,分成 A、B 两组,A 组排龈后再用单组分光固化复合体(Dyract)充填,B 组直接 Dyract充填,于术前、术后1周、1个月、3个月、6个月分别以菌斑指数、牙龈指数、龈沟出血指数、牙周探诊深度、龈沟液量及龈沟液中天冬氨酸转氨酶水平为指标,评估楔状缺损修复后的牙周状况。结果术前、术后1周及1个月 A、B 两组所有指标差异均无统计学意义(P>0.05);术后3个月及6个月 A、B 两组菌斑指数、牙龈指数、龈沟出血指数、牙周探诊深度差异无统计学意义(P>0.05),而龈沟液量、龈沟液中天冬氨酸转氨酶水平差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论排龈术用于楔状缺损修复能减少牙周损伤,获得较好的远期疗效。 展开更多
关键词 龈 牙修复 永久 牙周指数
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牙龈卟啉单胞菌菌毛致病机制的研究进展 被引量：10
3
作者 杜留熠 孙晓琳 +3 位作者 于维先 任静宜 顾芯铭 周延民 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期703-707,共5页
FimA蛋白是牙龈卟啉单胞菌的重要毒力因子,在牙龈卟啉单胞菌黏附和入侵宿主细胞,促进牙菌斑生物膜形成以及引起宿主免疫炎症反应的过程中发挥重要作用,与牙周病和心血管疾病的发生和发展密切相关.根据编码FimA蛋白的fimA基因核苷酸序列... FimA蛋白是牙龈卟啉单胞菌的重要毒力因子,在牙龈卟啉单胞菌黏附和入侵宿主细胞,促进牙菌斑生物膜形成以及引起宿主免疫炎症反应的过程中发挥重要作用,与牙周病和心血管疾病的发生和发展密切相关.根据编码FimA蛋白的fimA基因核苷酸序列的不同可将牙龈卟啉单胞菌分为Ⅰ、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型共6种基因型.FimA的表达受fimA基因的调控,不同fimA基因型菌毛的致病作用有一定差异.本文就牙龈卟啉单胞菌菌毛相关致病机制的研究进展进行综述. 展开更多
关键词 紫单胞菌 龈 纤毛 细菌 牙周炎 动脉粥样硬化 fimA基因
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牙龈卟啉单胞菌不同毒力株基因差异的比较研究 被引量：8
4
作者 林莉 潘亚萍 李琛 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期734-738,共5页
目的比较牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pgingivalis）高毒力株W83与低毒力株标准参考菌ATCC 33277之间的差异基因。方法采用抑制消减杂交技术（SHH）对比牙龈卟啉单胞菌高毒力株W83与低毒力株标准参考菌ATCC 33277的基因... 目的比较牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pgingivalis）高毒力株W83与低毒力株标准参考菌ATCC 33277之间的差异基因。方法采用抑制消减杂交技术（SHH）对比牙龈卟啉单胞菌高毒力株W83与低毒力株标准参考菌ATCC 33277的基因差异。以高毒力株W83为被检菌，低毒力株ATCC 33277为参考菌，将提取的基因组DNA用内切酶Rsa Ⅰ酶切，连接特殊设计的接头进行两次消减杂交和PCR扩增，得到消减混合物，与TA克隆载体连接，转化到JM109中，建立消减文库，经PCR筛选鉴定阳性克隆，进而对部分片段进行测序和同源分析。结果经SSH筛选鉴定得到36个片段大小为88～372bp的阳性克隆基因片段。结论从全基因角度研究牙龈卟啉单胞菌高毒力株W83与标准株ATCC 33277之间的分子遗传差异，为牙龈卟啉单胞菌致病基因的筛选及今后牙周病预防、诊治的靶标提供依据。 展开更多
关键词 紫单胞菌 龈 杂交 基因
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动脉粥样硬化斑块中牙周可疑致病微生物的检测 被引量：9
5
作者 安娜 欧阳翔英 韩蔚 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期33-36,共4页
目的:检测动脉粥样硬化斑块中是否存在牙周致病菌。方法:共选取在手术过程中剥离的、已有动脉粥样硬化改变的动脉内膜标本10例,采用PCR扩增16S rDNA(16S ribosomal DNA)片段的方法,检测7种牙周可疑致病菌,包括牙龈卟啉单胞菌(Porphyromo... 目的:检测动脉粥样硬化斑块中是否存在牙周致病菌。方法:共选取在手术过程中剥离的、已有动脉粥样硬化改变的动脉内膜标本10例,采用PCR扩增16S rDNA(16S ribosomal DNA)片段的方法,检测7种牙周可疑致病菌,包括牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、福赛坦菌(Tannerella forsythia,Tf)、伴放线聚生杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans,Aa)、中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi)、变黑普氏菌(Prevotella nigrescen,Pn)、牙密螺旋体(Treponema denticola,Td)及直肠弯曲菌(Campylobacter rectus,Cr)。结果:10例标本中有3例检测出了牙周可疑致病菌,3例样本均检出了Pg,这3例中有1例同时检出了Tf,另1例同时检出了Pn;其余7例标本未检出相关牙周致病菌。结论:动脉粥样硬化斑块样本中检出了部分牙周可疑致病菌,为牙周炎与动脉粥样硬化之间可能存在联系提供了初步证据。 展开更多
