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利用间接ELISA定量检测人碱性成纤维细胞生长因子方法的建立和应用
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作者 黄林 王济源 +2 位作者 袁涛 李春阳 张雪梅 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S1期238-241,共4页
建立了间接ELISA作为重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhubFGF)的定量检测的实验方法 .建立了标准曲线、方程式及样品的数据处理方法 .实验结果表明 ,缓冲系统、杂蛋白等是影响实验结果的关键因素 .该方法的灵敏度为 6 .2 5ng/mL ,实验... 建立了间接ELISA作为重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhubFGF)的定量检测的实验方法 .建立了标准曲线、方程式及样品的数据处理方法 .实验结果表明 ,缓冲系统、杂蛋白等是影响实验结果的关键因素 .该方法的灵敏度为 6 .2 5ng/mL ,实验的同一样品的变异系数为 13% (n =8) . 展开更多
关键词 酶联免疫吸附试验 重组人碱性成纤维细胞生长因子 变异系数
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组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体的研究──突变体的构建,表达及生物学特性分析
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作者 刘士辉 徐秀英 +3 位作者 陈琳 朱恒奇 黄培堂 黄翠芬 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 1994年第S1期259-260,共2页
组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体的研究—─突变体的构建,表达及生物学特性分析军事医学科学院生物工程研究所刘士辉,徐秀英,陈琳,朱恒奇,黄培堂,黄翠芬t-PA是纤溶系统的生理性激活剂,但它在血浆中半衰期甚短及活性... 组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体的研究—─突变体的构建,表达及生物学特性分析军事医学科学院生物工程研究所刘士辉,徐秀英,陈琳,朱恒奇,黄培堂,黄翠芬t-PA是纤溶系统的生理性激活剂,但它在血浆中半衰期甚短及活性可被天然快速抑制剂PAI-1抑制等... 展开更多
关键词 PA 突变体 生物学特性 纤溶系统 黄培 溶栓剂 表达产物 候选株 去糖基化 双脱氧终止法
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Osteopontin expression is associated with hepatopathologic changes in Schistosoma japonicum infected mice 被引量:6
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作者 Bo-Lin Chen Gui-Ying Zhang +5 位作者 Wei-Jian Yuan Shi-Ping Wang Yue-Ming Shen LU Yan Huan Gu Jia Li 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2011年第46期5075-5082,共8页
AIM:To investigate osteopontin expression and its association with hepatopathologic changes in BALB/C mice infected with Schistosoma japonicum.METHODS:The schistosomal hepatopathologic mouse model was established by a... AIM:To investigate osteopontin expression and its association with hepatopathologic changes in BALB/C mice infected with Schistosoma japonicum.METHODS:The schistosomal hepatopathologic mouse model was established by abdominal infection with schistosomal cercaria.Liver samples were obtained from mice sacrif iced at 6,8,10,14,and 18 wk after in-fection.Liver histopathological changes were observed with hematoxylin-eosin and Masson trichrome staining.The expression of osteopontin was determined with im-munohistochemistry,reverse transcription-polymerase chain reaction,and Western blotting.The expressionof α-smooth muscle actin(α-SMA)and transforming growth factor-β1(TGF-β1)were determined by im-munohistochemistry.Correlations of osteopontin ex-pression with other variables(α-SMA,TGF-β1,hepato-pathologic features including granuloma formation and degree of liver f ibrosis)were analyzed.RESULTS:Typical schistosomal hepatopathologic changes were