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马铃薯卷叶病毒56kD蛋白基因及3'端非编码区克隆和序列分析 被引量:6
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作者 张荣信 哈斯阿古拉 张鹤龄 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期247-254,共8页
根据已报道的马铃薯卷叶病毒基因组序列,设计合成一对特异性引物。以马铃薯卷叶病毒中国分离株(PLRV-Ch)的RNA为模板,反转录合成了cDNA第一条链,经PCR扩增后克隆于pUC19质粒中。进一步用PCR鉴定,限制酶... 根据已报道的马铃薯卷叶病毒基因组序列,设计合成一对特异性引物。以马铃薯卷叶病毒中国分离株(PLRV-Ch)的RNA为模板,反转录合成了cDNA第一条链,经PCR扩增后克隆于pUC19质粒中。进一步用PCR鉴定,限制酶切分析和序列分析。结果表明,PLRV-Ch56kD蛋白基因由1527个核苷酸组成,编码508个氨基酸,3'端非编码区由141个核苷酸组成,与国外报道的苏格兰PLRV-S、荷兰PLRV-N、加拿大PLRV-C、澳大利亚PLRV-A各株系核苷酸序列和氨基酸序列有很高的同源性。56kD蛋白基因核苷酸同源率分别为97.1%、97.8%、97.1%和93.9%,推测的氨基酸同源率分别为96.2%、96.4%、95.8%和94.6%,非编码区核苷酸同源率分别为97.9%、97.2%、98.6%和98.6%。 展开更多
关键词 马铃薯卷叶病毒 56KD蛋白基因 3'端非编码区
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进境唐菖蒲种球南芥菜花叶病毒分子鉴定 被引量:5
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作者 秦绍钊 丁元明 +3 位作者 王云月 寸东义 刘忠善 李春燕 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期215-218,共4页
Arabis mosaic virus(ArMV)had been found in the Gladiolus hybridus imported from the Netherlands by DAS-ELISA.Two pairs of primers were designed according to the conserved region of the coat protein(CP) gene sequence o... Arabis mosaic virus(ArMV)had been found in the Gladiolus hybridus imported from the Netherlands by DAS-ELISA.Two pairs of primers were designed according to the conserved region of the coat protein(CP) gene sequence of Arabis mosaic virus(ArMV),and two amplified bands with expected sizes of 750 bp and 250 bp were obtained by reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR).The sensitivity of nested PCR was higher than that of single RT-PCR.Analysis of the partial sequenced CP gene showed that the isolate was closed to ArMV with similarity of 99.0%-100%.All the results demonstrated that the isolated virus was ArMV. 展开更多
关键词 南芥菜花叶病毒 进境检疫 分子鉴定 检疫性有害生物 唐菖蒲 种球 mosaic virus
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防御外来生物 维护生物安全 促进对外贸易——记中国检科院动植物研究员李明福
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《科技成果管理与研究》 2008年第11期103-103,共1页
李明福研究员,现任中国检科院动植物检疫研究所生物安全研究室主任。作为检验检疫系统内唯一的植物病毒检测中心和双桥国家隔离检疫圃的负责人,致力于我国进出境生物安全工作,是中国实验室国家认可委员会技术委员会生物安全分委会委员。