关键词 牙周炎 动脉粥样硬化 紫单胞菌 龈 DNA 细菌
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原发性根尖周炎感染根管内牙龈卟啉单胞菌fimA与kgp基因型组合的研究 被引量：8
6
作者 漆正楠 沈妙莲 +3 位作者 唐子圣 王畅 毛骁俊 诸晓丹 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期20-25,共6页
目的 探寻原发性根尖周炎感染根管内牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg） fimA与kgp基因多态性分布及常见的基因型组合,为筛选Pg毒力株提供依据.方法 从上海交通大学医学院附属第九人民医院牙体牙髓科2013年6月至2015年9月... 目的 探寻原发性根尖周炎感染根管内牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg） fimA与kgp基因多态性分布及常见的基因型组合,为筛选Pg毒力株提供依据.方法 从上海交通大学医学院附属第九人民医院牙体牙髓科2013年6月至2015年9月间采集的原发性根尖周炎感染根管样本中筛选34例Pg阳性样本,利用专性引物进行fimA基因扩增分型,同时采用MseⅠ内切酶进行kgp酶切分型.统计fimA与kgp各基因型检出率与常见基因型组合,并通过Pearson χ2检验法分析基因型组合与临床症状的相关性.运用激光扫描共聚焦显微镜观察比较携带不同基因型组合的Pg生物膜结构差异.结果34例Pg阳性样本中,fimAⅡ型检出率最高[47%（16/34）],其次为fimAⅠ型[26%（9/34）], fimAⅤ型仅检出1例,kgpⅠ型的检出率[56%（19/34）]略高于Ⅱ型[44%（15/34）].其中,fimAⅡ型＋kgpⅠ型和fimAⅡ型＋kgpⅡ型是最常见的2种基因型组合,检出率均为24%（8/34）.特定基因型组合的检出与牙龈肿胀、牙源性窦道无显著相关性（P＆gt;0.05）.从样本中分离获得3株携带不同基因型组合的Pg,其分离株A（fimAⅠ型＋kgpⅠ型）形成的生物膜最致密,分离株C（fimAⅤ型＋kgpⅠ型）形成的生物膜较疏松,分离株B（fimAⅢ型＋kgpⅡ型）介于两者之间.结论 原发性根尖周炎感染根管内Pg以fimAⅡ型为主,kgpⅠ型略多于kgpⅡ型,fimAⅡ型＋kgpⅠ型与fimAⅡ型＋kgpⅡ型是常见的两种基因型组合;不同基因型组合可能导致Pg生物膜结构存在差异. 展开更多
关键词 紫单胞菌 龈 根尖周炎 菌毛蛋白质类 基因多态性 牙龈素
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纤维蛋白原对牙龈卟啉单胞菌黏附口腔上皮细胞的影响 被引量：7
7
作者 葛颂 吴亚菲 +2 位作者 刘天佳 赵蕾 费晓露 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期69-72,共4页
目的探讨血浆蛋白成分纤维蛋白原(Fg)在牙周病发病机制中的作用。方法体外培养口腔上皮细胞系KB细胞至单层融合,分别与不同浓度Fg溶液共同孵育,并加入以3H-胸腺嘧啶核苷标记的牙龈卟啉单胞菌(Pg)行细菌感染攻击细胞实验。采用同位素闪... 目的探讨血浆蛋白成分纤维蛋白原(Fg)在牙周病发病机制中的作用。方法体外培养口腔上皮细胞系KB细胞至单层融合,分别与不同浓度Fg溶液共同孵育,并加入以3H-胸腺嘧啶核苷标记的牙龈卟啉单胞菌(Pg)行细菌感染攻击细胞实验。采用同位素闪烁光谱测定法检测黏附和内化于KB细胞的Pg数量。结果加入Fg的各实验组黏附和内化细菌量及细菌黏附和内化率均显著高于未加入Fg的对照组;不同Fg浓度的各组间黏附和内化细菌量及黏附和内化率差异亦有统计学意义,随着Fg浓度的升高,黏附和内化的细菌量显著增加。结论纤维蛋白原可促进Pg黏附于口腔上皮细胞,在牙周病的发生、发展中可能具有一定的病理学作用。 展开更多
关键词 纤维蛋白原 紫单胞菌 龈 细菌黏附 牙周病学
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63颗前牙金属烤瓷冠粘戴后基牙游离龈变色的临床观察 被引量：5
8
作者 郑峰 齐喜山 鲍修峰 《中日友好医院学报》 1997年第3期249-251,共3页
目的：了解前牙金属烤瓷冠粘戴后基牙游离龈变色的特点。方法：肉眼观察６３颗前牙在修复前后游离龈的色泽变化。结果：修复前１２颗死髓变色基牙游离龈轻度变色。修复后，２３颗活髓基牙游离龈轻度变色，其中包括９颗用瓷肩台形式金属... 目的：了解前牙金属烤瓷冠粘戴后基牙游离龈变色的特点。方法：肉眼观察６３颗前牙在修复前后游离龈的色泽变化。结果：修复前１２颗死髓变色基牙游离龈轻度变色。修复后，２３颗活髓基牙游离龈轻度变色，其中包括９颗用瓷肩台形式金属烤瓷冠修复的基牙、４颗游离龈重度变色；１１颗死髓基牙游离龈轻度变色，２５颗游离龈重度变色，１２颗死髓变色基牙均为重度变色。结论：由于游离龈的光透过性及金属基底冠对牙根的阻光作用，基牙游离龈变色是一种不可避免的可逆光学现象。死髓变色基牙游离龈变色较重，瓷肩台形式的金属烤瓷冠有助于减轻这种游离龈变色。 展开更多