induced in the animals.Dynamic changes in the expression of osteopontin were observed at week 6.The expression increased,peaked at week 10(P<0.01),and then gradually decreased.Positive correla-tions between osteopontin expression and α-SMA(r=0.720,P<0.01),TGF-β1(r=0.905,P <0.01),granu-loma formation(r=0.875,P<0.01),and degree of liver f ibrosis(r=0.858,P<0.01)were also observed.CONCLUSION:Osteopontin may play an important role in schistosomal hepatopathology and may promote granuloma formation and liver fi brosis through an un-explored mechanism. 展开更多
关键词 Schistosoma japonicum Granuloma Liverfibrosis OSTEOPONTIN BALB/C mice
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适用于链霉菌大片段基因组DNA克隆和异源表达的细菌人工染色体(BAC)载体的构建及应用 被引量:11
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作者 黄胜 李娜 +1 位作者 周俊 何璟 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期30-37,共8页
【目的】很多链霉菌来源的天然产物的生物合成基因簇往往很大,用传统的cosmid载体很难完整的克隆和异源表达。本研究通过载体改造,成功构建出一个新的细菌人工染色体(BAC)载体,用于链霉菌来源的天然产物生物合成基因簇的克隆及异源表达... 【目的】很多链霉菌来源的天然产物的生物合成基因簇往往很大,用传统的cosmid载体很难完整的克隆和异源表达。本研究通过载体改造,成功构建出一个新的细菌人工染色体(BAC)载体,用于链霉菌来源的天然产物生物合成基因簇的克隆及异源表达实验。【方法】从复合型载体pCUGIBAC1出发,通过λRED介导的PCR-targeting方法,用链霉素抗性基因替换掉原有的氯霉素抗性基因标记,同时插入链霉菌中常用的安普拉霉素抗性标记、转移起始位点oriT、φC31整合酶基因int、整合位点attP等元件。【结果】成功构建出可装载链霉菌大片段DNA的BAC载体pMSBBACs。使用pMSBBACs构建出链霉菌U27的基因组BAC文库,平均插入片段大小为100 kb。选取其中一个大小为140 kb的BAC质粒进行功能验证,实验证明通过接合转移和原生质体转化的方法都能够将这个大型BAC质粒导入链霉菌模式菌株,并通过位点特异性重组整合到染色体中进行异源表达。【结论】BAC载体pMSBBACs可成功用于放线菌大片段基因组DNA的克隆和异源表达实验。 展开更多
关键词 细菌人工染色体(BAC)载体 天然产物 生物合成基因簇 链霉菌 异源表达
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崂山奶山羊Myostatin基因真核表达载体的构建及其在成纤维细胞中的表达研究 被引量:2
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作者 唐大运 陈晓亮 +6 位作者 吴健敏 朱化彬 杜卫华 王栋 赵学明 陈汉忠 林秀坤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期37-40,共4页
试验克隆了崂山奶山羊Myostatin基因序列,构建了其真核表达载体,并验证了其在成纤维细胞中的表达。本研究通过从崂山奶山羊肌肉组织中提取RNA,反转录后采用巢式PCR方法扩增出Myostatin基因序列,构建真核表达载体,通过转染成纤维细胞,采... 试验克隆了崂山奶山羊Myostatin基因序列,构建了其真核表达载体,并验证了其在成纤维细胞中的表达。本研究通过从崂山奶山羊肌肉组织中提取RNA,反转录后采用巢式PCR方法扩增出Myostatin基因序列,构建真核表达载体,通过转染成纤维细胞,采用RT-PCR方法验证其表达。结果表明,克隆出崂山奶山羊Myostatin基因的全长cDNA序列,大小为1128bp,GenBank登录号:GU377303.1;构建pcDNA-MSTN真核表达载体,转染成纤维细胞48h后通过RT-PCR检测,结果显示,Myostatin表达量显著增加,表明成功构建pcDNA-MSTN真核表达载体,为进一步研究Myostatin的生物学功能及转基因羊培育奠定基础。 展开更多
关键词 崂山奶山羊 肌肉生长抑制素 真核表达载体 成纤维细胞 巢式PCR
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重组α2-HS糖蛋白的原核表达、纯化及免疫学活性分析
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作者 王鹏 任鹏飞 +2 位作者 代丽萍 王凯娟 张建营 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第1期6-10,共5页
目的:原核表达并纯化具有生物学活性的重组α2-HS糖蛋白(AHSG)。方法:提取人肝癌细胞株HepG2细胞总RNA,逆转录得cDNA,PCR扩增出目的基因,与pMD18-T载体连接后,转化至大肠杆菌DH5α中,大量扩增后提取克隆质粒,连接至原核表达载体pEP-30a... 目的:原核表达并纯化具有生物学活性的重组α2-HS糖蛋白(AHSG)。方法:提取人肝癌细胞株HepG2细胞总RNA,逆转录得cDNA,PCR扩增出目的基因,与pMD18-T载体连接后,转化至大肠杆菌DH5α中,大量扩增后提取克隆质粒,连接至原核表达载体pEP-30a(+)中,转化BL21(DE3),经IPTG诱导蛋白表达,通过镍离子亲和层析的方法纯化重组蛋白,采用SDS-PAGE电泳、免疫印迹杂交法对纯化产物进行分析鉴定。结果:成功构建了AHSG原核表达系统BL21(pET30a-AHSG),最佳诱导条件为80μmol/LIPTG诱导3h;诱导表达的蛋白相对分子质量约54600,主要以不溶性的包涵体形式存在,纯化后的重组蛋白质量浓度最高达2.3g/L,经免疫印迹杂交鉴定有抗原性。结论:成功构建了AHSG原核表达系统,该系统可高效表达重组AHSG蛋白,该蛋白具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 α2-HS糖蛋白 原核表达 蛋白纯化 抗原性
