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酶法水解植物蛋白 被引量:19
1
作者 范恒君 《南宁职业技术学院学报》 2000年第3期57-61,共5页
以豆粕为原料 ,对蛋白酶水解植物蛋白的条件进行了研究。在酶解反应中 ,各因素对酶解作用的影响大小顺序是 :酶解时间 >p H值 >酶用量 >酶解温度。酶解反应的最适作用条件为 :温度 4 5℃、p H5.0和酶用量 30 0 0 u/ g。豆粕的... 以豆粕为原料 ,对蛋白酶水解植物蛋白的条件进行了研究。在酶解反应中 ,各因素对酶解作用的影响大小顺序是 :酶解时间 >p H值 >酶用量 >酶解温度。酶解反应的最适作用条件为 :温度 4 5℃、p H5.0和酶用量 30 0 0 u/ g。豆粕的水解度随时间的延长而增大 ,在4 5℃、p H5.0和 30 0 0 u/ g的条件下 ,水解豆粕 8h,水解产物的氮收率和水解度分别 55.4 6%和4 3.0 4 %。在同样条件下 ,水解油菜饼 ,水解产物氮收率和水解度分别为 57.59%和 4 4 .65%。 展开更多
关键词 酶法水解 植物蛋白 豆粕 蛋白酶 水解反应
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京尼平苷为底物测定β-葡萄糖苷酶活力的方法 被引量:20
2
作者 梁华正 刘富梁 +1 位作者 彭玲西 吴志梅 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期182-185,共4页
研究以京尼平苷为底物氨基酸为显色剂测定β-葡萄糖苷酶活力的方法。β-葡萄糖苷酶水解京尼平苷的温度为50℃,pH为5.0,京尼平苷浓度为0.625mmol/L,水解10min后,立即加入1ml1mol/LNa2CO3终止反应,混匀,再加入体积比为1:1的0.2mg/ml的精... 研究以京尼平苷为底物氨基酸为显色剂测定β-葡萄糖苷酶活力的方法。β-葡萄糖苷酶水解京尼平苷的温度为50℃,pH为5.0,京尼平苷浓度为0.625mmol/L,水解10min后,立即加入1ml1mol/LNa2CO3终止反应,混匀,再加入体积比为1:1的0.2mg/ml的精氨酸溶液,沸水浴显色10min,冷却后于590nm处测光吸收度值。该方法的检测线性范围为0.05~1U/ml,相关系数为0.9998,检测限为0.02U/ml,精密度为1.5%(n=5),回收率为99.5%~101.1%,该方法准确度高,结果稳定。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖苷酶 京尼平苷 精氨酸 活力测定
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基质金属蛋白酶9在心肌梗死患者外周血白细胞表达的研究 被引量:2
3
作者 徐继宾 桑圣刚 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第3期295-298,共4页
目的探讨白细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)在急性心肌梗死(AMI)病理生理机制中的作用。方法用电化学发光法及比浊法检测30例AMI患者与30名正常人血浆肌钙蛋白(Tn)、循环白细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;用酶... 目的探讨白细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)在急性心肌梗死(AMI)病理生理机制中的作用。方法用电化学发光法及比浊法检测30例AMI患者与30名正常人血浆肌钙蛋白(Tn)、循环白细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆MMP-9的含量及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测白细胞中MMP-9 mRNA的表达水平。结果AMI患者SOD的含量在6 h[(23±5)ng/mL]及1周内[(71±11)ng/mL]较正常人[(124±8)ng/mL]显著降低(P<0.001),Tn[6 h:(173±24)μg/L,1周:(126±13)μg/L]、MDA[6 h:(523±87)μg/L,1周:(341±78)μg/L]、MMP-9[6 h:(697±143)μg/L,1周:(597±102)μg/L]较正常人[Tn:(45±8)μg/L,MDA:(87±9)μg/L,MMP-9:(342±165)μg/L]显著增高(P<0.05)。MMP-9与MDA的变化水平呈正相关(r=0.73,P<0.05),与SOD的含量呈负相关(r=-0.79,P<0.01)。AMI患者循环白细胞MMP-9 mRNA表达显著增强。结论AMI患者循环白细胞处于炎性状态,MMP-9 mRNA表达增强,并可能由此导致血浆MMP-9水平增高。监测血浆MMP-9的水平有可能成为了解AMI发生发展的一个重要诊断指标。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶9 心肌梗死 白细胞
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纳洛酮治疗乙醇与头孢类药物所致的双硫仑反应76例临床观察 被引量:6