关键词 牙疾病 烤瓷学 龈
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复方氯已定含漱液对牙龈炎与菌斑的疗效观察 被引量：8
9
作者 徐晓慧 《海南医学院学报》 CAS 2007年第1期38-39,共2页
目的:研究复方氯已定含漱液对牙龈炎与菌斑的临床效果。方法:随机抽取临床确诊为慢性牙龈炎患者250例,分为3个实验组,即复方氯已定含漱液、呋喃西林液、蒸馏水组。用药前后检查牙龈炎指数(GI)、牙龈出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)作为观... 目的:研究复方氯已定含漱液对牙龈炎与菌斑的临床效果。方法:随机抽取临床确诊为慢性牙龈炎患者250例,分为3个实验组,即复方氯已定含漱液、呋喃西林液、蒸馏水组。用药前后检查牙龈炎指数(GI)、牙龈出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)作为观察指标。结果:用药后复方氯已定含漱液组PLI、GI、SBI均较用药前明显下降,对慢性牙龈炎的有效率达98.3%,同呋喃西林、蒸馏水组比较有高度显著性差异(P<0.01)。结论:复方氯已定含漱能有效控制菌斑和牙龈炎。 展开更多
关键词 牙 龈 牙菌斑 复方氯已定
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长春市某小学7～12岁儿童牙周致病菌分布状态调查 被引量：8
10
作者 倪雪岩 伊田博 +3 位作者 铃木基之 吕亚林 魏秀峰 井上美津子 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期75-79,共5页
目的应用聚合酶链反应（PCR）法对儿童口腔内牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）、伴放线放线杆菌（Actinobacillus actinomycetemcomitans，Aa）分布状态进行检测，探讨检出结果与牙周临床指标之间的关系。方法选取长春... 目的应用聚合酶链反应（PCR）法对儿童口腔内牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）、伴放线放线杆菌（Actinobacillus actinomycetemcomitans，Aa）分布状态进行检测，探讨检出结果与牙周临床指标之间的关系。方法选取长春市自强小学151名7至12岁儿童为研究对象，选择右上颌中切牙唇面和右上颌第一磨牙颊面为被检部位，取龈上菌斑、记录探诊出血（bleeding on probing，BOP）、探诊深度（probing depth，PD）、牙龈指数（gingival index，GI），应用PCR法对两菌种进行检测。结果①儿童龈上菌斑中魄、Aa检出率为27．6％、54．3％；②6 颊面％、Aa的检出率（40．0％、57．9％）均高于1 唇面（15．5％、50．7％），Pg检出率差异有统计学意义（P〈0．01），且与BOP、PD、GI呈正相关；③Pg检出率随年龄增长呈逐渐增高趋势，Aa检出率在11—12岁组最高，其次为7—8岁组和9～10岁组；④BOP阳性部位Pg、Aa检出率（38．3％、65．4％）均高于BOP阴性部位（23．2％、50．5％），P〈0．05。在BOP阳性部位，随PD加深取检出率逐渐增高，特别是在PD≥4mm时，Pg检出率明显增高（P〈0．05），显示％检出率与BOP阳性、PD增加呈正相关。结论7—12岁儿童龈上菌斑中高频度分布着赡、Aa；上颌前牙区与磨牙区菌丛构成不同，％在磨牙区定植更早；两菌种检出率随年龄增长而增加，且与牙周临床指标密切相关，儿童早期采取牙周病的预防措施是非常必要的。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 紫单胞菌 龈 放线杆菌 伴放射菌 牙周致病菌
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NALP3炎性体在牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激RAW264.7细胞中的作用 被引量：7
11
作者 杨芳 陈明月 +1 位作者 胡英英 汪昌宁 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期289-293,共5页
目的 研究NALP3（NACHT-LRR-PYD结构域蛋白3）炎性体在牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）脂多糖刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞中调控炎症因子的作用.方法 对RAW264.7细胞常规培养并平均分为3组,每组4×105个细胞：A... 目的 研究NALP3（NACHT-LRR-PYD结构域蛋白3）炎性体在牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）脂多糖刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞中调控炎症因子的作用.