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基于Cytb基因的鱼类加工产品的鱼种鉴定 被引量:2
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作者 张洪沂 柴平海 +1 位作者 梅艳巧 邓恬宁 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第B12期9-12,共4页
基于Cytb基因,采用直接测序的方法,对阿拉斯加鳕鱼ITS1、大西洋庸鲽ITS2、牙鳕ITS3和欧洲黄盖鲽ITS4 4种鱼进行初步鉴定。结果表明,ITS1与Theragra chalcogramma(DQ356946)序列同源性达99%;ITS2与Hippo-glossus hippoglossus(EU492151)... 基于Cytb基因,采用直接测序的方法,对阿拉斯加鳕鱼ITS1、大西洋庸鲽ITS2、牙鳕ITS3和欧洲黄盖鲽ITS4 4种鱼进行初步鉴定。结果表明,ITS1与Theragra chalcogramma(DQ356946)序列同源性达99%;ITS2与Hippo-glossus hippoglossus(EU492151)序列同源性达98%;ITS3与Merlangius merlangus(AY946299)序列同源性达98%;ITS4与Limanda limanda(EU492119)序列同源性达99%。本研究又对50份样品进行鱼种真实性鉴定,结果发现大部分样品与产品包装上的名称相符。 展开更多
关键词 鱼产品 CYTB基因 测序
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DNA标记及其在鱼类中的应用
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作者 肖明松 鲍方印 +1 位作者 夏海武 崔峰 《安徽科技学院学报》 2011年第5期10-15,共6页
DNA分子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种比较理想的遗传标记技术。本文简要介绍RFLP、RAPD、AFLP、SSR、SNP、EST、mtDNA等DNA分子标记的类型,基本原理和特点,以及分子标记技术在鱼类遗传图谱构建、基因定位和... DNA分子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种比较理想的遗传标记技术。本文简要介绍RFLP、RAPD、AFLP、SSR、SNP、EST、mtDNA等DNA分子标记的类型,基本原理和特点,以及分子标记技术在鱼类遗传图谱构建、基因定位和分子标记辅助育种等方面的应用前景予以展望。 展开更多
关键词 DNA标记 鱼类 基因定位 育种
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普通PCR与TD-PCR扩增叶尔羌高原鳅抗菌肽Hepcidin基因的比较 被引量:1
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作者 刘书东 王娟娟 +1 位作者 陈根元 李莲瑞 《塔里木大学学报》 2011年第4期40-45,共6页
为了比较普通PCR和降落PCR(TD-PCR)扩增Hepcidin基因的效果,通过Trizol法提取叶尔羌高原鳅肝胰脏总RNA并合成cDNA,分别利用普通PCR和降落PCR扩增Hepcidin基因片段。结果显示,降落PCR能有效扩增叶尔羌高原鳅Hepci-din。测序结果显示:叶... 为了比较普通PCR和降落PCR(TD-PCR)扩增Hepcidin基因的效果,通过Trizol法提取叶尔羌高原鳅肝胰脏总RNA并合成cDNA,分别利用普通PCR和降落PCR扩增Hepcidin基因片段。结果显示,降落PCR能有效扩增叶尔羌高原鳅Hepci-din。测序结果显示:叶尔羌高原鳅抗菌肽Hepcidin基因与普通鱼类基因同源性达90%,而普通PCR则不能扩出明显目的条带。本研究结果表明在相同反应体系中,降落PCR在不影响PCR特异性的条件下,能提高扩增效率,可用于扩增普通PCR难以扩增的基因片段。 展开更多
关键词 降落PCR 叶尔羌高原鳅 HEPCIDIN基因
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玫烟色棒束孢几丁质酶基因上游调控序列克隆与结构预测分析 被引量:6
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作者 汤强 刘玉军 +2 位作者 方玲 李增智 黄勃 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期99-106,共8页
为探明玫烟色棒束孢几丁质酶基因Ifuchi1的表达调控机理,根据Ifuchi1基因组全长核苷酸序列,采用基因组步移方法,获得Ifuchi1的5′-上游区序列(总长为2 402 bp)。与cDNA序列进行比对,其中含有2个内含子。TFSEARCH 1.3软件分析转录因子结... 为探明玫烟色棒束孢几丁质酶基因Ifuchi1的表达调控机理,根据Ifuchi1基因组全长核苷酸序列,采用基因组步移方法,获得Ifuchi1的5′-上游区序列(总长为2 402 bp)。与cDNA序列进行比对,其中含有2个内含子。TFSEARCH 1.3软件分析转录因子结合位点的结果显示,该序列中没有明显的TATA和CAAT框,含有4个可能的碳调控因子的结合位点5'>(g/c)YggRg<3'和3个氮调控因子的结合位点-相隔很近的GATA。其中含有可能的葡萄糖抑制调控序列和压力反应元件。本研究结果为深入研究玫烟色棒束孢几丁质酶基因的表达调控机制及其分子机理奠定了一定基础。 展开更多
关键词 昆虫病原真菌 几丁质酶:基因 基因组步移 上游调控序列
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蚯蚓会痛吗?