4
作者 陈安清 夏丽君 +1 位作者 蒋建利 陈兴娥 《临床急诊杂志》 CAS 2009年第3期183-184,共2页
关键词 双硫仑样反应 头孢菌素类 乙醇
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β-连环素在信息传导中的研究进展 被引量:2
5
作者 陈芳 吴人亮 《国外医学(分子生物学分册)》 CSCD 2000年第1期52-56,共5页
β-连环素(β-cat)是实质细胞粘附连接处cadherin/cat复合体的胞内组成部分。近来发现,β-cat还参与Wnt信息传导途径及酪氨酸蛋白激酶信息传导途径,参与细胞的生长、分化、死亡及癌症发生。本文对β-cat的基因、蛋白质结构、β-cat在Wn... β-连环素(β-cat)是实质细胞粘附连接处cadherin/cat复合体的胞内组成部分。近来发现,β-cat还参与Wnt信息传导途径及酪氨酸蛋白激酶信息传导途径,参与细胞的生长、分化、死亡及癌症发生。本文对β-cat的基因、蛋白质结构、β-cat在Wnt信息途径及酪氨酸蛋白激酶信息途径的作用作一综述。 展开更多
关键词 Β-连环素 信号传导 酶氨酸蛋白激酶
原文传递
南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中的分泌型表达及酶学性质初探 被引量:5
6
作者 李迅 邓若冰 王飞 《四川师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期911-916,共6页
将南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA(含pAOX1启动子)和pGAPZαA(含pGAP启动子)中,转入毕赤酵母表达宿主KM71H,经三丁酸甘油酯平板活性筛选获得高效表达的酵母工程菌株.分泌型表达CLAB酵母工程菌的酶... 将南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA(含pAOX1启动子)和pGAPZαA(含pGAP启动子)中,转入毕赤酵母表达宿主KM71H,经三丁酸甘油酯平板活性筛选获得高效表达的酵母工程菌株.分泌型表达CLAB酵母工程菌的酶活较高,经摇瓶发酵96 h后,CLAB活力达到11.1 U/mL.经发酵罐高密度发酵84h后,CLAB活力达到179.2 U/mL,蛋白质量浓度为1.36 mg/mL.体积分数12%SDS-PAGE凝胶电泳显示重组CALB相对分子量为36 kDa.该酶最适温度为40℃,最适pH值为8.0.在pH7.5 -9.5较稳定,经55℃保温1h,残余酶活还有48.5%.5 mmol/L Mg^2+、Ni^+、Co^2+和体积分数0.10% SDS对CALB酶活影响很小,而Zn2强烈抑制酶催化反应,体积分数0.05% Triton X-100对CALB稍有激活作用。 展开更多
关键词 南极假丝酵母脂肪酶B 毕赤酵母 分泌表达 酶学性质
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神经酰胺在T细胞信号转导中的作用
7
作者 梅传忠 李柏青 《蚌埠医学院学报》 CAS 2006年第1期103-105,共3页
关键词 神经酰胺 T-淋巴细胞 信号转导 综述
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钙离子通道A23187诱导Hela细胞凋亡过程中钙调磷酸酶对乙酰胆碱酯酶表达的调控
8
《生命科学》 CSCD 2007年第2期193-193,共1页
2007年1月26日,中科院上海生科院生化细胞所张学军研究组在Biochimicaet Biophysica Acta上在线发表最新学术成果:钙离子通道A23187诱导Hela细胞凋亡过程中钙调磷酸酶对乙酰胆碱酯酶表达的调控。该论文对于深入了解凋亡细胞表达乙酰... 2007年1月26日,中科院上海生科院生化细胞所张学军研究组在Biochimicaet Biophysica Acta上在线发表最新学术成果:钙离子通道A23187诱导Hela细胞凋亡过程中钙调磷酸酶对乙酰胆碱酯酶表达的调控。该论文对于深入了解凋亡细胞表达乙酰胆碱酯酶机制,干预细胞凋亡过程,有一定意义。 展开更多
关键词 乙酰胆碱酯酶 细胞凋亡 钙调磷酸酶 钙离子通道 HELA 调控 诱导 学术成果
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水解酶模型分子的光谱特性研究
9
作者 房芳 林美荣 +1 位作者 林春晨 张包铮 《Chinese Journal of Chemical Physics》 SCIE CAS CSCD 1999年第5期553-558,共6页
研究具有催化活性的水解酶模型分子:三-(2-苯并咪唑甲基)胺(tris(2-benzimidazylmethyl)amine)与Cu(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)三种金属离子配位形成的配合物的紫外可见吸收光谱和荧光光谱。分析了MTB系列配合物的光谱的电子... 研究具有催化活性的水解酶模型分子:三-(2-苯并咪唑甲基)胺(tris(2-benzimidazylmethyl)amine)与Cu(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)三种金属离子配位形成的配合物的紫外可见吸收光谱和荧光光谱。分析了MTB系列配合物的光谱的电子跃迁,计算了不同pH值时的荧光量子产率。通过分析不同金属离子配合物及不同pH值时荧光量子产率和催化水解活性的关系,发现NTB系列配合物随着催化活性的增加,荧光量子产率有所降低的规律. 展开更多
