为进一步探讨旋毛虫海藻糖酶(Trehalase of Trichinella spiralis,TsTRE)蛋白对BALB/c小鼠的免疫保护作用,本研究将TsTRE蛋白进行Western-blot分析,并使用该蛋白对BALB/c小鼠进行3次免疫,然后分别感染50条和200条肌幼虫,从免疫前到攻虫...为进一步探讨旋毛虫海藻糖酶(Trehalase of Trichinella spiralis,TsTRE)蛋白对BALB/c小鼠的免疫保护作用,本研究将TsTRE蛋白进行Western-blot分析,并使用该蛋白对BALB/c小鼠进行3次免疫,然后分别感染50条和200条肌幼虫,从免疫前到攻虫试验结束,每周采集一次血清,且在攻虫后第7天和第42天分别计算成虫与肌幼虫减虫率。利用流式细胞术检测表达CD4+T淋巴细胞和表达CD8+T淋巴细胞比例及吞噬能力,利用CCK-8检测淋巴细胞增殖能力,利用ELISA抗体试剂盒检测血清中特异性抗体(IgG、IgG1和IgG2a)、Th1型细胞因子(IFN-γ、IL-2)及Th2型细胞因子(IL-4和IL-10)的水平。Western-blot结果显示,TsTRE蛋白可与小鼠感染旋毛虫的血清发生特异性结合;与PBS对照组相比,表达CD4+T细胞比例升高,而表达CD8+T细胞比例降低,差异均显著(P<0.05);脾淋巴细胞吞噬能力和增殖能力均加强,差异显著(P<0.05)。此外,ELISA方法检测结果显示,特异性抗体水平均极显著增长,且IgG1水平高于IgG2a水平;Th1/Th2型细胞因子水平均显增长趋势,且Th1型细胞因子水平在攻虫后第7天达到最高峰,Th2型细胞因子水平在攻虫后第14天达到最高峰。TsTRE(500)和TsTRE(2000)攻虫组的小鼠成虫与肌幼虫减虫率分别为46.32%、51.19%、40.49%和42.37%。以上结果表明,TsTRE蛋白可诱导小鼠细胞/体液免疫应答,该反应是前期以Th1为主导,后期以Th2为主导的Th1/Th2混合型免疫。以TsTRE为免疫原的疫苗具有一定的减虫作用,该蛋白有望成为疫苗研究新靶点,这为后续预防旋毛虫病提供基础数据。展开更多
根据GenBank中旋毛虫43 ku ES抗原基因(Ts43)序列设计引物和探针。以管家基因18 SrRNA为内参基因,对旋毛虫总RNA进行归一化处理,根据循环阈值(Ct值)的变化计算Ts43基因的表达量,建立检测旋毛虫Ts43表达量的实时荧光定量PCR方法,并用该...根据GenBank中旋毛虫43 ku ES抗原基因(Ts43)序列设计引物和探针。以管家基因18 SrRNA为内参基因,对旋毛虫总RNA进行归一化处理,根据循环阈值(Ct值)的变化计算Ts43基因的表达量,建立检测旋毛虫Ts43表达量的实时荧光定量PCR方法,并用该方法测定旋毛虫不同寄生时期Ts43基因的表达水平。结果显示,旋毛虫Ts43基因在各寄生时期均有表达,成虫和新生幼虫Ts43基因的表达水平相对于其他寄生时期的虫体低,该基因表达量在感染后第18 d开始逐渐上升,于感染后第30 d达到高峰,而后开始逐渐下降,但感染后第58 d的虫体Ts43基因表达水平仍高于成虫和新生幼虫。结果表明,Ts43基因的表达与保姆细胞的形成有较大关系。展开更多
为了给炉霍县养牛业健康发展提供寄生虫病防治指导与保障,采用粪便检查法对采集自四川省炉霍县部分地区的725份牛粪便样品进行消化道线虫和球虫感染情况调查。结果显示,牛消化道线虫和球虫的总感染率为23.0%(167/725)。其中,线虫的感染...为了给炉霍县养牛业健康发展提供寄生虫病防治指导与保障,采用粪便检查法对采集自四川省炉霍县部分地区的725份牛粪便样品进行消化道线虫和球虫感染情况调查。结果显示,牛消化道线虫和球虫的总感染率为23.0%(167/725)。