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作者 连杰 《思想理论教育》 CSSCI 北大核心 2012年第8期31-32,共2页
在进行高中生命科学第二册"克隆技术"的教学时,我用了一个与蚯蚓有关的笑话进行课堂引入:蚯蚓一家这天很无聊,小蚯蚓就把自己切成两段打羽毛球去了,蚯蚓妈妈觉得这方法不错,就把自己切成四段打麻将去了,蚯蚓爸爸想了想,就把自己切成... 在进行高中生命科学第二册"克隆技术"的教学时,我用了一个与蚯蚓有关的笑话进行课堂引入:蚯蚓一家这天很无聊,小蚯蚓就把自己切成两段打羽毛球去了,蚯蚓妈妈觉得这方法不错,就把自己切成四段打麻将去了,蚯蚓爸爸想了想,就把自己切成了肉末。蚯蚓妈妈哭着说:"你怎么这么傻? 展开更多
关键词 蚯蚓 克隆技术 生命科学 课堂引入 羽毛球 妈妈
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抗草甘膦基因的克隆及在原核表达系统中的功能分析 被引量:1
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作者 赵特 林朝阳 +2 位作者 徐晓丽 方军 沈志成 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期7-12,共6页
为了克隆抗草甘膦基因并在原核表达系统中分析其抗性水平,利用200μmol/L草甘膦平板从草甘膦严重污染的土壤中筛选到1株抗草甘膦菌株G6PP,经电镜和16SrDNA鉴定为恶臭假单胞菌;以该菌株基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增出5-烯醇丙酮莽草... 为了克隆抗草甘膦基因并在原核表达系统中分析其抗性水平,利用200μmol/L草甘膦平板从草甘膦严重污染的土壤中筛选到1株抗草甘膦菌株G6PP,经电镜和16SrDNA鉴定为恶臭假单胞菌;以该菌株基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增出5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸酯合成酶(EPSPS)基因,该基因编码440个氨基酸,亚克隆到原核表达载体pEET-28a中构建原核表达载体pET-G6;将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达出46ku的融合蛋白;携带pET-G6质粒的大肠杆菌BL21(DE3)在液体M63培养基中能耐受150μmol/L草甘膦的抑制。本研究结果表明克隆到的G6基因具有一定的抗草甘膦活性,对抗草甘膦作物的培育具有实践意义。 展开更多
关键词 抗草甘膦 16S RDNA 克隆 原核表达
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青杄PsbO基因cDNA序列克隆及生物信息学分析 被引量:1
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作者 刘亚静 李长江 +1 位作者 孙帆 张凌云 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期201-206,共6页
利用RACE技术从已有的青杄均一化cDNA文库中克隆得到青杄(Picea wilsonii)PsbO基因cDNA的全长,并用生物信息学的方法对该cDNA的核苷酸序列、氨基酸序列的相似性,及编码蛋白PwPsbO的理化性质、亲水性/疏水性、二级和三级结构,PwPsbO基因... 利用RACE技术从已有的青杄均一化cDNA文库中克隆得到青杄(Picea wilsonii)PsbO基因cDNA的全长,并用生物信息学的方法对该cDNA的核苷酸序列、氨基酸序列的相似性,及编码蛋白PwPsbO的理化性质、亲水性/疏水性、二级和三级结构,PwPsbO基因进化树等进行了预测和分析.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术,测定了青杄不同组织中的PsbO基因的相对表达水平.结果发现:青杄PsbO基因编码346个氨基酸,预测相对分子质量为36.6 kD,理论pI值为5.29,属于可溶性蛋白.二级和三级结构预测表明其含有较多的α螺旋、β折叠和随机卷曲结构.RT-qPCR发现该基因在青杄针叶和茎中表达量最高.这些结果为青杄中PsbO基因的初步功能研究奠定了基础. 展开更多
关键词 青杄 PsbO基因 RACE 生物信息学
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鸡、鹌鹑及其杂交种早期胚胎bcl-2基因甲基化的分析 被引量:2