方法 对RAW264.7细胞常规培养并平均分为3组,每组4×105个细胞：A组为对照组（细胞未处理）;B组为1 mg/L Pg脂多糖刺激组;C组为胱天蛋白酶1抑制剂（AC-YVAD-CMK）预处理＋1 mg/L Pg脂多糖刺激组.C组RAW264.7细胞采用连续稀释（5、10、25、50、75、100、200μmol/L）的AC-YVAD-CMK预处理2 h,随后Pg脂多糖（1 mg/L）孵育24 h,通过细胞计数试剂盒检测细胞生存率.采用实时荧光定量PCR检测3组RAW264.7细胞6 h后NALP3和白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）基因转录水平;蛋白质印迹法和酶联免疫吸附测定法检测3组细胞24 h后上述两种蛋白的表达.结果 不同浓度（0、5、10、25、50、75、100、200μmol/L）AC-YVAD-CMK处理RAW264.7细胞对细胞活力无明显影响;实时荧光定量PCR结果显示,A、B、C组IL-1βmRNA表达分别为1.03±0.08、5.48±0.22和4.31±0.20;NALP3 mRNA分别为0.96±0.05、2.62±0.44、1.73±0.09;蛋白质印迹法结果显示,A、B、C组NALP3蛋白的表达量分别为1.00±0.10、2.34±0.04、1.64±0.04;酶联免疫吸附测定结果显示,A、B、C组IL-1β的分泌值分别为（40.20±0.25）、（61.50±1.81）、（52.40±1.91）ng/L.在Pg脂多糖刺激下,IL-1β基因和蛋白表达显著增加（P〈0.01,P〈0.01）,同时NALP3基因和蛋白表达显著升高（P〈0.01,P〈0.01）;运用AC-YVAD-CMK预处理后IL-1β基因表达和蛋白质合成显著减少（P=0.002,P=0.027）,NALP3基因表达和蛋白质合成显著降低（P〈0.01,P〈0.01）.结论 Pg脂多糖可激活RAW264.7细胞中NALP3炎性体信号通路,阻断该通路可以抑制炎症因子分泌. 展开更多
关键词 牙周炎 紫单胞菌 龈 脂多糖类
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不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌对人脐静脉内皮细胞产生血管细胞黏附分子1和细胞间黏附分子1的影响 被引量：7
12
作者 蔡树玉 林玉祥 +3 位作者 肖莉 何权敏 葛颂 钱民章 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期332-337,共6页
目的观察不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonasgin givalis，Pg）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）产生血管细胞黏附分子l（vasclllar celladhesion molecule-1，VCAM-1）和细胞间黏附分子... 目的观察不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonasgin givalis，Pg）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）产生血管细胞黏附分子l（vasclllar celladhesion molecule-1，VCAM-1）和细胞间黏附分子l（intercellul aradhesion molecule．1，ICAM-1）的影响，探讨Pg在动脉粥样硬化发生、发展中的可能作用。方法实验分别以PgATCC33277（IfimA）、WCSPll5（IIr^nA）、W83（1VnmA）和大肠杆菌脂多糖刺激HUVEC作为T1、他、T3组（3个实验组）和阳性对照组，未受刺激的HUVEC作为阴性对照组；标准条件下厌氧培养上述3型Pg，将其以及大肠杆菌脂多糖分别与HUVEC共同孵育2、6、24h，采用流式细胞术检测HUVEC表面ICAM-l和VCAM-1的蛋白表达量，并通过激光共聚焦显微镜观察ICAM．1和VCAM-1的表达分布情况。结果I、Ⅱ、1VfimA型Pg刺激HUVEC后，细胞表面ICAM-1表达均增强（P〈0．05），2、6、24h表达量分别为IfimA：60．27±5．43、80．81±1．44、85．94±2．56；IIfimA：86．69±8．81、90．19±0．00、96．18±0．48，IVfimA：59．66±O．40、85．79±4．86、96．044-2．07。除2h时IfimA与IVfimA型如刺激的HUVEC表面ICAM-1表达量差异无统计学意义外，其他各时问点Ⅱ、IVfimA型Pg的刺激作用均强于IfimA型Pg（P〈0．05）。本研究条件下，I、Ⅱ、IVfimA型Pg刺激HUVEC后2、6、24h表达VCAM-1的水平均较低，各实验组与对照组间相比差异均无统计学意义（P〉0．05）。激光共聚焦显微镜观察显示，Pg刺激下HUVEC表达ICAM-1和VCAM-1增加，在Ⅱ、IVfimA型Pg刺激下，HUVEC中ICAM．1和VCAM-1荧光点相对较多且分布范围广。结论牙周主要致病菌Pg毒力和致病性与其fimA基因型相关，IIfimA和iVfimA型Pg有较强的上调HUVEC表达细胞黏附分子的能力，可能导致血管内皮功能紊乱。 展开更多
关键词 紫单胞菌 龈 基因型 内皮细胞 血管细胞黏附分子1 细胞间黏附分子1