关键词 中国检科院 动植物研究工作 李明福 植物病毒检测 生物安全
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蚕豆萎焉病毒2号侵染豌豆的细胞病理变化 被引量:2
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作者 洪健 周雪平 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期560-561,共2页
关键词 蚕豆萎焉病毒 豌豆 细胞病理 超微结构 病毒侵染
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防治病毒病新药—宁南霉素
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作者 蒋志诚 《农药快讯》 2003年第9期13-13,共1页
关键词 防治 病毒病 宁南霉素 产品性能 作物
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丹皮酚对烟草花叶病毒的抑制作用 被引量:16
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作者 刘国坤 陈启建 +2 位作者 吴祖建 林奇英 谢联辉 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第1期17-20,共4页
从牡丹皮中提纯的丹皮酚结晶(0.6 mg.mL-1)与烟草花叶病毒(Tobacco m osaic virus,TMV)混合10 m in后对TMV枯斑抑制率达80%以上,说明丹皮酚对叶圆片中的病毒复制具有抑制作用;电镜下观察丹皮酚与TMV混合对粒体形态没有影响;丹皮酚与TMV... 从牡丹皮中提纯的丹皮酚结晶(0.6 mg.mL-1)与烟草花叶病毒(Tobacco m osaic virus,TMV)混合10 m in后对TMV枯斑抑制率达80%以上,说明丹皮酚对叶圆片中的病毒复制具有抑制作用;电镜下观察丹皮酚与TMV混合对粒体形态没有影响;丹皮酚与TMV混合后透析病毒可恢复侵染力,表明丹皮酚对病毒没有直接毒害作用;用丹皮酚喷施叶面不影响病毒侵染;低含量丹皮酚可阻碍TMV-CP的体外聚合,对TMV-RNA无体外抑制侵染作用.据此推测,丹皮酚对TMV的抑制作用可能主要是通过其与TMV-CP结合而影响病毒粒体对叶片表面侵染位点的识别,或影响植株体内TMV-CP亚基的体内聚合. 展开更多
关键词 丹皮酚 烟草花叶病毒 抑制 机理
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病毒的定义与病毒病的防治
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作者 陈万国 《吉林农业》 2002年第12期25-25,共1页
许多生物学家对病毒的概念和理论进行了多年的研究,认识越来越深刻.但是,至今为止尚无确切的定义,以致植保理论与实践难免存在着混乱现象.也只有确切的病毒定义才能规范病毒病的防治程度和提高防治效果.
关键词 病毒 定义 病毒病 防治
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侵染广东省葫芦科作物的中国南瓜曲叶病毒的分子特征 被引量:6
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作者 张丽 汤亚飞 +4 位作者 李正刚 于琳 蓝国兵 佘小漫 何自福 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期4097-4109,共13页
【目的】中国南瓜曲叶病毒(squash leaf curl China virus,SLCCNV)是危害葫芦科作物的主要病毒之一,可侵染南瓜、葫芦、冬瓜、黄瓜、甜瓜、哈密瓜,严重影响葫芦科作物生产。论文旨在探究SLCCNV广东分离物的分子特征、亲缘关系及其致病性... 【目的】中国南瓜曲叶病毒(squash leaf curl China virus,SLCCNV)是危害葫芦科作物的主要病毒之一,可侵染南瓜、葫芦、冬瓜、黄瓜、甜瓜、哈密瓜,严重影响葫芦科作物生产。论文旨在探究SLCCNV广东分离物的分子特征、亲缘关系及其致病性,为SLCCNV的防控提供科学依据。【方法】从广东省湛江市雷州市和徐闻县、惠州市博罗县、河源市源城区以及佛山市高明区共采集53份疑似感染菜豆金色黄花叶病毒属(Begomovirus)病毒的葫芦科作物病样,提取总DNA,利用菜豆金色黄花叶病毒属通用引物AV494/CoPR进行PCR检测。