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作者 刘唯依 李岩 +7 位作者 周红 钟新献 邵军 李卫忠 范丽娜 耿鹏瑞 李一丹 廖和荣 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第9期156-160,共5页
采用甲基化特异性PCR(MSP)方法进行鸡、鹌鹑及其属间杂交种早期胚胎发育期60、66、72、84、96、108、120h7个不同胚龄胚胎组织bcl-2基因启动子区CpG岛甲基化状态的对比分析,探讨bcl-2基因甲基化对鸡与鹌鹑属间杂交种早期胚胎发育的影响... 采用甲基化特异性PCR(MSP)方法进行鸡、鹌鹑及其属间杂交种早期胚胎发育期60、66、72、84、96、108、120h7个不同胚龄胚胎组织bcl-2基因启动子区CpG岛甲基化状态的对比分析,探讨bcl-2基因甲基化对鸡与鹌鹑属间杂交种早期胚胎发育的影响。结果显示,正常发育的鸡胚和鹌鹑胚龄在60、66、72、120h均呈高甲基化状态,84和96h呈非甲基化状态,而鸡与鹌鹑属间杂交种胚胎在60、66、72、96、108和120h则与鸡、鹌鹑不同,呈现出甲基化或非甲基化无规律性并存,甚至检测不到甲基化状态;84h则只检测到非甲基化状态。鸡与鹌鹑杂交种早期胚胎组织中bcl-2基因启动子区CpG岛的异常甲基化有可能是引起鸡与鹌鹑属间杂交种胚胎早期死亡的一个重要影响因素。 展开更多
关键词 BCL-2基因 基因甲基化 鹌鹑 杂交胚胎 CPG岛
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九阳:爱有基因
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作者 曹培红 《社会与公益》 2012年第10期46-48,共3页
创新,是九阳公司与生俱来的DNA。这个创新的基因来源于创始人儿时的“爱的滋味”。
关键词 基因 九阳公司 DNA 创始人 创新
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科技资讯
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《科技风》 2012年第18期1-1,共1页
变异蛋白在血细胞中逐渐积累引发亨廷顿病英国科学家在最近一期《临床调查杂志》上刊发论文称,他们利用新的检测技术证明,导致亨廷顿病的有害蛋白是逐渐在血液细胞中积累起来的。他们在论文中对这些有害细胞是如何损害人的大脑进行了详... 变异蛋白在血细胞中逐渐积累引发亨廷顿病英国科学家在最近一期《临床调查杂志》上刊发论文称,他们利用新的检测技术证明,导致亨廷顿病的有害蛋白是逐渐在血液细胞中积累起来的。他们在论文中对这些有害细胞是如何损害人的大脑进行了详细阐述,而这一新发现不仅有助于监测亨廷顿病的进展情况,也有助于开发抑制有害蛋白的新药。 展开更多
关键词 资讯 科技 亨廷顿病 英国科学家 临床调查 检测技术 血液细胞 血细胞
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龙眼生长素应答因子基因克隆及其在体胚中的表达分析 被引量:7
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作者 李惠华 赖钟雄 +1 位作者 苏明华 林玉玲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2383-2389,共7页
以龙眼胚性愈伤组织为材料,采用RT-PCR结合RACE法克隆生长素应答因子基因(auxin response fac-tor,即DL-ARF1),运用生物信息学方法对序列进行分析,并通过实时荧光定量PCR法研究其在龙眼体细胞胚胎发生过程中的表达。结果表明:DL-ARF1基... 以龙眼胚性愈伤组织为材料,采用RT-PCR结合RACE法克隆生长素应答因子基因(auxin response fac-tor,即DL-ARF1),运用生物信息学方法对序列进行分析,并通过实时荧光定量PCR法研究其在龙眼体细胞胚胎发生过程中的表达。结果表明:DL-ARF1基因的mRNA全长序列为2 695bp(GenBank登录号GQ923778),包含2 046bp开放阅读框,163bp 5′非编码区(5′UTR),486bp 3′非编码区(3′UTR);推定的氨基酸序列含681个氨基酸,与其它植物ARF基因相似性达40%~81%。DL-ARF1基因可能属于转录抑制因子,在龙眼体胚的各阶段均有表达,整个变化趋势呈双峰形,在胚性愈伤Ⅱ(Stage 2)中的表达量最高。 展开更多
关键词 龙眼 胚性愈伤组织 生长素应答因子(ARF) 基因克隆 序列分析 实时荧光定量PCR法