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牙龈卟啉单胞菌脂多糖通过髓样细胞触发受体-1调控巨噬细胞极化状态的研究 被引量：6
13
作者 刘琳 杨芸 +2 位作者 周婕妤 吴亚菲 赵蕾 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期175-181,共7页
目的探究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激巨噬细胞后,髓样细胞触发受体-1(triggering receptors expressed on myeloid cells-1,TREM-1)表达与M1、M2型极化的关系,进一步探讨巨噬细胞TR... 目的探究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激巨噬细胞后,髓样细胞触发受体-1(triggering receptors expressed on myeloid cells-1,TREM-1)表达与M1、M2型极化的关系,进一步探讨巨噬细胞TREM-1在牙周炎发生发展中的作用机制。方法使用豆蔻酰佛波醇乙酯诱导人单核细胞系THP-1分化为巨噬细胞,予以0(空白对照组)和1μg/ml的Pg-LPS(LPS组)刺激,同期加入终质量浓度为0.1μg/ml的TREM-1抑制剂LP17(LPS+LP17组)或对照肽(LPS+对照肽组),培养24 h后用实时荧光定量PCR(real-time quantitative-PCR,RT-qPCR)检测TREM-1和巨噬细胞M1、M2型极化标志物(分别为CD86、CD206)及其极化相关细胞因子[分别为肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-10]mRNA表达变化,蛋白质印迹法检测TREM-1、CD86、CD206蛋白含量,酶联免疫吸附测定法检测巨噬细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β及IL-10的表达。结果细胞培养24 h后,LPS组巨噬细胞中TREM-1相对mRNA表达量(1.40±0.14)及蛋白表达量(3.85±0.24)均较空白对照组(分别为1.01±0.18、1.00±0.05)显著升高(P<0.05),同时M1型极化标志物CD86 mRNA及蛋白表达(分别为1.42±0.01、1.55±0.07)均较空白对照组(分别为1.00±0.09、1.00±0.10)显著上调(P<0.01),且M1型极化相关细胞因子TNF-α、IL-1βmRNA及蛋白表达量均显著增加(P<0.05);加入TREM-1阻断剂LP17后,与LPS组相比,TREM-1 mRNA及蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05),CD86 mRNA(0.96±0.00)和蛋白(1.36±0.02)表达水平均显著下降(P<0.05),TNF-α、IL-1βmRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。对于M2型极化标志物CD206及极化相关细胞因子IL-10,细胞培养24 h后,CD206 mRNA(0.56±0.05)及蛋白表达(0.25±0.04)均较空白对照组(分别为1.02±0.25、1.00±0.10)显著下调(P<0.01),IL-10 mRNA较空白对照组表达显著上调(P<0.05),其蛋白表达水平与空白对照组相比差异无统� 展开更多
关键词 牙周炎 紫单胞菌 龈 髓样细胞触发受体‑1 巨噬细胞 极化
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不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌刺激牙龈成纤维细胞后单核细胞趋化蛋白1的表达 被引量：6
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作者 赵蕾 吴亚菲 +2 位作者 欧阳玉玲 张静宜 陈斌 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期269-272,共4页
目的比较不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，PS）刺激下人牙龈成纤维细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA和蛋白的表达水平，比较不同fimA基因型Pg毒力和致病性的差异。方法PsATCC33277（Ⅰ型，T1组），WCSP115（Ⅱ型，... 目的比较不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，PS）刺激下人牙龈成纤维细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA和蛋白的表达水平，比较不同fimA基因型Pg毒力和致病性的差异。方法PsATCC33277（Ⅰ型，T1组），WCSP115（Ⅱ型，他组），WCSP1．5（Ⅲ型，T3组），W83（Ⅳ型，T4组）分别与牙龈成纤维细胞在标准条件下共同孵育，对照组加入2ml达尔伯克氏改良伊格尔培养基，每组3孔。