关键词 NTB 水解酶 模型 水解 催化剂
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重组人脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及单克隆抗体制备 被引量:1
10
作者 欧兰香 陈振 +3 位作者 王佳颖 解光宁 王岩 朱之炜 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第22期2703-2707,共5页
目的构建重组人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的原核表达质粒,制备重组人Lp-PLA2,并通过免疫诱导获得人Lp-PLA2的单克隆抗体。方法以人cDNA文库为模板,通过PCR的方法获得PLA2G7基因的编码区序列,并与原核表达载体pET32a进行连接,构建原... 目的构建重组人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的原核表达质粒,制备重组人Lp-PLA2,并通过免疫诱导获得人Lp-PLA2的单克隆抗体。方法以人cDNA文库为模板,通过PCR的方法获得PLA2G7基因的编码区序列,并与原核表达载体pET32a进行连接,构建原核表达质粒,转化大肠杆菌Rostta(DE3)。通过在30℃0.2mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)条件下诱导蛋白表达,经过纯化获得重组人Lp-PLA2;免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体;并通过酶联免疫吸附试验法测定效价,检测抗体特异性。结果通过NotⅠ和SalⅠ双酶切及测序证实原核表达质粒构建成功;经纯化得到47×10^3左右的蛋白,与Lp-PLA2抗体进行蛋白免疫印迹法杂交呈阳性,表明已得到重组人Lp-PLA2。通过对小鼠免疫,最终获得单克隆抗体,效价为1∶2×10^6,与纤维蛋白原、C-反应蛋白无交叉反应。结论成功获得重组人Lp-PLA2,并制备得到了效价较高的单克隆抗体,为后续Lp-PLA2检测试剂盒的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 脂蛋白磷脂酶A2 原核表达 单克隆抗体
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黑曲霉产菊粉酶菌株的选育及培养基优化 被引量:3
11
作者 徐艳新 张伟国 葛向阳 《生物加工过程》 CAS CSCD 2014年第2期17-23,共7页
为获得高产菊粉酶的黑曲霉菌株,以Aspergillus niger YH-1为出发菌株,经过亚硝基胍(NTG)诱变,以高温高菊芋粉相结合的方式进行梯度驯化,选育出一株产菊粉酶菌株YH-3,并运用响应面实验方法对该菌株的培养基进行优化。确定了最佳培养基组... 为获得高产菊粉酶的黑曲霉菌株,以Aspergillus niger YH-1为出发菌株,经过亚硝基胍(NTG)诱变,以高温高菊芋粉相结合的方式进行梯度驯化,选育出一株产菊粉酶菌株YH-3,并运用响应面实验方法对该菌株的培养基进行优化。确定了最佳培养基组成:菊芋粉25.2 g/L、豆饼粉40 g/L、蔗糖酯4.9 g/L、NaCl 5.5 g/L。发现内切菊粉酶活力(I)由60.9 U/mL提高到165.0 U/mL,比出发菌株提高了1.7倍。研究证明蔗糖酯对于黑曲霉YH-3发酵产菊粉酶是一种有效的促进剂。 展开更多
关键词 黑曲霉 驯化 菊粉酶 诱变 响应面
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蛋白质酪氨酸磷酸酯酶(Protein Tyrosine Phosphatase)的功能作用
12
作者 廖侃 《生命科学》 CSCD 1995年第4期10-14,共5页
蛋白质酪氨酸磷酸酯酶(Protein Tyrosine Phosphatase)的功能作用廖侃(中国科学技术大学生物系合肥230027)80年代以来,蛋白质中酪氨酸残基的磷酸化由于它在调控细胞生长、分化和癌变中的重要... 蛋白质酪氨酸磷酸酯酶(Protein Tyrosine Phosphatase)的功能作用廖侃(中国科学技术大学生物系合肥230027)80年代以来,蛋白质中酪氨酸残基的磷酸化由于它在调控细胞生长、分化和癌变中的重要作用,一直是人们研究的焦点问题之一... 展开更多
关键词 蛋白质 酪氨酸磷酸酯酶 功能
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限制性核酸内切酶及其显带研究进展 被引量:1
13
作者 王智新 王昌留 《鲁东大学学报(自然科学版)》 2011年第2期154-157,共4页
介绍了核酸内切酶及其在基因工程中的应用,综述了人染色体、其它生物染色体显带概况,并对内切酶的显带机理进行了探讨.