选取PCR检测为阳性的样品进行RCA扩增、酶切、克隆及测序,获得各分离物基因组A组分(DNA-A)的全长序列;同时利用背向引物PCR扩增、克隆及测序,获得各分离物基因组B组分(DNA-B)的全长序列。将得到的SLCCNV广东分离物DNA-A和DNA-B全长序列在NCBI中进行BLAST分析,利用SDT1.2软件MUSCLE alignment方法对序列相似性作进一步比较分析,应用MEGA7软件对获得的SLCCNV广东分离物及已报道的SLCCNV分离物进行系统发育分析。采用同源重组技术,构建SLCCNV河源南瓜分离物的侵染性克隆,通过农杆菌介导注射接种南瓜子叶,测定其致病性。【结果】PCR检测结果表明,53份疑似病样中有52份感染了菜豆金色黄花叶病毒属病毒;进一步从南瓜、葫芦、冬瓜以及白瓜4种葫芦科作物病样中分别克隆获得8个SLCCNV广东分离物基因组全序列,DNA-A组分全长大小为2735—2739 nt,含有6个ORF,与已报道SLCCNV相同。DNA-B组分大小为2701—2721 nt,含有2个ORF,分别编码与病毒运动相关的蛋白BC1和BV1。序列相似性比较结果显示,广东不同分离物DNA-A组分核苷酸序列相似性在94.9%以上,与已报道的SLCCNV其他分离物的相似性在88%以上;所获得的DNA-B组分核苷酸序列相似性在86.7%以上,与已报道的SLCCNV其他分离物的相似性在83%以上。系统发� 展开更多
关键词 中国南瓜曲叶病毒 广东省 分子特征 侵染性克隆 致病性
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甜瓜黄斑病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法 被引量:2
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作者 孙晓辉 潘睿婧 +5 位作者 刘永光 王丹 石朝鹏 乔宁 孙作文 竺晓平 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期119-125,共7页
为建立检测甜瓜黄斑病毒(melon yellow spot virus, MYSV)的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qPCR)方法。基于MYSV核衣壳蛋白基因保守序列设计qPCR特异性引物对,针对引物退火温度、引物浓度、特异性和敏感性进行系列优化。结果显示,优化后... 为建立检测甜瓜黄斑病毒(melon yellow spot virus, MYSV)的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qPCR)方法。基于MYSV核衣壳蛋白基因保守序列设计qPCR特异性引物对,针对引物退火温度、引物浓度、特异性和敏感性进行系列优化。结果显示,优化后的qPCR方法最适退火温度为61.3℃,最适引物浓度为0.65μmol·L-1,特异性强,灵敏度高,比PCR高100倍。以携带目的基因片段的重组质粒为标准品,构建的qPCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.999 7。实验样品验证表明建立的qPCR方法可用于MYSV的定量检测。 展开更多
关键词 甜瓜黄斑病毒 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR 病毒检测
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CMV甜瓜分离物外壳蛋白基因的克隆及植物表达载体的构建 被引量:2
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作者 马新艳 古勤生 +4 位作者 刘丽锋 李宁 杨民和 彭斌 李莉 《中国病毒学》 CAS CSCD 2005年第3期307-310,共4页
从河南省临颖县采集的病毒感染的甜瓜样本经ELISA检测和接种分离获得黄瓜花叶病毒(Cucunbermosaicvirus,CMV)分离物。把该分离物接种西葫芦,从发病的叶片中提取总RNA,并以此为模板经RTPCR扩增获得CMV的外壳蛋白(cp)基因,将其克隆到pUCm... 从河南省临颖县采集的病毒感染的甜瓜样本经ELISA检测和接种分离获得黄瓜花叶病毒(Cucunbermosaicvirus,CMV)分离物。把该分离物接种西葫芦,从发病的叶片中提取总RNA,并以此为模板经RTPCR扩增获得CMV的外壳蛋白(cp)基因,将其克隆到pUCmT质粒上。经序列测定和分析,结果表明该cp基因由657个核苷酸组成,编码218个氨基酸。其核苷酸序列与黄瓜花叶病毒亚组I的分离物有较高的同源性,达92.2%~93.9%,与亚组II的同源性仅为76.8%~77.8%,与我国报道的CMV分离物的cp基因序列比较,除香蕉株系XB外核苷酸序列的同源性达91.8%~93.4%。根据这些分析,该CMV分离物属于亚组I。将cp基因通过中间载体pJIT163定向克隆到植物表达载体pBINPLUS中(重组双元载体质粒命名为pBCP),并经冻融法导入农杆菌中,经PCR及酶切鉴定,证实质粒已被导入。利用该植物表达载体对西瓜的遗传转化工作目前正在进行中。 展开更多