分别于孵育后1、3、6和12h收集细胞和上清液，应用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和ELISA法分别检测牙龈成纤维细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA和蛋白的动态表达。结果与对照组比较，各fimA型Pg刺激下牙龈成纤维细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA和蛋白水平的表达量均明显上调（P〈0．05）；其中他组Pg的刺激作用强于其他各型，不同时间点单核细胞趋化蛋白1mRNA相对表达量分别为（25．75±3．12）～（326．69±35．35），蛋白分泌水平为（178．20±46．20）～（443．46±82．19）ng／L；而乃组Pg弱于其他各型，单核细胞趋化蛋白1mRNA相对表达量为（4．16±0．82）～（94．17±18．56），蛋白分泌水平为（86．95±23．90）～（264．01±28．59）ng／L，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Pg可诱导牙龈成纤维细胞mRNA和蛋白水平过表达单核细胞趋化蛋白1，提示fimA基因型的不同可能与Pg的毒力和致病性存在相关性。 展开更多
关键词 紫单胞菌 龈 基因型 成纤维细胞 趋化因子CCL2
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牙周炎患者基础治疗后牙龈卟啉单胞菌的定植研究 被引量：6
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作者 刘静波 林莉 +2 位作者 潘亚萍 汪贯华 李琛 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期478-482,共5页
目的通过对牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）的检测，探讨慢性牙周炎（chronic periodontitis，CP）和侵袭性牙周炎（aggressive periodontitis，AgP）患者牙周基础治疗后Pg的定植规律。方法选取90... 目的通过对牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）的检测，探讨慢性牙周炎（chronic periodontitis，CP）和侵袭性牙周炎（aggressive periodontitis，AgP）患者牙周基础治疗后Pg的定植规律。方法选取90例CP患者和90例AgP患者，在牙周基础治疗前、治疗后6周、12周共采集龈下菌斑样本1620个，运用AmpliFluor终末点定量聚合酶链反应方法检测赡含量。结果治疗后6周CP和AgP组Pg活动位点分别为61（22．6％）和66（24．4％）个，两者差异无统计学意义（P〉0．05）；治疗后6周赡活动位点在治疗前检测的牙周临床指数高于赡静止位点。治疗后12周两组Pg活动位点分别为96（35．6％）和18（6．7％）个，差异有统计学意义（P〈0．05）；治疗后12周赡活动位点在治疗后6周时检测的牙周临床指数高于赡静止位点。结论在牙周基础治疗后6周时，CP和AgP患者赡定植均已开始，但是两组定植规律存在一定差异。在牙周基础治疗后，治疗前牙周组织炎性反应严重的龈下位点赡易于定植。 展开更多
关键词 紫单胞菌 龈 牙周炎 牙周基础治疗
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高糖对牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激人成纤维细胞分泌炎症因子的影响 被引量：6
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作者 蒋少云 魏丛丛 +3 位作者 薛栋 邓嘉胤 连琪 董允允 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期737-741,共5页
目的 探讨高浓度葡萄糖对牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）脂多糖刺激人牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblasts,HGF）分泌炎症细胞因子的影响及作用机制,进一步探讨糖尿病与牙周炎的相互关系.方法 组织块法培养HGF... 目的 探讨高浓度葡萄糖对牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）脂多糖刺激人牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblasts,HGF）分泌炎症细胞因子的影响及作用机制,进一步探讨糖尿病与牙周炎的相互关系.方法 组织块法培养HGF,细胞处理分为以下4组：A组：低糖（5.5 mmol/L葡萄糖）＋1 mg/L Pg脂多糖刺激组;B组：低糖＋10 mg/L Pg脂多糖刺激组;C组：高糖（25 mmol/L葡萄糖）＋1 mg/L Pg脂多糖刺激组;D组：高糖＋10 mg/L Pg脂多糖刺激组.采用酶联免疫法检测4组HGF细胞6、12h后分泌肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）的变化,实时定量PCR检测Toll样受体（toll-like receptor,TLR）2和TLR4在HGF中的表达.