关键词 限制性核酸内切酶 显带 研究进展
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微波辐射辅助木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的研究 被引量:3
14
作者 张琦 庞赛 +1 位作者 左继红 崔政伟 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第2期176-182,共7页
【目的】针对常规酶解反应所需时间较长,研究了微波辐射对蛋白酶水解蛋白质的影响,为蛋白的工业化快速酶解提供技术支持。【方法】根据木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的最佳工艺条件,用自行设计的微波辐射-蛋白酶催化反应器,在不加微波和480W... 【目的】针对常规酶解反应所需时间较长,研究了微波辐射对蛋白酶水解蛋白质的影响,为蛋白的工业化快速酶解提供技术支持。【方法】根据木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的最佳工艺条件,用自行设计的微波辐射-蛋白酶催化反应器,在不加微波和480W微波功率条件下(微波功率密度为4W/g),采用木瓜蛋白酶水解大豆蛋白,用甲醛滴定法测试水解液中氨基酸含量,比较2种条件下的水解效果,并用高效液相色谱法分析了2种条件下水解液中氨基酸的组成。【结果】不加微波条件下氨基氮含量达到0.535 5g/L需要水解5h,而在480 W微波辐射下水解1h,氨基氮含量就达到了0.568 7g/L,反应速率提高了5倍以上。高效液相色谱分析表明,于常规条件下水解5h和480W微波辐射辅助水解1h,木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的酶解液中游离氨基酸含量和总氨基酸含量基本相同。【结论】微波辐射可以加快蛋白酶水解反应,提高反应速率。 展开更多
关键词 木瓜蛋白酶 酶解 微波辐射 大豆蛋白
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减少测定纤维素酶误差的研究 被引量:2
15
作者 林开江 陈兵 《浙江农业科学》 北大核心 1995年第2期55-57,共3页
减少测定纤维素酶误差的研究林开江,陈兵(浙江省农业科学院微生物研究所)测定纤维素酶有许多方法,底物主要有两类:一为改性纤维素,如羧甲基纤维素钠(Amano测定法)、羟基乙基纤维素(国际药品联合会提供的测定法)、磷酸纤... 减少测定纤维素酶误差的研究林开江,陈兵(浙江省农业科学院微生物研究所)测定纤维素酶有许多方法,底物主要有两类:一为改性纤维素,如羧甲基纤维素钠(Amano测定法)、羟基乙基纤维素(国际药品联合会提供的测定法)、磷酸纤维素(Merz测定法);另为天然结... 展开更多
关键词 纤维素酶 误差 测定
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葡萄球菌核酸酶去C-末端的肽段52和79的分离纯化
16
作者 耿芳宋 静国忠 +2 位作者 许小幸 段建华 王秀丽 《青岛医学院学报》 1997年第3期195-196,共2页
①目的建立金黄色葡萄球菌核酸酶(SNase)去C-末端的肽段52(SN52)和79(SN79)的提纯方法,并鉴定其纯度。②方法应用低温乙醇沉淀,SephadexG-50和SephacrylS-100柱层析分离纯化;十... ①目的建立金黄色葡萄球菌核酸酶(SNase)去C-末端的肽段52(SN52)和79(SN79)的提纯方法,并鉴定其纯度。②方法应用低温乙醇沉淀,SephadexG-50和SephacrylS-100柱层析分离纯化;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和高效液相层析(HPLC)鉴定其纯度。③结果纯化的SN52和SN79经SDS-PAGE鉴定均为单一区带;HPLC鉴定均为一个峰。④结论纯化的SN52和SN79已达电泳纯和层析纯,可用于其构象的比较研究。 展开更多
关键词 葡萄球菌 核酸酶 肽片段 提纯
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DTT水解大豆胰蛋白酶抑制剂的研究
17
作者 赵美琳 张素霞 《四川职业技术学院学报》 2010年第3期120-122,共3页
大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)可以抑制一些来源于动物或植物的蛋白酶的活力,使之降低水解蛋白质的效力,降低蛋白质的利用率。本文主要选取二巯基苏糖醇(DTT)采用分光光度法、SDS-PAGE和GPC色谱法相结合测定DTT对大豆胰蛋白酶抑制剂的水解程... 大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)可以抑制一些来源于动物或植物的蛋白酶的活力,使之降低水解蛋白质的效力,降低蛋白质的利用率。本文主要选取二巯基苏糖醇(DTT)采用分光光度法、SDS-PAGE和GPC色谱法相结合测定DTT对大豆胰蛋白酶抑制剂的水解程度进行研究。 展开更多