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SV40增强子对奶牛β-酪蛋白启动子活性的影响
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作者 钟宇 邵正 江黎明 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期175-179,187,共6页
该文采用重叠PCR方法在奶牛β-酪蛋白启动子(op0)中插入SV40增强子构建重组启动子op0-SV40enh,并分析其活性。首先PCR扩增op0 5′-端2.1 Kb片段、op0 3′-端1 Kb片段和SV40增强子序列,重叠PCR拼接三种片段得到插入SV40增强子的op0-SV40... 该文采用重叠PCR方法在奶牛β-酪蛋白启动子(op0)中插入SV40增强子构建重组启动子op0-SV40enh,并分析其活性。首先PCR扩增op0 5′-端2.1 Kb片段、op0 3′-端1 Kb片段和SV40增强子序列,重叠PCR拼接三种片段得到插入SV40增强子的op0-SV40enh启动子并测序鉴定后,酶切连接将其插入pGL3-Basic中的指定克隆位点,构建重组载体pGL3-op0-SV40enh。将重组载体pGL3-op0和pGL3-op0-SV40enh分别瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测启动子op0和op0-SV40enh的相对活性。结果显示,重叠PCR拼接出长度为3.4 Kb的片段,测序结果与预期结果一致,表明成功构建了重组载体pGL3-op0-SV40enh;op0-SV40enh启动子的活性远高于op0启动子的活性,表明奶牛β-酪蛋白启动子中插入SV40增强子序列可显著提高其引导荧光素酶报告基因表达的活性。 展开更多
关键词 SV40增强子 奶牛op0 双荧光素酶报告基因检测系统
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国内首批转基因克隆猪在江苏省诞生
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《农家致富顾问》 2013年第3期12-12,共1页
2013年1月,江苏省异种器官移植重点实验室培育成功首批转基因克隆猪,标志着我国开展异种器官移植迈开了实质l生步伐,未来将有望实现为人类定制器官。该实验室拥有一支由一名院士、
关键词 江苏省 克隆猪 转基因 异种器官移植 重点实验室 国内
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中国明对虾FcβGBP-HDL基因和启动子的克隆及序列特征分析 被引量:2
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作者 赖晓芳 高焕 +2 位作者 孔杰 王清印 王伟继 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期175-183,共9页
FcβGBP-HDL是中国明对虾免疫应答中的一种模式识别受体,在白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)侵染后其表达显著上调。为了探讨FcβGBP-HDL在免疫应答中的转录调节机制,实验以FcβGBP-HDL cDNA为基础设计引物,采用染色体... FcβGBP-HDL是中国明对虾免疫应答中的一种模式识别受体,在白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)侵染后其表达显著上调。为了探讨FcβGBP-HDL在免疫应答中的转录调节机制,实验以FcβGBP-HDL cDNA为基础设计引物,采用染色体步移技术对其基因组DNA和启动子进行克隆,构建一系列缺失表达载体进行启动子活性分析。结果显示,FcβGBP-HDL基因全长6 713 bp,无内含子;启动子区域长1 507 bp,除了1个启动子核心序列、2个SRF、2个TBP、1个CTF和1个CRE等典型的启动子特征外,还有2个GATA-1、3个AP-1、1个c-Ets-1和7个Sp1等参与其它节肢动物免疫基因转录调节的结合位点;同源比对分析表明,FcβGBP-HDL启动子与FcCTL启动子相似度最高(41.4%);不同长度的启动子片段具有不同的启动荧光素酶报告基因表达的活性,其中去除5'端2个AP-1后的启动子片段具有最高的启动活性,去除启动子核心序列的启动子片段启动活性最低。研究表明,FcβGBP-HDL启动子可能在免疫反应中受到调节。 展开更多
关键词 中国明对虾 FcβGBP-HDL 基因组结构 启动子
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