在高糖＋10 mg/L Pg脂多糖组采用抗TLR2、抗TLR4单克隆抗体预先处理HGF,检测HGF中12h的TNF-α、IL-1β水平,以高糖＋10 mg/L Pg脂多糖刺激组为对照组,并进行统计学分析.结果 相同质量浓度的Pg脂多糖刺激HGF 6、12h后高糖条件（C组、D组）下TNF-α及IL-1β分泌及TLR2 mRNA的表达均较低糖条件下（A组、B组）显著升高（P值均＜0.01）,TLR4 mRNA的表达C组与A组相比表达升高,但差异无统计学意义（P＞0.05）;D组显著高于B组（P＜0.01）.高糖＋10 mg/L Pg脂多糖刺激组中分别阻断TLR2、4后,TNF-α的分泌量分别为（297.16± 11.49）、（390.01±12.81） ng/L,均显著低于对照组[（459.80±8.04） ng/L]（F=166.02,P＜0.01）,IL-1β的分泌量分别为（49.90±4.08）、（99.35±5.01） ng/L,亦均显著低于对照组[（147.37±9.87） ng/L]（F=153.51,P＜0.000 1）.结论 高糖可明显促进Pg脂多糖刺激HGF后炎症细胞因子的分泌,其作用可能通过调节HGF表面TLR2和TLR4的表达来实现,在一定程度上证实糖尿病患者血糖升高可加重牙周炎症. 展开更多
关键词 紫单胞菌 龈 脂多糖类 牙周炎 肿瘤坏死因子α 白细胞介素1Β
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钛种植体载抗菌肽涂层的抗菌性及其对成骨细胞活性的影响 被引量：6
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作者 孙丰权 李慕勤 +3 位作者 彭书浩 张慧明 刘苗 曲学延 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期419-424,共6页
目的探讨钛种植体表面载抗菌肽涂层对牙龈卟啉单胞菌的抗菌性及其对成骨细胞黏附、增殖的影响，为构建具有抗菌功能及良好生物活性的口腔种植体功能性生物涂层提供依据。方法纯钛试件经超声微弧氧化、碱处理、硅烷化处理后，分别加入0.2... 目的探讨钛种植体表面载抗菌肽涂层对牙龈卟啉单胞菌的抗菌性及其对成骨细胞黏附、增殖的影响，为构建具有抗菌功能及良好生物活性的口腔种植体功能性生物涂层提供依据。方法纯钛试件经超声微弧氧化、碱处理、硅烷化处理后，分别加入0.25、0.50、0.75 g/L抗菌肽Pac-525得到3组抗菌肽组试件，对照组钛试件仅进行超声微弧氧化、碱处理和硅烷化处理（每组样本量均为45）。用扫描电镜及能谱分析仪观察各组涂层形貌并分析元素变化，吖定橙-溴化乙锭双染色检测各组试件与牙龈卟啉单胞菌共培养72 h后的活菌平均百分比和生物膜厚度，细胞计数试剂盒检测成骨细胞增殖情况，免疫荧光染色观察成骨细胞黏附数量及生长形态。结果扫描电镜观察可见抗菌肽颗粒嵌入涂层表面的微孔中，各抗菌肽组C、N元素均明显多于对照组；对照组、0.25、0.50、0.75 g/L抗菌肽组的活菌平均百分比分别为0.58%、0.45%、0.34%和0.28%，各组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。0.50和0.75 g/L抗菌肽组牙龈卟啉单胞菌的生物膜厚度[分别为（98.3±1.2）和（94.5±2.5）μm]均显著小于对照组和0.25 g/L抗菌肽组[分别为（117.6±1.5）和（118.0±1.3）μm]（P〈0.05）；各抗菌肽组成骨细胞的黏附和增殖数量均显著大于对照组（P〈0.05），且细胞铺展较好。结论钛种植体载抗菌肽涂层可阻碍细菌生物膜生成，有较好的抗菌性且具有促进成骨细胞黏附及增殖的作用。 展开更多
关键词 牙种植体 抗菌肽类 紫单胞菌 龈 微弧氧化
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唾液富组蛋白5抑制牙龈卟啉单胞菌与具核梭杆菌共聚的初步研究 被引量：5
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作者 王宏岩 刘荩文 +3 位作者 李倩 谭丽思 林莉 潘亚萍 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期150-156,共7页
目的研究唾液富组蛋白5抑制牙龈卟啉单胞菌与具核梭杆菌共聚的能力并进行初步的机制分析，以期揭示富组蛋白5在抑制慢性牙周炎发生过程中的作用。方法收集49例就诊于中国医科大学口腔医学院牙周科的慢性牙周炎患者（慢性牙周炎组）和27... 目的研究唾液富组蛋白5抑制牙龈卟啉单胞菌与具核梭杆菌共聚的能力并进行初步的机制分析，以期揭示富组蛋白5在抑制慢性牙周炎发生过程中的作用。方法收集49例就诊于中国医科大学口腔医学院牙周科的慢性牙周炎患者（慢性牙周炎组）和27名牙周健康者（牙周健康组）的唾液及龈上、龈下菌斑，采用酶联免疫吸附测定试剂盒检测唾液中富组蛋白5的含量，实时荧光定量PCR（绝对定量）检测龈上、龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）、具核梭杆菌（Fusobacteri umnucleatum，Fn）和总细菌的DNA拷贝数；采用黏附实验和扫描电镜分别检测25mg／L富组蛋白5对Pg-Pg、Pg-Fn共聚的影响；实时荧光定量PCR（相对定量）技术检测25mg／L富组蛋白5对Pg血凝素基因、精氨酸牙龈素基因及FnFomA基因表达的影响。