关键词 CMV 中国分离物 外壳蛋白基因 序列分析 植物表达载体
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菊花上2种病毒的检测及其部分外壳蛋白基因序列分析 被引量:4
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作者 雷强 李旻 +1 位作者 丁元明 王云月 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期704-709,共6页
采集昆明地区花卉基地和公园的269份菊花样品,调查并分析侵染菊花的番茄不孕病毒(Tomatoaspermy virus,TAV)和菊花B病毒(Chrysanthemum virus B,CVB)的发病状况。ELISA和RT-PCR检测结果表明,TAV和CVB在菊花植株上的发病率分别为4.62%和1... 采集昆明地区花卉基地和公园的269份菊花样品,调查并分析侵染菊花的番茄不孕病毒(Tomatoaspermy virus,TAV)和菊花B病毒(Chrysanthemum virus B,CVB)的发病状况。ELISA和RT-PCR检测结果表明,TAV和CVB在菊花植株上的发病率分别为4.62%和16.70%。对3个TAV分离物和8个CVB分离物的外壳蛋白(coat protein,CP)基因的部分序列进行测定,并分别与GenBank登录的TAV和CVB序列进行比对和系统进化分析,结果显示各TAV分离物的CP基因核苷酸序列同源性为85.04%~98.02%。在系统进化树中聚集的2个簇中,昆明分离物都在同一簇。CVB的CP基因存在较明显的序列变异,核苷酸序列同源性为75.09%~84.99%,在系统进化树中聚为3个簇,昆明分离物均集中在同一簇。 展开更多
关键词 菊花 番茄不孕病毒 菊花B病毒 外壳蛋白基因 系统进化分析
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植物病毒长距离转运的分子机理 被引量:5
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作者 凌建群 周雪平 李德葆 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期285-289,共5页
关键词 植物病毒 长距离转运 分子机理
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侵染湖北圆叶牵牛的甘薯曲叶病毒分子鉴定及遗传进化分析
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作者 罗婉笛 王鹏 +3 位作者 莫翠萍 蔡健和 章松柏 李战彪 《广东农业科学》 CAS 2022年第10期96-103,共8页
【目的】明确湖北省荆州市1株表现黄脉的圆叶牵牛的病毒病原,为该类病害的防控提供理论依据。【方法】从湖北省荆州市采集1株表现黄脉、卷叶的圆叶牵牛植株叶片,采用双生病毒简并引物PA、PB进行PCR检测,通过分段克隆、核苷酸序列比对分... 【目的】明确湖北省荆州市1株表现黄脉的圆叶牵牛的病毒病原,为该类病害的防控提供理论依据。【方法】从湖北省荆州市采集1株表现黄脉、卷叶的圆叶牵牛植株叶片,采用双生病毒简并引物PA、PB进行PCR检测,通过分段克隆、核苷酸序列比对分析和进化树构建等方法对获得的全长基因组序列进行比对及遗传进化分析。【结果】PCR检测结果显示,采集的样品中可扩增一条大小为363 bp的目的靶标序列,证实所采集的圆叶牵牛植株受到双生病毒的侵染;通过分段克隆的方法从阳性样品中拼接获得一条全长为2 827 bp的全基因组序列,核苷酸相似性比较发现,该序列与GenBank已登录序列的甘薯曲叶病毒(Sweet Potato Leaf Curl Virus,SPLCV)各分离物的相似性均在91%以上,其中与湖南分离物(GenBank登录号:KY783941)和江苏分离物(GenBank登录号:FJ176701)的核苷酸序列相似性分别为97.52%和96.81%,根据国际病毒分类委员会对菜豆金色黄花叶病毒属病毒种核苷酸相似性>91%为同一病毒的分类标准,确定侵染圆叶牵牛的双生病毒为SPLCV的一个分离物。进化树分析发现,该分离物(GenBank登录号:OM287440)与中国及多个亚洲分离物处于一个大分支,特别是与湖南分离物处于同一小分支,说明该研究获得的分离物与湖南分离物具有较近的亲缘关系。【结论】侵染湖北圆叶牵牛的病原为SPLCV,而该病毒可能通过种苗或烟粉虱经湖南传入。该研究为SPLCV侵染湖北牵牛花的首次报道。 展开更多