其中,线虫的感染率为6.6%(48/725),平均每克粪便虫卵数(eggs per gram of feces,EPG)为129个;球虫感染率为16.4%(119/725),平均每克粪便卵囊数(oocysts per gram of feces,OPG)为244个,且无混合感染现象。在3个品种的牛群中,各个年龄段均存在线虫感染,不同品种牛的易感年龄有显著差异。球虫感染在各个年龄段均有发生,其感染率和感染强度随着年龄的增长呈下降趋势。在不同饲养方式方面,放养和半放养牦牛种群之间线虫的感染率存在极显著差异(P<0.01),而球虫的感染率差异不显著(P>0.05)。此外,线虫和球虫的感染率和感染强度在3个地区有显著差异(P<0.05),这可能与饲养环境有关。调查结果表明,当地牛普遍存在线虫与球虫感染,建议区域内牛场加强肠道寄生虫的监测工作,适时对牛群进行针对性驱虫。展开更多
文摘为进一步探讨旋毛虫海藻糖酶(Trehalase of Trichinella spiralis,TsTRE)蛋白对BALB/c小鼠的免疫保护作用,本研究将TsTRE蛋白进行Western-blot分析,并使用该蛋白对BALB/c小鼠进行3次免疫,然后分别感染50条和200条肌幼虫,从免疫前到攻虫试验结束,每周采集一次血清,且在攻虫后第7天和第42天分别计算成虫与肌幼虫减虫率。利用流式细胞术检测表达CD4+T淋巴细胞和表达CD8+T淋巴细胞比例及吞噬能力,利用CCK-8检测淋巴细胞增殖能力,利用ELISA抗体试剂盒检测血清中特异性抗体(IgG、IgG1和IgG2a)、Th1型细胞因子(IFN-γ、IL-2)及Th2型细胞因子(IL-4和IL-10)的水平。Western-blot结果显示,TsTRE蛋白可与小鼠感染旋毛虫的血清发生特异性结合;与PBS对照组相比,表达CD4+T细胞比例升高,而表达CD8+T细胞比例降低,差异均显著(P<0.05);脾淋巴细胞吞噬能力和增殖能力均加强,差异显著(P<0.05)。此外,ELISA方法检测结果显示,特异性抗体水平均极显著增长,且IgG1水平高于IgG2a水平;Th1/Th2型细胞因子水平均显增长趋势,且Th1型细胞因子水平在攻虫后第7天达到最高峰,Th2型细胞因子水平在攻虫后第14天达到最高峰。TsTRE(500)和TsTRE(2000)攻虫组的小鼠成虫与肌幼虫减虫率分别为46.32%、51.19%、40.49%和42.37%。以上结果表明,TsTRE蛋白可诱导小鼠细胞/体液免疫应答,该反应是前期以Th1为主导,后期以Th2为主导的Th1/Th2混合型免疫。以TsTRE为免疫原的疫苗具有一定的减虫作用,该蛋白有望成为疫苗研究新靶点,这为后续预防旋毛虫病提供基础数据。
文摘为了给炉霍县养牛业健康发展提供寄生虫病防治指导与保障,采用粪便检查法对采集自四川省炉霍县部分地区的725份牛粪便样品进行消化道线虫和球虫感染情况调查。结果显示,牛消化道线虫和球虫的总感染率为23.0%(167/725)。其中,线虫的感染率为6.6%(48/725),平均每克粪便虫卵数(eggs per gram of feces,EPG)为129个;球虫感染率为16.4%(119/725),平均每克粪便卵囊数(oocysts per gram of feces,OPG)为244个,且无混合感染现象。在3个品种的牛群中,各个年龄段均存在线虫感染,不同品种牛的易感年龄有显著差异。球虫感染在各个年龄段均有发生,其感染率和感染强度随着年龄的增长呈下降趋势。在不同饲养方式方面,放养和半放养牦牛种群之间线虫的感染率存在极显著差异(P<0.01),而球虫的感染率差异不显著(P>0.05)。此外,线虫和球虫的感染率和感染强度在3个地区有显著差异(P<0.05),这可能与饲养环境有关。调查结果表明,当地牛普遍存在线虫与球虫感染,建议区域内牛场加强肠道寄生虫的监测工作,适时对牛群进行针对性驱虫。