实验组（加入25mg／L富组蛋白5）与对照组（未加入富组蛋白5）之间差异的比较采用独立样本t检验，以双侧P〈0．05为差异有统计学意义。结果慢性牙周炎组唾液富组蛋白5与龈上菌斑中Fn、Pg均呈负相关关系（r=-0．379，r=-0．624）；与龈下菌斑中的Fn、Pg也均呈负相关关系（r=-0．404，r=-0．314）。牙周健康组富组蛋白5仅与龈上、龈下菌斑中的如呈负相关关系（r=-0．572，r=-0．533）。25mg／L的富组蛋白5能抑制Pg-Pg及Pg—Fn的共聚；实时荧光定量PCR（相对定量）结果显示，唾液富组蛋白5使Pg血凝素基因表达升高（14．52±3．25）倍，使Fn FomA基因表达下降至原来的（0．22±0．10）。结论唾液富组蛋白5可能通过调节Pg血凝素基因、Fn FomA基因的表达抑制Pg-Pg和Pg—Fn的共聚。 展开更多
关键词 富组蛋白质类 紫单胞菌 龈 梭杆菌 具核 基因表达 细菌共聚
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牙龈卟啉单胞菌血凝素2与氯化血红素结合多肽的序列分析 被引量：5
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作者 杨秋波 余飞燕 杨圣辉 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期538-542,共5页
目的明确牙龈卟啉单胞菌血凝素2（Porphyromonas gingivalis hemagglutinin-2，PgHA-2）与氯化血红素结合的多肽片段氨基酸序列，为牙周病保护性抗体的制备奠定基础。方法提取Pg ATCC33277基因组DNA，原核克隆重组表达HA-2，质粒测序，... 目的明确牙龈卟啉单胞菌血凝素2（Porphyromonas gingivalis hemagglutinin-2，PgHA-2）与氯化血红素结合的多肽片段氨基酸序列，为牙周病保护性抗体的制备奠定基础。方法提取Pg ATCC33277基因组DNA，原核克隆重组表达HA-2，质粒测序，蛋白质印迹法及质谱分析法鉴定重组HA-2（recombinant HA-2，rHA-2）。利用氯化血红素琼脂糖珠验证rHA-2的氯化血红素结合功能。利用多肽内切酶水解与氯化血红素结合的rHA-2，获得与氯化血红素结合的多肽片段，质谱分析多肽片段的氨基酸序列。结果PCR鉴定、质粒测序、蛋白质印迹法及质谱分析结果均证实原核表达蛋白为Pg的HA-2。氯化血红素结合实验明确了rHA-2具有与氯化血红素结合的功能。质谱分析与氯化血红素结合的多肽片段的氨基酸序列为DHYAVMISKTGTNAG。结论成功基因克隆重组与原核表达了具有与氯化血红素结合功能的PgHA-2，明确了与氯化血红素结合的多肽片段的氨基酸序列，为针对Pg的牙周病免疫预防和治疗药物的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 紫单胞菌 龈 血凝素类 序列分析 蛋白质 细菌生长
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应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术筛选牙龈卟啉单胞菌共同外膜蛋白 被引量：5
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作者 李昂 孙俊毅 +3 位作者 孙媛媛 石建峰 饶国洲 苟建重 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期614-618,共5页
目的 应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS）技术筛选多种牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）共同外膜蛋白（outer membr... 目的 应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS）技术筛选多种牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）共同外膜蛋白（outer membrane protein,OMP）,为针对多种Pg设计具有交叉保护作用的疫苗提供候选靶抗原.方法 应用超速离心法提取PgATCC33277、Pgw83、Pg301和Pg381菌株外膜蛋白,SELDI疏水性蛋白芯片H50检测OMP,Biomarker Wizard软件分析4种菌株OMP质谱图.结果 OMP质谱图显示,PgATCC33277、PgW83、Pg301和Pg381分别有71、74、76和72个蛋白质峰,并存在13种共同OMP 在美国国立生物信息中心蛋白库中鉴定到一种已知蛋白gil116636495,其功能尚不清楚.结论 发现13种共同OMP可作为牙周病疫苗候选抗原,证实基于SELDI-TOF-MS技术适合检测小相对分子质量（＜20000）、低丰度、疏水性蛋白,且操作简单、重复性好,可用于大规模寻找Pg的共同OMP. 展开更多
关键词 紫单胞菌 龈 细菌外膜蛋白质类 表面增强激光解吸电离飞行时间质谱
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