关键词 湖北 圆叶牵牛 甘薯双生病毒 甘薯曲叶病毒 序列分析
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芜青花叶病毒外壳蛋白基因的克隆和表达
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作者 邱并生 王晋芳 +2 位作者 王小凤 沈学军 田波 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期145-147,共3页
芜青花叶病毒(Turnip Mosaic Virus,Tu-MV)属于马铃薯 Y 病毒组,其基因组为单链RNA,寄主范围广,能侵染20个科的双子叶植物。在我国 TuMV 的分布遍及各地。
关键词 芜青花叶病毒 外壳蛋白基因
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昆明番茄斑萎病毒不同分离物N基因遗传多样性分析 被引量:19
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作者 尹跃艳 董家红 +2 位作者 徐兴阳 端永明 张仲凯 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期159-162,共4页
2009年至2011年对昆明地区番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)发生分布进行调查,并根据保守序列设计引物扩增得到21个TSWV昆明分离物S RNA 3'-末端长861nt的核苷酸序列,该序列包括N基因部分序列(710nt)。测序分析表明,... 2009年至2011年对昆明地区番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)发生分布进行调查,并根据保守序列设计引物扩增得到21个TSWV昆明分离物S RNA 3'-末端长861nt的核苷酸序列,该序列包括N基因部分序列(710nt)。测序分析表明,所获得的21个TSWV昆明分离物N基因序列氨基酸同源性较高(97.5%~100%);构建系统进化树,昆明21个TSWV分离物与TSWV韩国分离物(TSWV-Korea)聚为1支;而在21个分离物中,鬼针草分离物与其它分离物聚为不同分支。 展开更多
关键词 番茄斑萎病毒 核壳体蛋白基因 遗传特征
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香蕉束顶病毒NS株DNA组分5的克隆和序列分析 被引量:1
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作者 郑耘 阮小蕾 +2 位作者 李华平 肖火根 范怀忠 《中国病毒学》 CAS CSCD 2005年第3期311-314,共4页
本文利用PCR技术扩增得到香蕉束顶病毒(BBTV)NS株DNA组分5的全基因,该基因全长为1014nt,具有一个开放阅读框,编码146个氨基酸,蛋白质二级结构包括6个α螺旋,7个β折叠。NS株系与南太平洋组澳大利亚、夏威夷、埃及分离物DNA组分5核苷酸... 本文利用PCR技术扩增得到香蕉束顶病毒(BBTV)NS株DNA组分5的全基因,该基因全长为1014nt,具有一个开放阅读框,编码146个氨基酸,蛋白质二级结构包括6个α螺旋,7个β折叠。NS株系与南太平洋组澳大利亚、夏威夷、埃及分离物DNA组分5核苷酸和编码的氨基酸序列相比较,核苷酸序列同源率介于88%~89%之间,氨基酸序列同源率介于80%~88%之间。NS株系与其它分离物在编码成视网膜细胞瘤蛋白(Retinoblastomaprotein,Rb)的基元序列“LXCDE”附近的二级结构上表现明显的差异,推测这种差异可能影响与植物中Rb蛋白的结合效率。 展开更多
关键词 香蕉束顶病毒 DNA组分5 序列分析
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植物RNA病毒载体构建策略
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作者 邓晓东 费小雯 +1 位作者 刘志昕 郑学勤 《生命科学研究》 CAS CSCD 1999年第1期26-29,共4页
作为对传统的植物转化载体的补充,植物RNA病毒载体具有受体植物广泛,且转化需要的时间短,特别适宜于大量表达外源基因.虽然外源基因的稳定性存在一定的问题,但大量的事例说明,作为一种新型的外源基因在植物中表达的载体,它具... 作为对传统的植物转化载体的补充,植物RNA病毒载体具有受体植物广泛,且转化需要的时间短,特别适宜于大量表达外源基因.虽然外源基因的稳定性存在一定的问题,但大量的事例说明,作为一种新型的外源基因在植物中表达的载体,它具有其独到的特点. 展开更多