关键词 DTT 水解 大豆胰蛋白酶抑制剂
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黑曲霉A_(34)菌株的木聚糖酶分离纯化及其性质研究 被引量:3
18
作者 杨瑞鹏 胡慰望 赵学慧 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期117-123,共7页
用经硫酸铵分级沉淀,Bio—gel P-60凝胶过滤和DEAE—离子交换层析,从黑曲霉木聚糖菌株A_(34)的麦麸培养物中,分离纯化得到5个木聚糖酶组分(Ax_1、Ax_2、Ax_3、Ax_4、Ax_5).聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳表明均为单一带。SDS—凝胶电泳法测得... 用经硫酸铵分级沉淀,Bio—gel P-60凝胶过滤和DEAE—离子交换层析,从黑曲霉木聚糖菌株A_(34)的麦麸培养物中,分离纯化得到5个木聚糖酶组分(Ax_1、Ax_2、Ax_3、Ax_4、Ax_5).聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳表明均为单一带。SDS—凝胶电泳法测得分子量分别是,Ax_1为101000,Ax_2为38000,Ax_3为3000,Ax_4为24000,Ax_5为29000.圆盘等电聚胶电泳法测定5个组分的等电点分别为5.80、4.35、5.75、5.20、4.00.热处理60分钟,Ax_1、Ax_2、Ax_3、Ax_4和Ax_5的半失活温度(℃)分别为57.6、51.5、68、52.4和56.5。各组分的A_(210)^(1cm)分别为11.3,9.7,13.6,11.5和11.4. 展开更多
关键词 黑曲霉 木聚糖酶 理化性质鉴定
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绿色木霉A_(10)纤维素酶的分离纯化及理化性质研究 被引量:37
19
作者 周津 阮宏 孙连魁 《西北大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1994年第5期465-470,共6页
绿色木霉A_(10)纤维素酶A_2的C_1酶和Cx酶被分离纯化。C_1酶的分子量为54,49,44.5kd(三个亚基),最适温度为50℃,最适pH为5.0;Cx酶的分子量为17.5kd,最适温度为55℃,最适pH为4... 绿色木霉A_(10)纤维素酶A_2的C_1酶和Cx酶被分离纯化。C_1酶的分子量为54,49,44.5kd(三个亚基),最适温度为50℃,最适pH为5.0;Cx酶的分子量为17.5kd,最适温度为55℃,最适pH为4.5。两者均为糖蛋白,富含极性氨基酸,水溶性好。 展开更多
关键词 纤维素酶 分离纯化 物理化学特性
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一株产耐热甘露聚糖酶细菌的筛选及其酶学性质初探 被引量:1
20
作者 王瑞君 成莉凤 +5 位作者 冯湘沅 段盛文 郑科 刘志远 曾洁 刘正初 《中国麻业科学》 2017年第5期234-240,共7页
为获得耐热甘露聚糖酶,从天然高温泉水中筛选出了一株产甘露聚糖酶的细菌。结合形态学、生理生化和分子生物学等手段,确定所筛选的菌株为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。并研究了温度、pH值和金属离子等因素对甘露聚糖酶活力的... 为获得耐热甘露聚糖酶,从天然高温泉水中筛选出了一株产甘露聚糖酶的细菌。结合形态学、生理生化和分子生物学等手段,确定所筛选的菌株为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。并研究了温度、pH值和金属离子等因素对甘露聚糖酶活力的影响。结果显示,该酶的最适反应温度和pH分别为60℃和5.0。Co^(2+)和Al^(3+)对该酶的活力有抑制作用,Mn^(2+)、K^+和Ca^(2+)对该酶活力有一定的促进作用,其它离子对酶活力没有显著影响。该菌株生产的甘露聚糖酶具有耐热偏酸性的特点。该研究为甘露聚糖酶制剂产业提供了可靠的菌种资源,可用于纺织、食品、饲料等方面,并为将来进一步研究其用途奠定了基础。 展开更多
关键词 耐热甘露聚糖酶 地衣芽孢杆菌 筛选 酶学性质
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