关键词 植物病毒 载体 转化 取代 RNA病毒
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基于小RNA深度测序技术首次发现侵染黄槿的杆状DNA病毒
18
作者 王致远 冯如盈 +3 位作者 娄义念 梁凯莉 刘靖颖 许雄彪 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期209-214,共6页
0引言黄槿(Hibiscus tiliaceus L.)为锦葵科(Mal-vaceae)木槿属(Hibiscus)常绿乔木或灌木,广泛分布于台湾地区、福建、广西、广东等地,是一种具有重要生态和观赏价值的半红树植物[1]。同时黄槿具有清热解毒、散瘀消肿、止血镇痛抗炎等功... 0引言黄槿(Hibiscus tiliaceus L.)为锦葵科(Mal-vaceae)木槿属(Hibiscus)常绿乔木或灌木,广泛分布于台湾地区、福建、广西、广东等地,是一种具有重要生态和观赏价值的半红树植物[1]。同时黄槿具有清热解毒、散瘀消肿、止血镇痛抗炎等功效,具有潜在的药用价值[2]。关于黄槿上的植物病害鲜有研究,其上发生的病毒病害更是尚未见报道。RNA沉默是植物抵御病毒入侵的重要途径[3],小RNA深度测序(Small RNA Deep Sequencing)作为高通量测序技术的重要应用,可同时获得来源于病毒和宿主的小RNA序列,是研究RNA沉默机制的有效工具。 展开更多
关键词 病毒病害 小RNA 植物病害 常绿乔木 RNA沉默 病毒入侵 半红树植物 锦葵科
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凋亡抑制基因p35对杆状病毒增殖的影响
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作者 胡敏 李小锋 +1 位作者 齐义鹏 刘德立 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 2000年第2期203-206,共4页
以野生型苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒 (Autographa californica Nuclear Polyhedrosis Virus,Ac NPV)和多角体基因缺失 (ocu- )的 Ac NPV分别感染 Sf9- 35细胞 ,研究了 p35的稳定表达对杆状病毒增殖的影响 .发现p35基因在 Sf9- 35细胞内... 以野生型苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒 (Autographa californica Nuclear Polyhedrosis Virus,Ac NPV)和多角体基因缺失 (ocu- )的 Ac NPV分别感染 Sf9- 35细胞 ,研究了 p35的稳定表达对杆状病毒增殖的影响 .发现p35基因在 Sf9- 35细胞内组成型表达能够影响野生型 Ac NPV包涵体的形成 ,大幅度提高出芽病毒 (BuddedVirus,BV;即无包涵体病毒粒子 )产量 . 展开更多
关键词 P35基因 病毒复制 凋亡抑制基因 杆状病毒增殖
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水稻条叶枯病毒(RSV)的SP蛋白在介体灰飞虱内的亚细胞定位 被引量:10
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作者 吴爱忠 赵艳 +3 位作者 曲志才 沈大棱 潘重光 苏德明 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第14期1183-1186,共4页
介体灰飞虱的亚显微结构及水稻条叶枯病毒(RSV)病害特异性蛋白SP的免疫定位显示:带毒虫卵巢内的成熟卵含大量内共生菌,证实了它的经卵传递特征.同时在卵的外周、卵内以及中肠的肠腔和肠上皮细胞内均有胶体金颗粒分布.说明R... 介体灰飞虱的亚显微结构及水稻条叶枯病毒(RSV)病害特异性蛋白SP的免疫定位显示:带毒虫卵巢内的成熟卵含大量内共生菌,证实了它的经卵传递特征.同时在卵的外周、卵内以及中肠的肠腔和肠上皮细胞内均有胶体金颗粒分布.说明RSV在介体内的循回途径和经卵传递的特征.对照组的雌虫则仅含内共生菌,而无胶体金颗粒分布;雄虫则不论带毒与否,其精子均不含内共生菌,也无胶体金颗粒标记.这为灰飞虱经卵传毒给后代的生物测试提供了直观的实验证据,也为传毒机理研究和探讨RSV蛋白的功能奠定了必要的科学基础. 展开更多
关键词 灰飞虱 水稻条叶枯病毒 中肠 卵巢 SP蛋白 传毒机理 亚细胞定位
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